Helminții igg dacă cel mai bine. Instrumente și truse de reactivi pentru ELISA de producție rusă Kundelsky R.V., Ph.D.

DROGURI

EVALUAREA UNUI SISTEM DE TESTARE ELISA NOI

„Rotavirus-antigen-ELISA-BEST”

12Zhirakovskaya E.V., 3Ignatiev G.M., 3Indikova I.N., 12Tikunova N.V.

1 Instituția științifică de stat federală SSC VB „Vector” din Rospotrebnadzor, așezarea Koltsovo, regiunea Novosibirsk;

2 Institutul de Biologie Chimică și Medicină Fundamentală, Novosibirsk;

3 Institutul de Stat pentru Standardizarea și Controlul Preparatelor Biologice Medicale denumit după LA. Tarasevichag Moscova

Sunt prezentate rezultatele testării sensibilității, specificității și reproductibilității unui nou set de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” dezvoltat în JSC „Vector-Best” (Novosibirsk). Datele obținute fac posibilă prezicerea fiabilității diagnosticului a rezultatelor atunci când se utilizează acest sistem de testare pentru a detecta antigenul rotavirus de grup A în materialul clinic.

Cuvinte cheie: sistem de testare ELISA, eficiență, rotavirus A

Rotavirusurile din grupa A (familia Reoviridae, genul Rotavirus) sunt cea mai frecventă cauză a gastroenteritei severe la copiii mici din întreaga lume. Adulții imunocompromiși se îmbolnăvesc adesea. Infecția cu rotavirus (RVI) este o boală foarte contagioasă cu moduri multiple distributie. Sursa de infecție este o persoană cu o formă manifestă sau asimptomatică a bolii, precum și un purtător de virus. În rândul copiilor și adulților, RVI se poate manifesta sub formă de cazuri sporadice, boli de grup local, focare și este larg răspândită. Mecanismul fecal-oral de transmitere a acestei infecții se realizează prin alimente (lapte și produse lactate, mâncarea copiilor), apă și căi de contact-gospodărie.

Diagnosticul gastroenteritei cu rotavirus conform tabloului clinic, în special cu morbiditate sporadică, prezintă o anumită dificultate, întrucât simptomele caracteristice acestei infecții diferă puțin de simptomele altor infecții intestinale acute (AII) de diverse etiologii. Diagnostic diferentiat la pacienții cu gastroenterită cu rotavirus, se efectuează atât cu infecții toxice alimentare, cât și cu alte etiologie virale (norovirusuri, astrovirusuri, adenovirusuri, coronavirusuri, enterovirusuri Coxsackie și ECHO) și bacteriene (salmoneloză, dizenterie, holeră, yersinioză, microorganisme oportuniste). Din păcate, nu toate sunt specializate institutii medicale RF diagnostichează infecția cu rotavirus.

Metode de diagnosticareîn RVI, acestea au ca scop detectarea virionilor întregi, antigenului viral sau ARN-ului specific virusului în fecale. O abordare promițătoare pentru detectarea directă a virușilor atât în materialul clinic, cât și în obiecte mediu inconjurator, este o metodă de transcriere inversă - prin polimerază reacție în lanț(RT-PCR). LA anul trecut sistemele de testare sunt create pe baza modernului evoluții științifice cu combinatie diverse metode detectarea rotavirusurilor: PCR multiplex cu detecția prin hibridizare-fluorescență a produselor de amplificare „până la punctul final”; imuno-PCR final (IPCR) cu detecție în timp real; RT-PCR cantitativ cu detectare în timp real. În laboratoarele de cercetare, microscopia electronică este utilizată pentru a detecta rapid rotavirusurile. Cu toate acestea, toate metodele de mai sus sunt destul de laborioase și necesită instrumente scumpe și personal înalt calificat. Prin urmare, la efectuarea diagnostic de laboratorîn spitale și în ambulatoriu, se preferă metodele bazate pe detectarea antigenului viral în fecale folosind testul imunosorbent legat de enzime (ELISA) cu anticorpi mono- și poliponici împotriva rotavirusurilor. Această metodă este disponibilă pentru laboratoarele practice, este ușor de configurat și vă permite să obțineți rapid rezultatul.

Scopul acestei lucrări este de a studia eficiența de diagnosticare a unui nou set de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” dezvoltat în JSC „Vector-Best”, Novosibirsk.

^septembrie-decembrie

Materiale și metode

Materialul studiului au fost probele de fecale ale copiilor vârstă fragedă cu diagnostic de AII si fara manifestari clinice infecție intestinală care au fost internaţi în secţiile de infecţii intestinale şi infecție respiratorie MUZ „Orașul copiilor Spitalul clinic Nr. 3 „Novosibirsk. Probele de fecale au fost colectate în recipiente de plastic steril de unică folosință în volum de 2-3 ml la internarea pacienților în secția spitalului și păstrate la -20 °C timp de 15 zile. Depozitarea mai lungă a materialului a fost efectuată la -70 °C.

În lucrare a fost utilizat un panou de 104 probe de fecale testate anterior pentru prezența agenților patogeni AII. Dintre ei:

30 de probe în care numai rotavirusuri de grup A au fost detectate prin ELISA și RT-PCR; genotiparea prin RT-PCR a arătat că probele fecale au conținut rotavirusuri de genotip PG1 (18 probe), PG2 (4 probe), PG3 (3 probe), PG4 (2 probe), PG4 (1 probă), PG9 (1 probă) , PG3 (1 probă);

14 probe în care au fost detectate doar norovirusuri ale celui de-al doilea genotip prin RT-PCR, ceea ce a fost confirmat prin determinarea secvenței de nucleotide a regiunii 5" a genei capsidei situată pe genomul norovirusului în regiunea 5085-5485 h.;

15 probe în care au fost detectate doar astrovirusuri prin RT-PCR, ceea ce a fost confirmat prin determinarea secvenței de nucleotide a regiunii 5" a genei capsidei situată pe genomul astrovirusului în regiunea de 4526 - 4955 bp; 15 probe în care Metoda PCR au fost detectate doar adenovirusuri;

30 probe de fecale (control) de la copii fără manifestări clinice de infecție intestinală, internați în secția respiratorie a spitalului; analiza preliminară nu a evidențiat agenții patogeni virali de mai sus în aceste probe.

Testarea probelor pentru prezența sau absența rota-, noro-, astro- și adenovirusuri a fost efectuată prin RT-PCR folosind kituri comerciale înregistrate în Federația Rusă „AmpliSense No virus 1, 2 genotips - 306/322”, „AmpliSense”. Astrovirus -165", "AmpliSense Adenovirus - 462", "AmpliSense Rotavirus - 290" (fabricat de Institutul Central de Cercetare de Epidemiologie, RF). Studiul probelor s-a efectuat în conformitate cu instrucțiunile de utilizare a kitului respectiv de reactivi în perioada de expirare. Probele pozitive pentru rotavirus au fost genotipate prin RT-PCR. Determinarea prezenței sau absenței antigenului rotavirus a fost de asemenea efectuată prin ELISA utilizând un sistem comercial de testare IDEIA™ Rotavirus, (DakoCytomation, UK) în conformitate cu instrucțiunile pentru trusă.

La testarea trusei de reactivi „Rota-virus-antigen-ELISA-BEST” toate probele de mai sus (104) au fost criptate și testate de trei ori cu kitul de testare. După finalizarea testelor, probele au fost decodificate și rezultatele analizate.

rezultate si discutii

Sensibilitatea trusei de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” a fost evaluată prin numărul de potriviri rezultate pozitive(în %) testarea probelor folosind sistemul de testare și comparatori testați. În același timp, s-a constatat că la utilizarea trusei de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST”, toate cele 30 de probe cu prezența confirmată a rotavirusului A au fost pozitive (Tabelul 1). Prin urmare, sensibilitatea setului de test de reactivi pentru detectarea rotavirusului A a fost de 100%. Trebuie remarcat faptul că panoul a inclus probe cu șapte genotipuri diferite de rotavirus și toate au fost detectate cu succes de kitul de reactiv Rota virus - antigen - AND FAB EST.

Specificitatea sistemului de testare a fost evaluată prin numărul de coincidențe ale rezultatelor negative (în %) ale probelor de testare folosind sistemul de testare testat cu date din studiile preliminare. Pentru a evalua specificitatea, panoul utilizat a inclus 30 de probe în care nu au fost detectați agenți patogeni virali, precum și 14 probe în care au fost detectate doar norovirusuri din al doilea genotip folosind metoda RT-PCR, 15 probe în care RT-PCR a detectat doar astrovirusuri. ; 15 probe în care au fost detectate doar adenovirusuri prin PCR. S-a stabilit că în 69 din 74 de probe negative, valorile densităților optice detectate de kitul de reactivi Rotavirus-antigen-ELISA-BEST pentru prezența rotavirusului A nu au depășit valorile de fond, adică valorile obținută ca urmare a măsurării densității optice în probele de control negative. Două probe care conțin astrovirusuri, o probă - norovirus al doilea genotip, o probă - adenovirus și două probe în care niciunul dintre agenții patogeni virali de mai sus nu a fost detectat, au prezentat valori pozitive ale densității optice. Trebuie remarcat faptul că în probele în care niciunul dintre agenții patogeni virali nu a fost detectat anterior, semnalele pozitive au fost înregistrate doar într-unul dintre studiile repetate (Tabelul 2). Astfel, specificitatea trusei de reactivi „Ro-tavirus-antigen-ELISA-BEST” a fost de 93,2%.

În timpul testelor, s-a evaluat reproductibilitatea rezultatelor obținute folosind setul de test de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” pe material clinic - toate probele au fost examinate de trei ori în diferite experimente pentru a determina variația rezultatelor. În aproape toate cazurile, s-au obținut rezultate similare: sistemul de testare a detectat toate probele negative și pozitive în același mod. Excepția au fost două probe în care niciunul dintre agenții patogeni virali nu a fost detectat anterior: într-una dintre repetări pentru ambele probe, valorile densității optice au depășit ODcritul. De remarcat faptul că excesul a fost nesemnificativ (Tabelul 2). Astfel, reproductibilitatea rezultatelor a fost de 98,8%.

Rezultatele testelor au arătat că setul de reactivi testat „Rotavirus-antigen-IFA-BEST” în ceea ce privește eficiența de diagnosticare - specificitate, sensibilitate și reproductibilitate - este comparabil cu diagnosticele disponibile în Federația Rusă.

folosind trusa de testare „Ro-tavirus-antigen-ELISA-BEST” pentru detectarea antigenului rotavirus grup A în materialul clinic.

Literatură

1. Bogomolov B.P. // „Boli infecțioase: diagnostic de urgență, tratament, prevenire”. - M., nou diamed. - 2007.

2. Vasiliev B.Ya., Vasil'eva R.I., Lobzin Yu.V.// „Acute boli intestinale. Rotavirusuri și infecție cu rotavirus. - S.-Pb., Lan. - 2000.

3. Zhirakovskaya E.V., Tikunov A.Yu., Bodnev O.A., și colab.// „BIOpreparations”. - 2008 - Nr. 2. - str. 15 - 18.

4. Zhirakovskaya E.V., Maleev V.V., Bodnev A.S. si altele // JMEI - 2008 - Nr. 4. - Cu. 12 - 16.

5. Ignatyuk T.E., Golutvin I.A., Nasikan N.S., și colab. // Probleme de virologie. - 2003. - v. 48. - Nr. 6. - str. 1721.

6. Novikova N.A., Fedorova O.F., Epifanova N.V., Chup-rova A.B. // „Probleme de virologie”. - 2007. - v.52. -№ 3 - cu. 19-23.

7. A. T. Podkolzin, A. A. Mukhina, G. A. Shipulin, et al.//

"Boli infecțioase". - 2004. - v. 2. - Nr. 4. - str. 85-91.

8. Podkolzin A.T., Fenske E.B., Abramycheva N.Yu., et al.// Arhiva terapeutică. - 2007. - v. 79. - Nr. 11. -p. 10-16.

9. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., și colab. // „Epidemiologie și boli infecțioase". -2004.-Nr 6.-p. 17-20.

10. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., ș.a. // Igienă și salubritate. - 2007. - Nr. 1. - str. 56-58.

11. Arcangeletti M.C., De Conto E, Pinardi F., at al. // Acta Biomed. Ateneo. Parmense. - 2005.-V. 76(3). - P. 165-170.

12. Gladstone B.P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., at al. // Epidemiol. Infecta. - 2008. V. 136(3). - P. 399-405.

13. Min B.S., NohYJ., Shin J.H., atal. //J. Virol. metode. -2006. - V. 137(2). - P. 280 - 286.

14. Santos N., Honma S., Timenetsky Mdo C., at al. //J. Clin. microbiol. - 2008. V. 46 (2). - P. 462 - 469.

15 Schets F.M., van Wijnen J.H., Schijven J.F., at al. //Appl. Mediul. microbiol. - 2008. - V. 74 (7). - P. 2069 - 2078.

16. Stockman L.J., Staat M.A., Holloway M., at al. // J. Clin. microbiol. - 2008. - V. 46 (5). - P. 1842 - 1843.

Evaluarea sensibilității și specificității trusei de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST”

tabelul 1

Nr. Nr. Număr de probe Rezultatele detectării cu medicamente de comparație IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR Rezultatele detectării cu kitul Rotavirus-antigen-ELISA-BEST

1. 30 30 0 0 0 30

2. 15 0 15 0 0 2

3. 14 0 0 14 0 1

4. 15 0 0 0 15 1

Evaluarea specificității trusei de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST> -

masa 2

PCR AmpliSense

rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus

0,443 1,306 0,676 0,418

Rotavirus-antigen-IFA-BEST CJSC „Vector-Best”

OPCrit OPCrit OPCrit

0,250 0,263 0,251

> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939

> 4,000 > 4,000 > 4,000

£septembrie

decembrie 2009

AmpliSense

rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus

IDEA Rotavirus DakoCytomation RPC = 0,150

0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040

Rotavirus-

OPcrit 0,250

> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972

> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800

> 4,000 3,981

> 4,000 3,713

> 4,000 4.000

> 4,000 3,989

> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062

antigen-ELISA-BEST "Vector-Best"

OPcrit OPcrit 0,263 0,251

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,821 3,899

> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871

> 4,000 3,929

> 4,000 3,881 3,884 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,995

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,837 3,839

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,986

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,998

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052

astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus

IDEA Rotavirus DakoCytomation OIIKpHT = 0,150

0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039

PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO „BeKTop-EecT”

OnKpHT OnKpHT OIIKpHT

0,250 0,263 0,251

0,115 0,075 0,082

0,053 0,046 0,058

0,233 0,198 0,189

0,144 0,105 0,128

0,243 0,062 0,073

0,043 0,040 0,046

0,069 0,043 0,041

0,143 0,044 0,058

0,220 0,206 0,230

3,475 2,577 2,405

0,223 0,247 0,240

0,232 0,236 0,231

0,048 0,042 0,041

0,121 0,085 0,093

0,132 0,111 0,174

0,122 0,052 0,063

0,061 0,044 0,054

0,073 0,035 0,048

0,089 0,046 0,046

0,047 0,043 0,044

0,041 0,039 0,044

0,083 0,046 0,038

0,168 0,074 0,097

0,247 0,118 0,099

0,248 0,251 0,242

0,243 0,259 0,250

0,054 0,048 0,055

0,048 0,040 0,037

0,058 0,045 0,046

0,053 0,045 0,049

0,069 0,058 0,065

0,912 0,344 0,379

0,089 0,037 0,042

decembrie 2009

PCR AmpliSense

adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ

IDEA Rotavirus DakoCytomation RPC = 0,150

0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036

Rotavirus - antigen - ELISA-BEST CJSC "Vector-Best"

OPCrit O P Crit OPCrit

0,250 0,263 0,251

0,105 0,042 0,043

0,046 0,143 0,133

0,227 0,045 0,042

0,065 0,068 0,054

0,125 0,039 0,042

0,196 0,191 0,182

0,209 0,170 0,154

0,316 0,071 0,073

0,058 0,043 0,049

0,171 0,056 0,061

0,049 0,060 0,064

0,047 0,062 0,065

0,058 0,047 0,066

0,073 0,072 0,066

0,188 0,120 0,109

0,180 0,074 0,072

0,057 0,063 0,058

0,047 0,060 0,047

0,162 0,146 0,143

0,248 0,248 0,260

0,063 0,066 0,104

0,247 0,223 0,251

0,054 0,053 0,070

0,242 0,240 0,248

0,073 0,061 0,103

0,066 0,065 0,064

0,108 0,123 0,192

0,072 0,067 0,071

0,079 0,079 0,087

0,104 0,079 0,164

0,169 0,150 0,162

0,140 0,166 0,146

0,114 0,133 0,131

Tratamentul helmintiazelor la copii este extrem de important, deoarece consecințele acestui lucru pot fi o întârziere în dezvoltarea proceselor fizice și mentale, patologice. organe interneși sisteme, chiar și moarte. În plus, infestările cu helminți sunt foarte contagioase, motiv pentru care se răspândesc atât de ușor în instituțiile preșcolare și școlare. Din aceasta se vede clar cât de important tratament în timp util helmintiaza la copii.

Primele semne de helminți la copii

Viermii sunt agenți patogeni oportuniști corpul uman, viermi pentru care oamenii sunt gazda definitivă. Mai mult, în această problemă Vârsta proprietarului nu contează. tipuri diferite helmintiazele pot fi observate atât la copii, cât și la pacienții adulți.

Cât de periculoasă este helmintiaza pentru un copil?

După cum am menționat mai devreme, helminții la copii pot provoca boala gravași patologii, în urma cărora dezvoltarea mentală și fizică încetinește. Complicații posibile fiecare tip de helmintiază poate fi complet diferit, de exemplu:

Prin urmare, helmintiazele copiilor necesită și mai multă atenție, asistență medicală în timp util, observație pe termen lung la un specialist și prevenire.

Principalele simptome la copii

Simptomele helmintiazelor la un copil pot fi diferite, în funcție de tipul de viermi:

1. Ascaris se manifestă imediat ca o reacție alergică, febră și greață la copil. Primele apariții sunt de obicei luminoase, dar se sting rapid. Atunci pot apărea următoarele simptome:

colici și disbacterioză și nou-născuți;
la bebelușii sub 1 an, dureri la buric, probleme cu scaunele, alergii și diateză;
copiii mai mari au probleme de somn, comportament neliniştit, coşmaruri;
pentru copiii de 3-7 ani, greața, febra, tusea și durerile abdominale sunt caracteristice erupții cutanate.

2. Enterobioza, al cărei agent cauzal sunt oxiuri, se manifestă ca un tablou clinic. Și numai după 1 lună puteți observa următoarele simptome:

la nou-născuți, inflamație, umflare și roșeață a anusului, refuz de a mânca, plâns noaptea, lipsă de apetit;
copiii sub un an au aceleași simptome, precum și mâncărimi severe ale anusului pe timp de noapte (de la 23:00 la 1:00), fetele suferă de inflamație a organelor genitale;
la copiii mai mari, durere în abdomen în apropierea buricului, tulburări de somn, mâncărime în fese.

3. Simptomele toxocariozelor sunt greu de recunoscut, cu excepția temperatură mică corp și reactii alergice(erupții cutanate, urticarie, mâncărime și umflături). După infecție, poate apărea o tuse, care mai târziu provoacă pneumonie sau bronșită, mai ales la cei mai mici pacienți.

Trichineloza sugerează semne ușoare la nou-născuți, în caz contrar se observă următoarele semne:

stare febrilă;
umflarea feței;
dureri musculare;
reactii alergice;
copiii cu vârsta de peste 5 ani pot avea amigdalele mărite, splina, erupții cutanate și dureri în gât.

Cel mai dificil este să diagnosticați simptomele helmintiazelor la copiii cu vârsta de 2 ani și mai mici, deoarece copilul nu poate explica comportamentul și starea sa. Prin urmare, pentru orice manifestări și comportament atipice al copilului, este mai bine să arătați medicului.

Ce trebuie făcut mai întâi?

Viermi care au fost găsiți în fecale un copil este cel mai important semn al bolii, după care ar trebui să solicitați imediat ajutor de la un medic. Niciun tratament cu helminți nu poate avea succes fără un diagnostic adecvat. Metodele de anchetă în acest caz ar trebui să fie cuprinzătoare, inclusiv următoarele proceduri:

luarea unei zgârieturi din anus;
studiul fecalelor copilului;
analize de sânge;
biopsie musculară în cazuri rare cu suspiciune de trichineloză;
test serologic de sânge;
radiografie, ecografie, tomografie;
ELISA pentru detectarea anticorpilor în sânge.

Metode de tratament

Tratamentul helmintiazelor la copii ar trebui să fie cuprinzător, bine gândit, programat cu doze exacteși frecvența administrării medicamentelor. Acest lucru se datorează faptului că medicamentele cu componente toxice sunt utilizate pentru efectul antihelmintic, ceea ce înseamnă că utilizarea irațională poate duce la efecte secundare. În plus, acasă este potrivit tratament popular plante medicinale.

Remedii populare

Tratamentul modern cu remedii populare pentru astfel de boli pentru copii implică 4 moduri eficiente:

Orice metodă de tratament la domiciliu trebuie discutată cu medicul dumneavoastră în prealabil. Trebuie amintit că pentru ierburi și remedii populare contraindicațiile sunt prevăzute sub formă de intoleranță individuală.

Tratament medical

În cazul enterobiazei și ascariazei, se folosesc de obicei medicamente precum Pirantel și Mebendazol. Recepția Pirantel este adecvată la o doză de 10 mg de substanță pe kilogram de greutate de la oxiuri și 5 mg / kg de la viermi rotunzi. Mebendazolul se ia de două ori pe zi la 50 mg la copiii de 2-3 ani timp de trei zile la rând, de două ori la 100 mg timp de trei zile la rând la copiii de peste 3 ani, după 3 săptămâni terapia se repetă.
Cu toxocarioza, Mebendazol este prescris într-o doză diferită - pentru copiii de 2 ani și peste, 100 mg de două ori pe zi timp de 14-10 zile.
Tratamentul trichinelozei acceptă Mebendazol 5 mg pe kilogram de greutate, după care doza este împărțită în trei doze pe zi. Cursul de tratament este de 1 săptămână sub stricta supraveghere a unui medic.

Prevenirea helmintiazelor

spălarea mâinilor imediat după contactul cu animalele, după stradă și cutii cu nisip, mersul la toaletă și înainte de a mânca;
consumul numai de alimente curate;
tratamentul termic efectuat în mod corespunzător al produselor din carne și pește;
bea apă fiartă;
respectarea igienei personale si a salubritatii;
deparazitarea regulată a animalelor de companie;
deparazitarea preventivă la copiii cu vârsta de 2 ani și peste.

Test de sânge pentru toxocara

Caracteristicile infecției umane cu toxocarioză

Purtătorii infecției sunt câinii, mai rar pisicile. Ouăle de Toxocara sunt vărsate în fecale caini vagabonzi. Odată ajunse la pământ, în apă sau zăbovind pe blana unui animal, acestea sunt introduse într-un organism sănătos în diferite moduri.

Reacția la un intrus

Din statistici medicale se știe că adulții sunt mai puțin susceptibili de a se infecta cu toxocariază, cu excepția cazului în care ocupația lor este în pericol. Copiii sunt mult mai susceptibili de a face o infectie.

Cele mai frecvente simptome ale toxocariozei sunt:

Febră fără semne de boală.
Cresterea temperaturii.
Durere în creștere și atenuare în cap sau abdomen.
Apariția unei erupții cutanate care nu poate fi eliminată.
Umflarea feței.
O creștere a nivelului de eozinofile din sânge, evidențiată în analiza generală.

Pentru a face un diagnostic precis, este prescrisă o analiză imunologică pentru toxocara. Prezența compușilor proteici în sânge care poartă informația genetică a helminților (antigene) provoacă imunitate pentru a produce anticorpi din clasa igg. Acesta este primul semn de infecție cu toxocarioză.

Diagnosticare preliminară

Stadiul inițial al istoricului pacientului este colectiv. Înainte de a trimite un pacient să facă un test de sânge pentru toxocaroză, este necesar să se studieze istoricul bolii și să se facă o examinare preliminară.

Diagnosticul primar:

Investigarea circumstanțelor agravante care ar putea provoca infecția - munca specifică cu animale sau prezența animal de companie, terasamente in zone potential periculoase, copii care se joaca in zonele de plimbare a cainilor.
Examenul fizic al pacientului. Studiu piele pentru invazie subcutanată cu toxocars, pleoape și globii oculari, palpare.
Numirea unui test de sânge detaliat. În timpul infecției cu toxocarioza, este caracteristică o creștere semnificativă a unor indicatori - eozinofile (70-80%), limfocite, VSH. În timp ce nivelul hemoglobinei scade semnificativ.
Prelevarea de probe de ficat. În invazia severă, este afectată sarcina asupra ficatului, care se manifestă printr-un salt puternic al bilirubinei.

Este imposibil să se obțină confirmarea directă a invaziei cu toxocara folosind teste convenționale (sânge, coprogram, frotiu). Examenul duodenal este, de asemenea, neinformativ, deoarece este dificil pentru natura migratoare a larvelor.

După primirea rezultatelor examinării preliminare, indicând posibila infectie toxocars, și diferențierea presupusului diagnostic de boli cu simptome similare, pacientului i se atribuie un ELISA pentru toxocaroză.

Test imunosorbent legat

Scopul principal al acestui studiu este de a confirma prezența toxocarilor în corpul uman. Anticorpii la acești helminți se găsesc în plasma sanguină, deci este prelevat dintr-o venă.

Analiza Toxocara necesită o anumită pregătire:

Nu mâncați alimente grase și grele cu o zi înainte de procedură.
Nu beți băuturi zaharoase, carbogazoase și alcoolice în timpul zilei înainte de a vizita laboratorul.
Dă teste de post.
Nu folosi medicamenteîn ziua precedentă și ziua în care este programată analiza.

Trebuie remarcat faptul că această metodă foarte informativă de detectare a invaziei poate fi afectată de anumite circumstanțe. Un rezultat fals pozitiv poate apărea dacă pacientul are:

Boli oncologice.
Tuberculoza plămânilor.
Patologii hepatice severe.
sindrom autoimun.
Sindromul antifosfolipidic.
Sarcina.

În acest caz, nu va fi posibilă obținerea unei analize de confirmare 100%, deoarece în circumstanțele enumerate, sistemul de protecție produce și imunoglobuline (anticorpi). Este necesar să se efectueze diagnostice suplimentare și să se diferențieze toxocarioza de factorii enumerați.

Concentrația de imunoglobuline (titrul) din clasa IgG atinge valoarea maximă posibilă după 2-3 luni de la debutul invaziei. Cu cât infecția este mai gravă, cu atât este mai mare această rată.

Rezultate ELISA

Pentru a pune un diagnostic, imunotestul enzimatic este atent studiat, rezultatele obținute sunt comparate cu valorile de referință. Norma este un titru de anticorpi de 1:100 cu un indice de pozitivitate mai mic de 0,9.

Valorile numerice ale creditelor

Rezultatele obținute pot fi negative, pozitive, slab pozitive sau discutabile. Numărul titrurilor de anticorpi depinde de severitatea invaziei și de durata apariției acesteia.

transcrierea analizei:

AT titru până la 1:100 - rezultatul este negativ. Larve de Toxocara nu au fost găsite în corpul pacientului.
AT titru până la 1:400 - rezultatul este slab pozitiv. Pacientul are o invazie slabă sau dezvoltă o formă oculară de toxocariază. În unele cazuri, indicatorul indică o infecție recentă.
AT titru până la 1:600 - rezultatul este pozitiv. Omul suferă forma clinica helmintiaza, a cărei depistare necesită terapie imediată.
AT titru până la 1:800 - rezultatul este pozitiv. Vorbește despre o invazie severă de natură progresivă și un grad ridicat de probabilitate a dezvoltării unui proces patologic al organelor interne.

Cu rare excepții, studiul ELISA relevă o formă neglijată de invazie cu un amestec de helmintiază de altă origine. În acest caz, numărul total de anticorpi poate fi mai mare de 1:800.

Coeficientul de pozitivitate

La imunotestul enzimatic pentru toxocaroza cu un titru de 1:400 - 1:600 pentru a diferenția invazia de factori secundari, indicatorii obținuți sunt comparați cu valoarea de referință. Diferența dintre aceste cifre se numește în mod obișnuit indice sau coeficient de pozitivitate.

De obicei, sub forma ELISA efectuată, un indicator este opus celuilalt. Prima este norma, a doua poate însemna:

Până la 0,9 - rezultatul este negativ. Larve de Toxocara nu au fost găsite.
0,9-1,1 - rezultatul este îndoielnic. În acest caz, se atribuie o re-diagnosticare.
1.1-2.2 - rezultatul este ușor pozitiv. O persoană este un transportator cu o invazie slabă.
2.2-4.2 - rezultatul este pozitiv. Toxocaroza moderat se dezvoltă de mult timp.
Peste 4,4 - rezultatul indică vârful invaziei helmintice sau o helmintiază recentă.

CP cu un rezultat de 4,4 și o creștere detectată a eozinofiliei cu 10% poate indica dezvoltarea forma ochiului toxocarioza și prezența anticorpilor împotriva invaziei încrucișate, total până la toxocaroza.

Răspunsul imun și densitatea optică a anticorpilor (coeficientul de pozitivitate) depind de gradul de infecție cu Toxocara și de locul de localizare a acestora. Titrul cel mai scăzut și indicatorul CP permit doar să presupunem absența helminților, dar nu să afirmați acest lucru.

Informațiile prezentate nu pot servi ca sursă de autodiagnostic sau auto-tratament. Rezultatele ELISA, împreună cu o examinare preliminară, pot spune doar unui specialist despre prezența unei probleme. În laboratorul Invitro, diagnosticele de sânge sunt efectuate cu mare acuratețe, rezultatul analizei este însoțit de comentarii ale specialiștilor despre coeficientul de pozitivitate. Acest lucru ajută foarte mult medicul să facă un diagnostic mai precis.

Producători ruși de top În segmentul truselor de reactivi pentru diagnosticarea infecțiilor: - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - SRL NPO Diagnostic Systems, N.Novgorod; - CJSC „Ecolab”, Elektrogorsk MO. În domeniul truselor de diagnosticare nu boli infecțioase si conditii fiziologice: - Alkor-Bio LLC, Sankt Petersburg; - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - Hema-Medica LLC, Moscova. Pe segmentul de reactivi pentru diagnosticarea de laborator a alergiilor: - Alkor-Bio LLC, Sankt Petersburg; - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - NPO Immunoteks LLC, Stavropol. Productie de echipamente de laborator: - OOO Pikon, Moscova

Evaluarea gradului de posibilă substituire a importurilor conform nomenclatorului de teste Nomenclatorul analiților, unități Aprobat pentru utilizare în Federația Rusă Produs în Federația Rusă Gradul de înlocuire posibilă a importurilor Markeri de boli infecțioase % Markeri de boli neinfecțioase și indicatori ai stărilor fiziologice % Markeri de alergie % Total: %

Estimarea gradului de substituire a importurilor în funcție de volumul pieței pentru produse pentru tablete ELISA Segmente de piață Volumul pieței în Federația Rusă, mln. Volumul vânzărilor producătorilor autohtoni, milioane de ruble Ponderea înlocuirii importurilor Markeri de boli infecțioase % Markeri de boli netransmisibile și indicatori ai stărilor fiziologice % Markeri de alergie % Echipamente50051% Total: %

Evaluarea gradului de substituire a importurilor în ceea ce privește volumul pieței de produse pentru metode imunochimice în ansamblu Segmente de piață Volumul pieței în Federația Rusă, mln. Volumul vânzărilor producătorilor autohtoni, milioane de ruble Ponderea înlocuirii importurilor Markeri de boli infecțioase % Markeri de boli netransmisibile și indicatori ai stărilor fiziologice % Markeri de alergie % Echipamente % Total: %

Probleme ale producătorilor autohtoni din industrie: Metoda ELISA devine învechită. Există o înlocuire treptată a reactivilor IF autohtoni cu cei chemiluminiscenți importați; Sistemul de achiziții publice existent stimulează fie achiziționarea celor mai ieftine mărfuri, fie produse de import cu caracteristici unice; Unul dintre principalele motive pentru dezvoltarea insuficientă a producătorilor autohtoni de echipamente automate și localizarea producției de produse importate este bariera administrativă vamală; Principala problemă a timpurilor recente este prăbușirea sistemului înregistrare de stat produse noi în RZN. Admiterea de noi produse pe piață practic a încetat și acei producători străini care s-au înscris anterior pe liste lungi continuă să aibă un avantaj față de cei autohtoni; Principalul motiv al întârzierii tehnologice este incapacitatea de a obține dreptul de a produce produse compatibile pentru echipamente moderne; Gradul scăzut de consolidare a producătorilor autohtoni și războaiele constante ale prețurilor între ei nu fac posibilă dezvoltarea de produse avansate și concurența cu jucători de top pe picior de egalitate, inclusiv pe piețele externe.

Sugestii: În cadrul FCC, introduceți o procedură neconcurențială pentru achizițiile publice de dispozitive medicale cu publicare ulterioară detaliată. Determinarea limitelor de finanțare pe baza prețului mediu de piață va oferi anumite avantaje producătorilor autohtoni, va permite limitarea consumului de reactivi scumpi importați și va controla mai eficient dezvoltarea fondurilor bugetare; Promovarea extinderii și consolidarea producătorilor autohtoni pentru a concentra resursele pe dezvoltarea produselor moderne și a intra piata internationala. O procedură de achiziție publică neconcurențială va lăsa rapid doar întreprinderile cu adevărat competitive pe piață; Alocarea de fonduri de stat pentru a stimula, pe principiile parteneriatului public-privat, dezvoltarea unei game de teste suficiente pentru a asigura siguranța biologică a țării; Scutirile vamale ar trebui să fie pentru componente, nu pentru produse finite; Armonizarea sistemului de înregistrare cu cel european, unde dispozitive medicale Cu nivel scăzut riscurile potențiale sunt înregistrate pe baza unei declarații de conformitate.

Număr de definiții 96 (48 în duplicat)
Formatul tabletei de lucru: stripate 12x8, sparge 1 godeu.
Sensibilitate: 1,5 U/ml.
Domeniu de măsurare: 0-400 U/ml.
Volumul probei de testat nu este mai mare de 25 µl.
Standardizarea condițiilor pentru efectuarea unei reacții enzimatice cu un cromogen într-un agitator controlat termostatic la 37ºС.
Compoziția setului:
1. Placă cu dungi 12 x 8 găuri, gata de utilizare - 1 buc.
2. Probe de calibrare gata de utilizare (0-400 U/ml) colorate cu grade diferite intensitate in functie de concentratie - 6 fiole.
3. Proba de control - 1 flacon.
4. Conjugat monocomponent, gata de utilizare, care nu necesită diluare - 1 flacon.
5. Soluție de diluare a serului - 1 flacon.
6. Substrat cromogen, monocomponent - soluție de tetrametilbezidină plus (TMB+) gata de utilizare, care nu necesită diluare - 1 flacon.
7. Soluție tampon fosfat-salină cu dublu - 2 sticle.
8. Opriți reactivul, gata de utilizare - 1 flacon.
9. Film pentru lipirea tabletei - 1 buc.
10. Stencil pentru construirea unui grafic de calibrare - 1 buc.
11. Tava pentru reactiv - 2 buc.
12. Vârfuri de pipetă pentru 5-200 µl - 16 buc.
Ambalajul tabletei este un pachet de tec "zip-lock".
Stabilitatea soluției de lucru FST-T este de cel puțin 5 zile la o temperatură de +2...8°C.
Păstrați setul la +2...8°C. Data expirării - 1 an de la data producției.
Înregistrat în Roszdravnadzor.