Helmintid igg ifa parim. Venemaa toodangu ELISA instrumendid ja reaktiivide komplektid Kundelsky R.V., Ph.D.

ARVIKUID

UUE ELISA TESTISÜSTEEMI HINDAMINE

"Rotaviiruse antigeen-ELISA-PARIM"

12Žirakovskaja E.V., 3Ignatiev G.M., 3Indikova I.N., 12Tikunova N.V.

1 Rospotrebnadzori föderaalne teadusasutus SSC VB "Vector", Koltsovo asula, Novosibirski piirkond;

2 Keemiabioloogia ja Fundamentaalmeditsiini Instituut, Novosibirsk;

3 Riiklik Meditsiiniliste Bioloogiliste Preparaatide Standardimise ja Kontrolli Instituut L.A. Tarasevitšag Moskva

Esitatakse JSC "Vector-Best" (Novosibirsk) uue reaktiivide komplekti "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" tundlikkuse, spetsiifilisuse ja reprodutseeritavuse testimise tulemused. Saadud andmed võimaldavad ennustada tulemuste diagnostilist usaldusväärsust, kui seda testimissüsteemi kasutatakse rotaviiruse A-rühma antigeeni tuvastamiseks kliinilises materjalis.

Märksõnad: ELISA testisüsteem, efektiivsus, rotaviirus A

A-rühma rotaviirused (sugukond Reoviridae, perekond Rotavirus) on kogu maailmas kõige levinum raskekujulise gastroenteriidi põhjustaja väikelastel. Ka immuunpuudulikkusega täiskasvanud haigestuvad sageli. Rotaviiruse infektsioon (RVI) on väga nakkav haigus mitmel viisil levitamine. Nakkuse allikaks on inimene, kellel on haiguse manifest või asümptomaatiline vorm, samuti viirusekandja. Laste ja täiskasvanute hulgas võib RVI avalduda juhuslike juhtumite, kohalike rühmahaiguste, puhangutena ja on laialt levinud. Selle nakkuse fekaal-oraalne edasikandumise mehhanism realiseerub toiduga (piim ja piimatooted, laste toit), vesi ja kontakt-leibkonna teed.

Rotaviiruse gastroenteriidi diagnoosimine vastavalt kliinilisele pildile, eriti sporaadilise haigestumuse korral, tekitab teatud raskusi, kuna sellele infektsioonile iseloomulikud sümptomid erinevad vähe teiste erineva etioloogiaga ägedate sooleinfektsioonide (AII) sümptomitest. Diferentsiaaldiagnoos rotaviiruse gastroenteriidiga patsientidel viiakse see läbi nii toidutoksiliste infektsioonide kui ka teiste viiruslike (noroviirused, astroviirused, adenoviirused, koronaviirused, Coxsackie enteroviirused ja ECHO) ja bakteriaalse (salmonelloos, düsenteeria, koolera, jersinioos, oportunistlikud mikroorganismid) etioloogiaga. Kahjuks pole kõik spetsialiseerunud raviasutused RF diagnoosib rotaviirusnakkust.

Diagnostilised meetodid RVI puhul on need suunatud tervete virionide, viiruse antigeeni või viirusspetsiifilise RNA tuvastamisele väljaheites. Paljutõotav lähenemisviis viiruste otseseks tuvastamiseks nii kliinilises materjalis kui ka objektides keskkond, on pöördtranskriptsiooni meetod – polümeraasi abil ahelreaktsioon(RT-PCR). AT viimased aastad testsüsteemid on loodud kaasaegsete põhjal teaduse arenguid kombinatsiooniga erinevaid meetodeid rotaviiruste tuvastamine: multipleksne PCR koos amplifikatsiooniproduktide hübridisatsiooni-fluorestsentstuvastusega "lõpp-punkti järgi"; lõpp-punkti immuno-PCR (IPCR) reaalajas tuvastamisega; kvantitatiivne RT-PCR reaalajas tuvastamisega. Uurimislaborites kasutatakse rotaviiruste kiireks tuvastamiseks elektronmikroskoopiat. Kuid kõik ülaltoodud meetodid on üsna töömahukad ja nõuavad kalleid instrumente ja kõrgelt kvalifitseeritud töötajaid. Seetõttu läbiviimisel laboratoorne diagnostika haiglates ja ambulatoorsetes asutustes eelistatakse meetodeid, mis põhinevad viiruse antigeeni tuvastamisel väljaheites, kasutades rotaviiruste mono- ja polüpoonsete antikehade ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (ELISA). See meetod on saadaval praktilistes laborites, seda on lihtne seadistada ja see võimaldab teil kiiresti tulemuse saada.

Selle töö eesmärk on uurida Novosibirski JSC "Vector-Best" uue reaktiivide komplekti "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" diagnostilist efektiivsust.

^september-detsember

materjalid ja meetodid

Uuringu materjaliks olid laste väljaheidete proovid varajane iga AII diagnoosiga ja ilma kliinilised ilmingud sooleinfektsioon kes hospitaliseeriti sooleinfektsioonide osakondades ja hingamisteede infektsioonid MUZ "Laste linn kliiniline haigla Nr 3 "Novosibirsk. Väljaheiteproovid koguti ühekordselt kasutatavatesse steriilsetesse plastmahutitesse mahuga 2-3 ml pärast patsientide haiglaosakonda vastuvõtmist ja säilitati -20 °C juures 15 päeva. Materjali pikem säilitamine viidi läbi temperatuuril -70 °C.

Töös kasutati 104 väljaheiteproovist koosnevat paneeli, mida oli eelnevalt testitud AII patogeenide esinemise suhtes. Nendest:

30 proovi, milles ELISA ja RT-PCR abil tuvastati ainult A-rühma rotaviirused; RT-PCR-ga genotüpiseerimine näitas, et väljaheiteproovid sisaldasid rotaviirusi genotüübiga PG1 (18 proovi), PG2 (4 proovi), PG3 (3 proovi), PG4 (2 proovi), PG4 (1 proov), PG9 (1 proov), PG3 (1 proov);

14 proovi, milles RT-PCR abil tuvastati ainult teise genotüübi noroviirused, mis kinnitati noroviiruste genoomis paikneva kapsiidigeeni 5" piirkonna nukleotiidjärjestuse määramisega piirkonnas 5085-5485 h .;

15 proovi, milles RT-PCR abil tuvastati ainult astroviirused, mida kinnitas astroviiruse genoomis piirkonnas 4526-4955 bp paikneva kapsiidigeeni 5" piirkonna nukleotiidjärjestuse määramine; 15 proovi, milles PCR meetod tuvastati ainult adenoviirused;

30 fekaaliproovi (kontroll) lastelt, kellel ei esine sooleinfektsiooni kliinilisi ilminguid, hospitaliseeritud haigla hingamisteede osakonda; esialgne analüüs ei näidanud nendes proovides ülalnimetatud viiruspatogeene.

Proove testiti rota-, noro-, astro- ja adenoviiruste olemasolu või puudumise suhtes RT-PCR abil, kasutades Vene Föderatsioonis registreeritud kaubanduslikke komplekte "AmpliSense No virus 1, 2 genotypes - 306/322", "AmpliSense Astrovirus -165 ", "AmpliSense Adenovirus - 462", "AmpliSense Rotavirus - 290" (tootja Kesk-Epidemioloogia Uurimisinstituut, RF). Proovide uuring viidi läbi vastavalt vastavate reaktiivide komplektide kasutusjuhistele kõlblikkusaja jooksul. Rotaviiruse suhtes positiivsed proovid genotüüpiti RT-PCR abil. Rotaviiruse antigeeni olemasolu või puudumise määramine viidi läbi ka ELISA abil, kasutades kaubanduslikku testisüsteemi IDEIA™ Rotavirus, (DakoCytomation, UK) vastavalt komplekti juhistele.

Reaktiivide komplekti "Rota-virus-antigen-ELISA-BEST" testimisel krüpteeriti kõik ülaltoodud proovid (104) ja neid testiti kolm korda testkomplektiga. Pärast testide lõpetamist proovid dekodeeriti ja tulemusi analüüsiti.

Tulemused ja arutlus

Reaktiivide komplekti "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" tundlikkust hinnati vastete arvu järgi positiivseid tulemusi(%) proovide testimine testitud testimissüsteemi ja komparaatorite abil. Samal ajal leiti, et reaktiivide komplekti "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" kasutamisel olid kõik 30 rotaviiruse A olemasolu kinnitatud proovi positiivsed (tabel 1). Seetõttu oli rotaviiruse A tuvastamiseks mõeldud reaktiivide testkomplekti tundlikkus 100%. Tuleb märkida, et paneelis olid seitsme erineva rotaviiruse genotüübiga proovid ja need kõik tuvastati edukalt Rota viiruse - antigeeni - JA FAB EST reaktiivikomplektiga.

Katsesüsteemi spetsiifilisust hinnati testitavate proovide negatiivsete tulemuste kokkulangevuste arvu järgi (%), kasutades testitud testsüsteemi koos eeluuringute andmetega. Spetsiifilisuse hindamiseks hõlmas kasutatud paneel 30 proovi, milles viiruspatogeene ei tuvastatud, ning 14 proovi, milles tuvastati RT-PCR meetodil ainult teise genotüübi noroviirused, 15 proovis kasutati RT-PCR meetodit. tuvastas ainult astroviirused; 15 proovi, milles PCR abil tuvastati ainult adenoviirused. Tehti kindlaks, et 74-st negatiivsest proovist 69-s ei ületanud rotaviirus-antigeen-ELISA-BEST reaktiivikomplektiga rotaviiruse A olemasolu tuvastatud optiliste tiheduste väärtused taustväärtusi, st väärtusi. mis saadakse negatiivsete kontrollproovide optilise tiheduse mõõtmise tulemusena. Kaks astroviirust sisaldavat proovi, üks proov - teise genotüübi noroviirus, üks proov - adenoviirus ja kaks proovi, milles ühtegi ülaltoodud viiruspatogeeni ei tuvastatud, näitasid positiivseid optilise tiheduse väärtusi. Tuleb märkida, et proovides, milles ühtegi viiruspatogeeni varem ei tuvastatud, registreeriti positiivseid signaale ainult ühes kordusuuringus (tabel 2). Seega oli reaktiivide komplekti "Ro-tavirus-antigen-ELISA-BEST" spetsiifilisus 93,2%.

Testide käigus hinnati kliinilisel materjalil reaktiivide testikomplekti "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" kasutades saadud tulemuste reprodutseeritavust – kõiki proove uuriti kolm korda erinevates katsetes, et määrata tulemuste varieeruvus. Peaaegu kõigil juhtudel saadi sarnased tulemused: testimissüsteem tuvastas kõik negatiivsed ja positiivsed proovid ühtemoodi. Erandiks olid kaks proovi, milles ühtegi viiruspatogeeni ei olnud varem tuvastatud: mõlema proovi ühes korduses ületasid optilise tiheduse väärtused ODcrit. Tuleb märkida, et ülejääk oli ebaoluline (tabel 2). Seega oli tulemuste korratavus 98,8%.

Läbiviidud testide tulemused näitasid, et testitud reaktiivide komplekt "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" on oma diagnostilise efektiivsuse – spetsiifilisuse, tundlikkuse ja reprodutseeritavuse – poolest võrreldav Vene Föderatsioonis saadaoleva diagnostikaga.

kasutades testikomplekti "Ro-tavirus-antigen-ELISA-BEST" A-rühma rotaviiruse antigeeni tuvastamiseks kliinilises materjalis.

Kirjandus

1. Bogomolov B.P. // "Nakkushaigused: erakorraline diagnoosimine, ravi, ennetamine". - M., uus diamed. - 2007.

2. Vasiliev B.Ya., Vasil'eva R.I., Lobzin Yu.V.// "Äge soolehaigused. Rotaviirused ja rotaviirusnakkus. - S.-Pb., Lan. - 2000.

3. Žirakovskaja E.V., Tikunov A.Yu., Bodnev O.A. et al.// "BIOpreparaadid". - 2008 - nr 2. - lk. 15-18.

4. Žirakovskaja E.V., Malejev V.V., Bodnev A.S. ja teised // JMEI - 2008 - nr 4. - Koos. 12-16.

5. Ignatyuk T.E., Golutvin I.A., Nasikan N.S. jt // Viroloogia probleemid. - 2003. - v. 48. - nr 6. - lk. 1721.

6. Novikova N.A., Fedorova O.F., Epifanova N.V., Chup-rova A.B. // "Virusoloogia küsimusi". - 2007. - v.52. -№ 3 - koos. 19-23.

7. A. T. Podkolzin, A. A. Mukhina, G. A. Shipulin jt//

"Nakkushaigused". - 2004. - v. 2. - nr 4. - lk. 85-91.

8. Podkolzin A.T., Fenske E.B., Abramycheva N.Yu. et al.// Terapeutiline arhiiv. - 2007. - v. 79. - nr 11. -lk. 10-16.

9. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V. jt // “Epidemioloogia ja nakkushaigused". -2004.-nr 6.-lk. 17-20.

10. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V. jt // Hügieen ja kanalisatsioon. - 2007. - nr 1. - lk. 56-58.

11. Arcangeletti M.C., De Conto E, Pinardi F., et al. // Acta Biomed. Ateneo. Parmense. - 2005.-V. 76 lõige 3. - Lk 165-170.

12. Gladstone B.P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., et al. // Epidemiol. Nakata. - 2008. V. 136 (3). - Lk 399-405.

13. Min B.S., NohYJ., Shin J.H., etal. //J. Virol. meetodid. -2006. - V. 137 lõige 2. - lk 280 - 286.

14. Santos N., Honma S., Timetsky Mdo C., jt. //J. Clin. mikrobiol. - 2008. V. 46 (2). - lk 462 - 469.

15 Schets F.M., van Wijnen J.H., Schijven J.F., et al. //Rakendus. Keskkond. mikrobiol. - 2008. - V. 74 (7). - Lk 2069 - 2078.

16. Stockman L.J., Staat M.A., Holloway M., et al. // J. Clin. mikrobiol. - 2008. - V. 46 (5). - Lk 1842 - 1843.

Reaktiivide komplekti "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" tundlikkuse ja spetsiifilisuse hindamine

Tabel 1

Nr Nr Proovide arv Tuvastamistulemused võrdlusravimitega IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR Tuvastamistulemused komplektiga Rotavirus-antigen-ELISA-BEST

1. 30 30 0 0 0 30

2. 15 0 15 0 0 2

3. 14 0 0 14 0 1

4. 15 0 0 0 15 1

Reaktiivide komplekti "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST>" spetsiifilisuse hindamine -

tabel 2

PCR AmpliSense

rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus

0,443 1,306 0,676 0,418

Rotaviiruse antigeen-IFA-BEST CJSC "Vector-Best"

OPCrit OPCrit OPCrit

0,250 0,263 0,251

> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939

> 4,000 > 4,000 > 4,000

£ september

detsember 2009

AmpliSense

rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus

IDEA Rotaviiruse DakoCytomation RPC = 0,150

0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040

Rotaviirus -

OPcrit 0,250

> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972

> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800

> 4,000 3,981

> 4,000 3,713

> 4,000 4.000

> 4,000 3,989

> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062

antigeen-ELISA-PARIM "Vector-Best"

OPcrit OPcrit 0,263 0,251

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,821 3,899

> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871

> 4,000 3,929

> 4,000 3,881 3,884 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,995

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,837 3,839

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,986

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,998

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052

astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus noroviirus noroviirus noroviirus noroviirus noroviirus noroviirus noroviirus noroviirus noroviirus noroviirus noroviirus noroviirus noroviirus noroviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus

IDEA Rotaviiruse DakoCytomation OIIKpHT = 0,150

0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039

PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO "BeKTop-EecT"

OnKpHT OnKpHT OIIKpHT

0,250 0,263 0,251

0,115 0,075 0,082

0,053 0,046 0,058

0,233 0,198 0,189

0,144 0,105 0,128

0,243 0,062 0,073

0,043 0,040 0,046

0,069 0,043 0,041

0,143 0,044 0,058

0,220 0,206 0,230

3,475 2,577 2,405

0,223 0,247 0,240

0,232 0,236 0,231

0,048 0,042 0,041

0,121 0,085 0,093

0,132 0,111 0,174

0,122 0,052 0,063

0,061 0,044 0,054

0,073 0,035 0,048

0,089 0,046 0,046

0,047 0,043 0,044

0,041 0,039 0,044

0,083 0,046 0,038

0,168 0,074 0,097

0,247 0,118 0,099

0,248 0,251 0,242

0,243 0,259 0,250

0,054 0,048 0,055

0,048 0,040 0,037

0,058 0,045 0,046

0,053 0,045 0,049

0,069 0,058 0,065

0,912 0,344 0,379

0,089 0,037 0,042

detsember 2009

PCR AmpliSense

adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne negatiivne

IDEA Rotaviiruse DakoCytomation RPC = 0,150

0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036

Rotaviirus - antigeen - ELISA-BEST CJSC "Vector-Best"

OPCrit O P Crit OPCrit

0,250 0,263 0,251

0,105 0,042 0,043

0,046 0,143 0,133

0,227 0,045 0,042

0,065 0,068 0,054

0,125 0,039 0,042

0,196 0,191 0,182

0,209 0,170 0,154

0,316 0,071 0,073

0,058 0,043 0,049

0,171 0,056 0,061

0,049 0,060 0,064

0,047 0,062 0,065

0,058 0,047 0,066

0,073 0,072 0,066

0,188 0,120 0,109

0,180 0,074 0,072

0,057 0,063 0,058

0,047 0,060 0,047

0,162 0,146 0,143

0,248 0,248 0,260

0,063 0,066 0,104

0,247 0,223 0,251

0,054 0,053 0,070

0,242 0,240 0,248

0,073 0,061 0,103

0,066 0,065 0,064

0,108 0,123 0,192

0,072 0,067 0,071

0,079 0,079 0,087

0,104 0,079 0,164

0,169 0,150 0,162

0,140 0,166 0,146

0,114 0,133 0,131

Helmintiaaside ravi lastel on äärmiselt oluline, kuna selle tagajärjed võivad olla füüsiliste ja vaimsete, patoloogiliste protsesside arengu mahajäämus. siseorganid ja süsteemid, isegi surm. Lisaks on helmintiinfestatsioonid väga nakkavad, mistõttu levivad nad koolieelsetes ja kooliasutustes nii kergesti. Sellest on selge, kui oluline õigeaegne ravi helmintiaas lastel.

Esimesed helmintide tunnused lastel

Ussid on oportunistlikud patogeenid Inimkeha, ussid, mille lõplikuks peremeheks on inimene. Veelgi enam, sisse see küsimus Omaniku vanus ei loe. erinevad tüübid helmintiaasi võib täheldada nii lastel kui ka täiskasvanud patsientidel.

Kui ohtlik on helmintiaas lapsele?

Nagu varem mainitud, võivad helmintid lastel põhjustada tõsine haigus ja patoloogiad, mille tagajärjel vaimne ja füüsiline areng aeglustub. Võimalikud tüsistused iga helmintiaasi tüüp võib olla täiesti erinev, näiteks:

Seetõttu nõuavad laste helmintiaasid veelgi suuremat tähelepanu, õigeaegset arstiabi, pikaajalist jälgimist spetsialisti juures ja ennetamist.

Peamised sümptomid lastel

Lapse helmintiaasi sümptomid võivad olenevalt usside tüübist olla erinevad:

1. Ascaris avaldub kohe allergilise reaktsiooni, palaviku ja iiveldusena lapsel. Esimesed ilmumised on tavaliselt eredad, kuid vaibuvad kiiresti. Seejärel võivad ilmneda järgmised sümptomid:

koolikud ja düsbakterioos ning vastsündinud;
alla 1-aastastel imikutel valu nabas, probleemid väljaheitega, allergiad ja diatees;
vanematel lastel on unehäired, rahutu käitumine, õudusunenäod;
3-7-aastastele lastele on iseloomulik iiveldus, palavik, köha ja kõhuvalu, lööve.

2. Enterobioos, mille põhjustajaks on pinworms, avaldub kustutatuna kliiniline pilt. Ja alles 1 kuu pärast võite märgata järgmisi sümptomeid:

vastsündinutel päraku põletik, turse ja punetus, söömisest keeldumine, öine nutmine, isutus;
alla üheaastastel lastel on samad sümptomid, samuti tugev pärakusügelus öösel (kell 23.00–01.00), tüdrukud kannatavad suguelundite põletiku all;
vanematel lastel valu kõhus naba lähedal, unehäired, sügelemine tuhara piirkonnas.

3. Toksokaroosi sümptomeid on raske ära tunda, välja arvatud väike temperatuur keha ja allergilised reaktsioonid(lööve, nõgestõbi, sügelus ja turse). Pärast nakatumist võib tekkida köha, mis hiljem põhjustab kopsupõletikku või bronhiiti, eriti kõige väiksematel patsientidel.

Trihhinoos viitab vastsündinutel kergetele nähtudele, vastasel juhul täheldatakse järgmisi sümptomeid:

palavikuline seisund;
näo turse;
lihasvalu;
allergilised reaktsioonid;
5-aastastel ja vanematel lastel võivad olla suurenenud mandlid, põrn, lööve ja kurguvalu.

Helmintiaasi sümptomeid on kõige raskem diagnoosida 2-aastastel ja noorematel lastel, kuna laps ei oska oma käitumist ja seisundit selgitada. Seetõttu on lapse ebatüüpiliste ilmingute ja käitumise korral parem arstile näidata.

Mida tuleb kõigepealt teha?

Ussid, mis on leitud väljaheited laps on haiguse kõige olulisem tunnus, pärast mida peaksite kohe abi otsima arstilt. Ükski helmintiravi ei saa olla edukas ilma õige diagnoosita. Sel juhul peaksid uuringumeetodid olema kõikehõlmavad, sealhulgas järgmised protseduurid:

kraapimine pärakust;
lapse väljaheidete uurimine;
vereanalüüs;
lihasbiopsia harvadel juhtudel trihhinoosi kahtlusega;
seroloogiline vereanalüüs;
röntgen, ultraheli, tomograafia;
ELISA antikehade tuvastamiseks veres.

Ravi meetodid

Helmintiaasi ravi lastel peaks olema kõikehõlmav, läbimõeldud, planeeritud täpsed annused ja ravimi manustamise sagedus. See on tingitud asjaolust, et anthelmintilise toime saavutamiseks kasutatakse mürgiste komponentidega ravimeid, mis tähendab, et irratsionaalne kasutamine võib põhjustada kõrvalmõjud. Lisaks on kodus asjakohane rahvapärane ravi ravimtaimed.

Rahvapärased abinõud

Kaasaegne ravi selliste laste haiguste rahvapäraste ravimitega hõlmab nelja tõhusat viisi:

Iga koduse ravi meetodit tuleb eelnevalt arstiga arutada. Tuleb meeles pidada, et ravimtaimede ja rahvapärased abinõud vastunäidustused on esitatud individuaalse sallimatuse vormis.

Ravi

Enterobiaasi ja askariaasiga kasutatakse tavaliselt selliseid ravimeid nagu Pirantel ja Mebendasool. Piranteli võtmine on asjakohane doosis 10 mg ainet ühe kilogrammi kehakaalu kohta usside puhul ja 5 mg / kg ümarusside puhul. Mebendasooli võetakse kaks korda päevas 50 mg 2-3-aastastele lastele kolm päeva järjest, kaks korda 100 mg kolm päeva järjest üle 3-aastastele lastele, 3 nädala pärast korratakse ravi.
Toksokariaasi korral määratakse mebendasool erinevas annuses - 2-aastastele ja vanematele lastele 100 mg kaks korda päevas 14-10 päeva jooksul.
Trihhinoosi ravis võetakse mebendasooli 5 mg kehakaalu kilogrammi kohta, pärast mida jagatakse annus kolmeks annuseks päevas. Ravikuur on 1 nädal arsti range järelevalve all.

Helmintiaaside ennetamine

käte pesemine kohe pärast kokkupuudet loomadega, pärast tänavat ja liivakaste, tualetis käimist ja enne söömist;
süüa ainult puhast toitu;
korralikult läbi viidud liha- ja kalatoodete kuumtöötlus;
keedetud vee joomine;
isikliku hügieeni ja sanitaartingimuste järgimine;
lemmikloomade regulaarne ussitõrje;
ennetav ussitõrje 2-aastastel ja vanematel lastel.

Toksokara vereanalüüs

Inimese toksokariaasi nakatumise tunnused

Nakkuse kandjad on koerad, harva kassid. Toksokara munad erituvad väljaheitega hulkuvad koerad. Olles maas, vees või looma karusnaha peal viibides, viiakse nad tervesse organismi mitmel viisil.

Reaktsioon sissetungijale

Alates meditsiinistatistika on teada, et täiskasvanud haigestuvad toksokariaasi harvemini, välja arvatud juhul, kui nende elukutse on ohus. Lapsed saavad infektsiooni palju tõenäolisemalt.

Toksokariaasi kõige levinumad sümptomid on:

Palavik ilma haiguse tunnusteta.
Temperatuuri tõus.
Kasvav ja hääbuv valu peas või kõhus.
Nahalööbe ilmnemine, mida ei saa kõrvaldada.
Näo turse.
Üldanalüüsis ilmnes eosinofiilide taseme tõus veres.

Täpse diagnoosi tegemiseks on ette nähtud toksokara immunoloogiline analüüs. Helminti (antigeenide) geneetilist teavet kandvate valguühendite olemasolu veres kutsub esile immuunsuse igg-klassi antikehade tootmiseks. See on toksokariaasi nakatumise esimene märk.

Esialgne diagnostika

Patsiendi ajaloo esialgne etapp on kollektiivne. Enne patsiendi saatmist toksokaroosi vereanalüüsi tegema, on vaja uurida haiguse ajalugu ja teha eeluuring.

Esmane diagnoos:

Nakatumist esile kutsuda võivate raskendavate asjaolude uurimine – spetsiifiline töö loomadega või nende olemasolu lemmikloom, pinnasetööd potentsiaalselt ohtlikes piirkondades, lapsed mängivad koerte jalutusaladel.
Patsiendi füüsiline läbivaatus. Küsitlus nahka subkutaanseks invasiooniks toksokaritega, silmalaugude ja silmamunad, palpatsioon.
Üksikasjaliku vereanalüüsi määramine. Toksokaroosiga nakatumise ajal on iseloomulik mõnede näitajate märkimisväärne tõus - eosinofiilid (70–80%), lümfotsüüdid, ESR. Samal ajal kui hemoglobiini tase langeb märgatavalt.
Maksaproovide võtmine. Tõsise invasiooni korral mõjutab maksa koormus, mis väljendub bilirubiini tugevas hüppes.

Tavapäraste testide (veri, koprogramm, määrdumine) abil on võimatu saada otsest kinnitust toksokara sissetungi kohta. Ka kaksteistsõrmiksoole uuring on väheinformatiivne, kuna see on raske vastsete rändeloomuse jaoks.

Pärast eeluuringu tulemuste saamist, näidates võimalik infektsioon toksokaare ja väidetava diagnoosi eristamist sarnaste sümptomitega haigustest, määratakse patsiendile toksokariaasi ELISA uuring.

Seotud immunosorbentanalüüs

Selle uuringu peamine eesmärk on kinnitada toksokarite esinemist inimkehas. Nende helmintide vastaseid antikehi leidub vereplasmas, seega võetakse see veenist.

Toxocara analüüs nõuab teatud ettevalmistust:

Päev enne protseduuri ei tohi süüa rasvaseid ja raskeid toite.
Ärge jooge päeva jooksul enne laborisse minekut magusaid, gaseeritud ja alkohoolseid jooke.
Tehke paastutestid.
Ära kasuta ravimid eelmisel päeval ja päeval, mil analüüs on planeeritud.

Tuleb märkida, et seda väga informatiivset invasiooni tuvastamise meetodit võivad teatud asjaolud mõjutada. Valepositiivne tulemus võib ilmneda, kui patsiendil on:

Onkoloogilised haigused.
Kopsude tuberkuloos.
Rasked maksapatoloogiad.
autoimmuunne sündroom.
Antifosfolipiidide sündroom.
Rasedus.

Sel juhul ei ole võimalik saada 100% kinnitavat analüüsi, kuna loetletud asjaoludel toodab kaitsesüsteem ka immunoglobuliine (antikehi). Vajalik on läbi viia täiendav diagnostika ja eristada toksokarioosi loetletud teguritest.

IgG klassi immunoglobuliinide kontsentratsioon (tiiter) saavutab maksimaalse võimaliku väärtuse 2-3 kuu pärast invasiooni algusest. Mida raskem on infektsioon, seda suurem on see määr.

ELISA tulemused

Diagnoosi tegemiseks uuritakse hoolikalt ensüümi immuunanalüüsi, saadud tulemusi võrreldakse võrdlusväärtustega. Normiks on antikehade tiiter 1:100, mille positiivsuse indeks on alla 0,9.

Ainepunktide arvväärtused

Saadud tulemused võivad olla negatiivsed, positiivsed, nõrgalt positiivsed või küsitavad. Antikehade tiitrite arv sõltub invasiooni tõsidusest ja selle esinemise kestusest.

Analüüsi ärakiri:

AT tiiter kuni 1:100 - tulemus on negatiivne. Toksokara vastseid patsiendi kehast ei leitud.
AT tiiter kuni 1:400 - tulemus on nõrgalt positiivne. Patsiendil on nõrk invasioon või tekib toksokariaasi okulaarne vorm. Mõnel juhul näitab indikaator hiljutist nakatumist.
AT tiiter kuni 1:600 - tulemus on positiivne. Inimene kannatab kliiniline vorm helmintiaas, mille avastamine nõuab kohest ravi.
AT tiiter kuni 1:800 - tulemus on positiivne. See räägib progresseeruva iseloomuga tõsisest invasioonist ja siseorganite patoloogilise protsessi arengu suurest tõenäosusest.

Harvade eranditega näitab ELISA uuring tähelepanuta jäetud invasiooni vormi koos muu päritoluga helmintiaaside seguga. Sel juhul võib antikehade koguarv olla suurem kui 1:800.

Positiivsuse koefitsient

Kell ensüümi immuunanalüüs toksokariaasi korral tiitriga 1:400–1:600, et eristada invasiooni kõrvaltegurid, võrreldakse saadud näitajaid kontrollväärtusega. Nende arvude erinevust nimetatakse tavaliselt indeksiks või positiivsuse koefitsiendiks.

Tavaliselt on läbiviidud ELISA vormis üks indikaator teise vastas. Esimene on norm, teine võib tähendada:

Kuni 0,9 - tulemus on negatiivne. Toxocara vastseid ei leitud.
0,9-1,1 - tulemus on kaheldav. Sel juhul määratakse kordusdiagnoos.
1,1-2,2 - tulemus on kergelt positiivne. Inimene on nõrga invasiooniga kandja.
2,2-4,2 - tulemus on positiivne. Toksokariaas mõõdukas on arenenud juba pikka aega.
Üle 4,4 - tulemus näitab helmintia invasiooni haripunkti või hiljutist helmintiaasi.

CP tulemusega 4,4 ja tuvastatud eosinofiilia suurenemine 10% võib viidata arengule silmade kuju toksokariaas ja ristinvasiooni vastaste antikehade olemasolu, kokku toksokariaasi vastu.

Immuunvastus ja antikehade optiline tihedus (positiivsuse koefitsient) sõltuvad Toxocara nakatumise astmest ja nende lokaliseerimise kohast. Madalaim tiiter ja CP indikaator lubab ainult eeldada helmintide puudumist, kuid mitte seda väita.

Esitatud teave ei saa olla enesediagnostika või eneseravi allikaks. ELISA tulemused koos eeluuringuga võivad spetsialistile öelda ainult probleemi olemasolust. Invitro laboris tehakse verediagnostika suure täpsusega, analüüsi tulemusele on lisatud spetsialistide kommentaarid positiivsuskoefitsiendi kohta. See aitab arstil palju täpsemat diagnoosi panna.

Juhtivad Venemaa tootjad Infektsioonide diagnoosimiseks mõeldud reaktiivikomplektide segmendis: - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - LLC NPO Diagnostic Systems, N.Novgorod; - CJSC "Ecolab", Elektrogorsk MO. Diagnostikakomplektide valdkonnas mitte nakkushaigused ja füsioloogilised tingimused: - Alkor-Bio LLC, Peterburi; - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - Hema-Medica LLC, Moskva. Allergiate laboratoorseks diagnostikaks mõeldud reaktiivide segmendis: - Alkor-Bio LLC, Peterburi; - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - MTÜ Immunoteks LLC, Stavropol. Laboriseadmete tootmine: - OOO Pikon, Moskva

Hinnang impordi võimaliku asendamise astmele vastavalt testide nomenklatuurile Analüütide nomenklatuur, ühikud Heakskiidetud kasutamiseks Vene Föderatsioonis Toodetud Vene Föderatsioonis Võimalik impordiasendusaste Nakkushaiguste markerid % Mittenakkushaiguste markerid ja füsioloogiliste seisundite näitajad % Allergiamarkerid % Kokku: %

Impordi asendamise määra hinnang tahvelarvuti ELISA toodete turu mahu järgi Turusegmendid Turumaht Vene Föderatsioonis, mln. Kodumaiste tootjate müügimaht, miljon rubla Impordiasenduse osakaal Nakkushaiguste markerid % Mittenakkushaiguste markerid ja füsioloogiliste seisundite näitajad % Allergiamarkerid % Varustus50051% Kokku: %

Impordi asendamise astme hindamine immunokeemiliste meetodite toodete turu mahu osas tervikuna Turusegmendid Turumaht Vene Föderatsioonis, mln. Kodumaiste tootjate müügimaht, miljon rubla Impordiasenduse osakaal Nakkushaiguste markerid % Mittenakkushaiguste markerid ja füsioloogiliste seisundite näitajad % Allergiamarkerid % Varustus % Kokku: %

Kodumaiste tootjate probleemid tööstuses: ELISA meetod on aegumas. Kodumaised IF-reaktiivid asendatakse järk-järgult imporditud kemoluminestsentsreaktiividega; Olemasolev riigihangete süsteem soodustab kas odavaima kauba või ainulaadsete omadustega importtoodete ostmist; Kodumaiste automaatsete seadmete tootjate ebapiisava arengu ja importtoodete tootmise lokaliseerimise üheks peamiseks põhjuseks on tolliadministratiivne barjäär; Viimase aja põhiprobleem on süsteemi kokkuvarisemine riiklik registreerimine uued tooted RZN-is. Uute toodete turule tulek on praktiliselt peatunud ja kodumaiste ees on jätkuvalt eelis neil välismaistel tootjatel, kes on varem end pikkade nimekirjadega registreerinud; Tehnoloogilise mahajäämuse peamiseks põhjuseks on suutmatus saada õigust toota kaasaegsetele seadmetele ühilduvaid tooteid; Kodumaiste tootjate madal konsolideerumisaste ja pidevad omavahelised hinnasõjad muudavad võimatuks arenenud toodete väljatöötamise ja juhtivate tegijatega võrdsetel alustel konkureerimise, sealhulgas välisturgudel.

Ettepanekud: kehtestada FCC raames meditsiiniseadmete riigihangete konkurentsivaba menetlus koos hilisema üksikasjaliku avaldamisega. Finantseerimislimiitide määramine keskmise turuhinna alusel annab teatud eelised kodumaistele tootjatele, võimaldab piirata kallite importreaktiivide tarbimist ja tõhusamalt kontrollida eelarvevahendite arengut; Edendada kodumaiste tootjate laienemist ja konsolideerumist, et koondada ressursid kaasaegsete toodete arendamisele ja siseneda rahvusvahelisel turul. Konkurentsivaba riigihankemenetlus jätab kiiresti turule vaid tõeliselt konkurentsivõimelised ettevõtted; eraldada riiklikke vahendeid, et stimuleerida avaliku ja erasektori partnerluse põhimõtete alusel mitmete testide väljatöötamist, mis on piisavad riigi bioloogilise ohutuse tagamiseks; Tollivabastus peaks kehtima komponentidele, mitte valmistoodetele; Ühtlustada registreerimissüsteem Euroopa omaga, kus meditsiiniseadmed Koos madal tase võimalikud riskid registreeritakse vastavusdeklaratsiooni alusel.

Määratluste arv 96 (48 duplikaadis)
Töötava tableti formaat: eemaldatud 12x8, purustades 1 süvend.
Tundlikkus: 1,5 U/ml.
Mõõtevahemik: 0-400 U/ml.
Uuritava proovi maht ei ületa 25 µl.
Tingimuste standardimine ensümaatilise reaktsiooni läbiviimiseks kromogeeniga termostaadiga reguleeritavas loksutis temperatuuril 37 ° C.
Määra kompositsioon:
1. Triibuline plaat 12 x 8 auku, kasutusvalmis - 1 tk.
2. Kasutusvalmis kalibreerimisproovid (0-400 U/ml), mis on värvitud erineval määral intensiivsus sõltuvalt kontsentratsioonist - 6 viaali.
3. Kontrollproov – 1 viaal.
4. Ühekomponentne konjugaat, kasutusvalmis, lahjendamist ei vaja – 1 viaal.
5. Seerumi lahjenduslahus – 1 viaal.
6. Substraat kromogeenne, ühekomponentne - tetrametüülbesidiini pluss (TMB+) kasutusvalmis lahus, mis ei vaja lahjendamist - 1 viaal.
7. Kahekordse fosfaat-soolalahuse puhverlahus – 2 pudelit.
8. Stop-reaktiiv, kasutusvalmis – 1 viaal.
9. Kile tableti liimimiseks - 1 tk.
10. Šabloon kalibreerimisgraafiku koostamiseks - 1 tk.
11. Reaktiivi salv - 2 tk.
12. Pipetiotsad 5-200 µl jaoks - 16 tk.
Tahvelarvuti pakend on tiikpuust "zip-lock" pakend.
FST-T töölahuse stabiilsus on vähemalt 5 päeva temperatuuril +2...8°C.
Hoida komplekti +2...8°C juures. Kõlblikkusaeg - 1 aasta alates valmistamise kuupäevast.
Registreeritud Roszdravnadzoris.