Ensüüm-immunoanalüüs või ELISA analüüs: mis see on ja milliseid haigusi see määrab? Luis ifa mis on Anti luis mis.

ELISA või ensüümi immuunanalüüs viitab seroloogilised uuringud ja on mõeldud patoloogiliste mikroorganismide tuvastamiseks ja diagnoosimiseks vereseerumis.

Analüüsi kaudu erinevaid immunoglobuliinide klassid bakteritele: IgM- ägeda patoloogilise protsessi korral ja IgG taastumise staadiumis, mis mõnel juhul püsib kogu elu.

Ensüümi immuunanalüüsi abil tuvastatakse erineva etioloogiaga haigused:

Samuti on ELISA näidustatud süüfilise diagnoosimiseks, kui positiivseid tulemusi kinnitab RV meetod, ja see võimaldab teil jälgida ravi efektiivsust patoloogilises protsessis.

Ensüüm-immunoanalüüs on ette nähtud vastavalt näidustustele (mikroorganismidega nakatumise kahtluse korral), see on kohustuslik raseduse ajal ja enne kirurgilisi operatsioone erinevate bakterite kandumise tuvastamiseks.


Analüüsiprotseduur viiakse läbi hommikul tühja kõhuga, materjal (veri) võetakse veenist. Diagnostilise uuringu tulemused koostatakse kuni 10 päeva.

Positiivne ELISA

Positiivset ELISA tulemust kinnitab IgG ja IgM immunoglobuliinide olemasolu. Tuvastatud tiitrid veres IgM näitab alati haigust progresseeruvas staadiumis tervel inimesel need antikehad puuduvad.

Ja IgG viitab varasemale infektsioonile või patogeensete mikroorganismide kandmisele, millest mõnda peetakse väikeses koguses normaalseks. Näiteks streptokokkide ja stafülokokkide baktereid leidub iga inimese kehas.

süüfilis

Süüfilise IgM antikehad tuvastatakse 2 nädalat pärast nakatumist ja näitavad primaarse, sekundaarse või kaasasündinud episoodi olemasolu, raviga kaovad need umbes kuue kuu pärast, ilma ravita - 18 kuu pärast. Kui samaaegselt tuvastatakse mõlemat tüüpi immunoglobuliinid, kinnitatakse süüfilis ägedas faasis. Haigetel inimestel IgG antikehad süüfilise vastu jäävad seerumis kogu eluks.

Viiruslik hepatiit

Sageli tuvastatakse IgM kuni viirushepatiidini inkubatsiooniperiood haigused, enne esimeste ilmingute ilmnemist ja püsivad haiguse käigus, pärast ravi - ei määrata. Erandiks on viiruslik hepatiit C, milles IgM tuvastatakse nii selle aktiivses kui ka varjatud või kroonilises staadiumis

A-hepatiidi IgG antikehad võivad esineda isegi terved inimesed, mis on põhjustatud infektsioonist või immuunsuse vähenemisest ning IgG esinemist B-, C- ja D-hepatiidi korral tervetel inimestel ei täheldata.

CMVI

CMVI-d levitatakse peaaegu kõikjal ja see ei kujuta endast ohtu rahvatervisele. Siiski on see surmav oht vastsündinule ja lootele emakasisese infektsiooni ajal.

Tsütomegaloviiruse IgM-antikehade tuvastamine viitab esmasele infektsioonile või latentse faasi aktiveerumisele. IgG tiitrid püsivad taastunud inimestel 10 aastat.

Herpes

Tervetel inimestel herpesviiruse vastased antikehad tavaliselt puuduvad. IgM sisaldus viitab haiguse ägedale faasile, IgG aga latentsele (sel juhul on inimene infektsiooni kandja). Herpese IgG sisalduse tõttu peaksite teadma, et viirus võib igal ajal aktiveeruda varjatud staadiumist progresseeruvasse staadiumisse.

Tuulerõuged

Kell tuulerõuged ja 2 aasta jooksul pärast ravi jäävad IgM-klassi immunoglobuliinid verre. Tavaliselt tervetel inimestel tuulerõugete antikehi ei tuvastata.

Stafülokokkide ja streptokokkide põhjustatud haigused

Kõigil inimestel on immunoglobuliinid stafülokokkide ja streptokokkide vastu. Seetõttu on topeltensüümi immuunanalüüsi abil võimalik diagnoosida nende bakterirühmade põhjustatud patoloogilist protsessi. Kui korduva ELISA-ga (nädal pärast esimest) on tiitrite tõus, loetakse analüüs kinnitatuks.

Klamüüdia

Klamüüdia positiivset tulemust näitab avastamine IgM tiitrid 1:8 ja üleval ja klass IgG - 1:64 ja üle selle, mis haiguse käigus suurenevad ja saavutavad kõrged väärtused. Näiteks lastel, kellel on klamüüdia kopsupõletik, tõusevad tiitrid 1:2000–1:4000-ni. IgM olemasolu näitab klamüüdia aktiivsust, mõni aeg pärast nakatumist tuvastatakse veres IgG globuliinid.

Negatiivset ensüümi immuunanalüüsi näitab IgM antikehad puuduvad. Määratud IgG-d ei peeta kõigil juhtudel diagnostilise uuringu kinnituseks, need püsivad sageli mitu aastat pärast nakatumist, mõnikord kogu elu.

pärast süüfilist, nakkuslik mononukleoos IgG immunoglobuliinid säilivad kogu elu ja määratakse vereseerumis. 10 aastat jäävad CMVI, leetrite, punetiste, toksoplasmoosi mikroorganismid.

Amööbiaasi nimetused püsivad mitu kuud kuni mitu aastat. Stafülokoki ja streptokoki bakterite vastaseid antikehi määratakse absoluutselt kõigil inimestel väikeses koguses.

Ülaltoodud juhtudel võimaldab IgG immunoglobuliinide tuvastamine pärast varasemaid haigusi pidada ELISA tulemusi negatiivseks.

Norm raseduse ajal

Raseduse esimesel trimestril läbib iga naine täielik läbivaatus organism, mis hõlmab ensüümi immuunanalüüsi.

Toksoplasmoosi, CMVI, klamüüdia, 2. tüüpi herpese (suguelundite), punetiste, ureaplasma ja mükoplasma uuringud on kohustuslikud, kuna need haigused kujutavad endast tõsist ohtu loote arengule. Nad on võimelised tungima lapse kehasse, möödudes platsentaarbarjäärist.

Ja nad kujutavad erilist ohtu ajal raseduse esimene trimester ja peaaegu alati viivad selleni emakasisene loote surm ja spontaanne raseduse katkemine.

Ülaltoodud haiguste probleem seisneb selles, et need esinevad sageli asümptomaatilises staadiumis, ilma nähtavate sümptomiteta. kliinilised ilmingud ja neid on võimalik paljastada ainult ensüümi immuunanalüüsi abil.


Häid analüüsitulemusi võib öelda, kui seerumis mikroorganisme ei tuvastata. Määratud IgG näitab viiruste edasikandumist ja nõuab naise pidevat jälgimist, et äkilise ägenemise korral saaks õigeaegselt ravida. positiivne IgM annab märku progresseeruvast patoloogilisest protsessist ja nõuab patogeeni viivitamatut kõrvaldamist.

Pealkirja tuvastamine IgG punetiste jaoks viitab varasemale haigusele ja on norm raseduse ajal. IgG-st CMVI-sse ei kujuta ka erilist ohtu lootele, kuid ägenemise võimalus ei ole välistatud (ilmumise sagedus, ligikaudu 1-2%).

Eriline oht on IgG esinemine 2. tüüpi või suguelundite (HSV2) herpesviirusele, kuna sünnituse ajal suureneb ägenemise oht märkimisväärselt. Rasedusperioodil esineb ägeda faasi esinemissagedus 0,9% juhtudest. Loote lüüasaamine herpesviiruse poolt suguelundite läbimise ajal esineb 40% juhtudest ja põhjustab 50% surma.

Varasema toksoplasmoosi korral võib IgM püsida kuni 2 aastat pärast ravi. Loote nakatumise oht on sel juhul esimesel trimestril 17% ja kolmandaks suureneb 60%, kuna peamine nakkustee on transplatsentaarne. Ilmnes IgG toksoplasmoosiks paljud eksperdid kalduvad hindama seda negatiivseks tulemuseks, mis praktiliselt ei ohusta raseduse kulgu.

Väga oluline on valida täpselt need testid, meetodid või diagnostikameetodid, mis tõesti aitavad täpset diagnoosi panna, mitte ei aja arsti veelgi enam segadusse. Ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs on end juba pikka aega tõestanud kui meetod, mis võimaldab mitte ainult saada positiivset või negatiivset vastust küsimusele - kas inimene on haigestunud mõne seksuaalse infektsiooniga, vaid ka määrata, millises arengujärgus haigus on? ja ka mõista, kas patsiendil oli anamneesis sarnane probleem. Süüfilise ELISA on tänapäeval üks tundlikumaid ja spetsiifilisemaid teste, samas kui selle täpsus on umbes 90%.

Ensüümi immuunanalüüsi meetodit kasutavad testimissüsteemid on loodud mitte ainult süüfilise, vaid ka paljude teiste infektsioonide tuvastamiseks: hepatiit, HIV, CMV, herpes, toksoplasmoos jne. Süüfilise ELISA-test võimaldab teil määrata haige inimese veres sisalduvaid kahvatu treponema antikehi (IgG, IgA, IgM). See meetod võimaldab näha antikehade koostoimet spetsiaalsete preparaatidega, mis sisaldavad antigeene, mis koos antikehadega võivad moodustada haiguse tunnuse, mis on erinevates diagnostikameetodites selgelt nähtav.

Süüfilise ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs põhineb veres tuvastatud antikehade interaktsiooni meetodil nakkustekitaja antigeeniga. Diagnoos sõltub sellest, milliseid antikehi kasutati: tuvastada saab kas teatud klassi antikehi või üldiselt. Selle meetodi diagnoosimiseks võetakse veenist tühja kõhuga verd.

ELISA vereanalüüs süüfilise tuvastamiseks hõlmab kolme immunoglobuliinide klassi kasutamist: G, M, A. Nendel immunoglobuliinidel on üks omadus, mis on oluline süüfilise diagnoosimiseks ELISA abil: neid toodetakse rangelt määratletud järjestuses, mille tõttu ELISA võimaldab teil määrake, millises etapis protsess on ja milline on selle arengu dünaamika:

  • Immunoglobuliin M veres näitab, kui palju aega on nakatumisest möödunud. Selle esinemise positiivsed tulemused ei tähenda aga alati sugulisel teel leviva haiguse esinemist: on võimalik, et inimesel on esinenud mõne haiguse ägenemist. krooniline haigus mis sellise reaktsiooni põhjustas.
  • IgA antikehade olemasolu tähendab, et nakatumisest on möödunud vähemalt kuu.
  • Kuna immuunsus selle haiguse vastu ei ole välja kujunenud, võib IgG testi positiivne tulemus näidata nii haiguse haripunkti kui ka ravijärgset perioodi.

Mida tähendab süüfilise positiivse ELISA?

Tuleb märkida, et süüfilise ELISA-positiivne tulemus ei ole paanika põhjus. Fakt on see, et see meetod võimaldab teil määrata ainult antikehade olemasolu, kuid mitte patogeeni. Seega, kui süüfilise ELISA tulemus on positiivne, ei ole see veel diagnoosimise aluseks. Teadusmaailmas aga täiustatakse testisüsteeme igapäevaselt ja täna tähendab see, et enamasti võib analüüside tulemusi siiski usaldada.

Diagnostikatulemusi on ainult kaks: "positiivne" ja "negatiivne". Esimesel juhul tähendavad positiivsed andmed, et patsiendil on haigus ühes etapis või et ta on hiljuti läbinud ravikuuri. Ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi negatiivne tulemus tähendab kas haiguse puudumist või selle arengu väga varast staadiumit.

Süüfilise esimese etapi kliinilist pilti esindab kõva šankri tuvastamine erinevates piirkondades.

Esimesed süüfilise sümptomid ilmnevad 3-5 nädalat pärast nakatumist. Kuni selle hetkeni kulgeb haigus ilma väliste ilminguteta.

Väga sageli pärast kaitsmata vahekorda süüfilist, HIV-i või hepatiiti kahtlustav inimene.

Arvustused ja kommentaarid

Abikaasa testiti süüfilise suhtes, ELISA süüfilise suhtes - positiivne, RMP süüfilise suhtes - negatiivne. Ja mida see tähendab?

Raseduse ajal (periood oli 37 nädalat) oli ELISA skoor positiivne 2,1. Peale sünnitust tegin 2 korda analüüsid - kõik oli negatiivne. 6 kuu pärast möödus uuesti, ELISA - positiivne, CP=1,9 (IgM+IgG). Mida see tähendab.

Tere! Mida see tähendab: süüfilise ELISA vereanalüüs (kokku at.) on positiivne?

Palun öelge, mida tähendab rmp1+, rpga 1+ ifa kokku on negatiivne! Ette tänades.

ELISA on valepositiivne!

Jäta arvustus või kommentaar

VIIMASED PUBLIKATSIOONID
VENEROLOOGILISED UUDISED
Balanopostiit
süüfilis
Herpes
Rasestumisvastased vahendid

ELISA vereanalüüs

Keha seisundi (eriti selle kaitsefunktsioonide) igakülgseks hindamiseks on ette nähtud ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs (ELISA). ELISA vereanalüüs tehakse nakkuslike, autoimmuunsete, hematoloogiliste patoloogiate, primaarsete ja sekundaarsete immuunpuudulikkuste diagnoosimiseks. Selles artiklis teeme ettepaneku kaaluda üksikasjalikumalt, mis on ELISA vereanalüüs, samuti millised on selle rakendamise näidustused.

Näidustused ELISA-ga vereanalüüsi määramiseks ja selle toimimise põhimõte

Nagu me juba märkisime, on ELISA vereanalüüs laborianalüüs, mille abil määratakse vereproovis antigeenid või antikehad. Seda analüüsi kasutatakse hormoonide, immunoloogiliste komplekside ja immunoglobuliinide taseme tuvastamiseks. ELISA analüüsi läbiviimiseks on järgmised näidustused:

  • Allergia diagnoos.
  • Viirusliku päritoluga haiguste diagnoosimine - Epstein-Barri viirus, herpes, hepatiit, tsütomegaloviirus.
  • Sugulisel teel levivate infektsioonide diagnoosimine - mükoplasma, ureaplasma, süüfilis, trihhomonas, klamüüdia.
  • Immuunpuudulikkuse määratlus.
  • Onkoloogiliste patoloogiate diagnostika.
  • Ravi efektiivsuse hindamine.
  • Hormoonide taseme määramine.
  • Preoperatiivne terviklik läbivaatus.

Ensüümi immuunanalüüsi toimepõhimõte põhineb immunoglobuliinide (spetsiifiliste valguantikehade) olemasolu vereanalüüsil. Immunoglobuliine toodab immuunsüsteem, kui antigeenid (võõrad mikroorganismid) sisenevad inimkehasse. Need immuunmolekulid seonduvad erinevate nakkusetekitajatega ja neutraliseerivad neid. Immunoglobuliinide oluline eristav tunnus on nende spetsiifilisus. Nende omaduste tõttu võivad nad spetsiifilise antigeeniga seondudes moodustada antigeen-antikeha kompleksi. ELISA vereanalüüsi käigus määratakse kvantitatiivselt ja kvalitatiivselt just see kompleks.

Sest see uuring sageli kasutati inimverd. Kuid analüüsimaterjalina võite võtta klaaskeha sisu, lootevett, tserebrospinaalvedelikku. Vereproov võetakse tavaliselt patsiendi kubitaalveenist. Soovitatav on anda verd tühja kõhuga (viimasest söögikorrast peab mööduma vähemalt 12 tundi). Kui patsient võtab ravimid tuleb arstile teatada, kuna mõned neist võivad analüüsi tulemust mõjutada. Samuti mõjutab testi tulemuste usaldusväärsust narkootikumide ja alkoholi tarvitamine.

ELISA vereanalüüsi dešifreerimine

Selle analüüsi vorm näitab tavaliselt iga immunoglobuliiniklassi arvutamise negatiivset (-) või positiivset (+) tulemust.

Teeme ettepaneku kaaluda ELISA vereanalüüsi tõenäolise dekodeerimise tõlgendamist.

  • IgG, IgA ei tuvastata ja IgM tulemus on negatiivne - täielik taastumine.
  • IgM, IgA, IgG tulemus on negatiivne – puudub immuunsus infektsioonide suhtes.
  • IgG tulemus, IgA positiivne ja negatiivne, samuti tulemus IgM positiivne- ägeda infektsiooni esinemine.
  • Positiivne IgG tulemus ning negatiivne IgA ja IgM tulemus – vaktsineerimis- või infektsioonijärgne immuunsus.
  • Positiivne või negatiivne IgG, IgA ja negatiivne IgM tulemus on krooniline infektsioon.
  • IgG, IgM, IgA tulemus on positiivne - kroonilise nakkuspatoloogia ägenemine.

Ensüüm-immuunanalüüsis on lisaks antikehade klasside selgitamisele ära toodud nende kvantitatiivsed näitajad ärakirjas. Kuid ainult raviarst annab nende kohta põhjaliku selgituse.

Selle uuringu eelised ja puudused

  • Suhteliselt madalad kulud.
  • Kasutusmugavus.
  • Diagnostika võimalus varajases staadiumis kahtlustatav haigus.
  • Saadud andmete suhteliselt kõrge täpsus.
  • Uuringu tulemuse saamiseks kulub lühike aeg.
  • Võimalus jälgida nakkusprotsessi arengu dünaamikat kehas.
  • Kõrge ühtlustamise tase, mis võimaldab korraldada massiuuringuid.
  • Kõikide uurimisetappide automatiseerimine.

ELISA vereanalüüsi puuduseks on see, et see võib harvadel juhtudel anda valepositiivseid või valenegatiivseid tulemusi. Samuti võib uuringu käigus patsiendil valetulemuste põhjuseks olla lisaks tehnilistele vigadele reumatoidfaktor, kroonilised haigused(milles tekivad antikehad), teatud ravimid meditsiinilised preparaadid, ainevahetushäired.

  • Giardiaas.
  • Ascariasis.
  • Tsüstitserkoosi.
  • Amööbias.
  • Trihhinoos - uuring viiakse läbi rohkem kui üks kord, 4-12 nädalat pärast nakatumist määratakse antikehade maksimaalne tase.
  • Teniasis.
  • Opisthorchiasis - viige läbi diferentsiaaldiagnostika haiguse ägedate ja krooniliste vormide vahel.
  • Toksoplasmoos.
  • Fascioliasis - haiguse ägedas staadiumis määratakse antikehade olemasolu.
  • Naha või vistseraalne leishmaniaas.

Saidi materjalide kasutamisel on aktiivne viide kohustuslik.

Meie veebisaidil esitatud teavet ei tohiks kasutada enesediagnostikaks ja raviks ning see ei saa asendada arstiga konsulteerimist. Hoiatame vastunäidustuste olemasolu eest. Vajalik on spetsialisti konsultatsioon.

Milliseid vereanalüüse süüfilise jaoks antakse: RW, RPHA, ELISA, VDRL, RPR, RIBT, testitulemuste dekodeerimine

Süüfilis on spiroheedi Treponema pallidum põhjustatud nakkushaigus, mis on kalduvus progresseeruda. krooniline kulg, millel on selge kliiniliste sümptomite perioodilisus.

Seksuaalse leviku ülekaal kontakt- ja transplatsentaalsest levikust põhjustab selle haiguse mitmete sugulisel teel levivate haiguste (STD-d, STI-d). Lisaks nendele nakkuse leviku meetoditele mängib erilist rolli kunstlik tee (ladina keelest "artificio" - kunstlikult loodud).

See on tüüpiline raviasutused, mida kasutatakse peamiselt haiglatingimustes. Nakatumine toimub vereülekande ajal, mitmesugused kirurgilised operatsioonid, invasiivsed diagnostikameetodid.

Hoolimata annetatud vere karantiinist on süüfilise avastamise probleem doonoritel erinevad etapid haigus on endiselt olemas.

Seetõttu nõuavad süüfilise diagnostilised meetmed standardimist, uute tundlike ja informatiivsete identifitseerimismeetodite kasutuselevõttu, samuti vigade minimeerimist ja analüüsitulemuste väärtõlgendamist.

Laboratoorsete diagnostikameetodite klassifikatsioon

Süüfilise diagnoosimisel on mõned tunnused ja see erineb teiste bakteriaalsete infektsioonide diagnoosimisest. Kahvatu treponema keeruline struktuur ja antigeensed omadused põhjustavad tulemuste tõlgendamisel vigu seroloogilised reaktsioonid.

Süüfilise vereanalüüsi pakutakse kolmele põhirühmale:

  1. 1 Rahvastikurühmade sõeluuring ja profülaktiline arstlik läbivaatus (sealhulgas rasedus, sünnituseelses kliinikus registreerimine, töötamine ja meditsiiniraamatu registreerimine jne).
  2. 2 Sõeluuring riskirühmades (kaitsmata seks süüfilisega nakatunud isikuga, pealesunnitud seksuaalvahekord, HIV-nakkusega jne).
  3. 3 Isikud, kellel on süüfilise infektsiooni sümptomid või kahtlus.

Kõik laboratoorsed meetodid tinglikult jagatud otseseks ja kaudseks.

Otsesed meetodid

  1. 1 Treponema pallidum'i tuvastamine pimedas väljas (tumevälja mikroskoopia).
  2. 2 Katseloomade nakatumine (kasvatamine laboriloomadel).
  3. 3 PCR (polümeraasi ahelreaktsioon).
  4. 4 DNA sond või nukleiinhappe hübridisatsioon.

Kaudsed meetodid

Seroloogilised reaktsioonid on meetodid laboratoorne diagnostika põhineb kahvatu treponema (lühendatult AG) antigeenide antikehade (lühendatult AT) tuvastamisel. Need on diagnoosi kinnitamiseks hädavajalikud.

  1. 1 Mitte-treponemaalsed testid:
    • Wassermani reaktsioon (RSK);
    • mikrosadestamisreaktsioon (MR, RMP) ja selle analoogid, mis on toodud allpool;
    • Plasma kiirreagiini test (RPR, RPR);
    • Test punase toluidiini ja seerumiga (TRUST);
    • Sugulisel teel levivate haiguste uurimise labori mittetreponemaalne test - VDRL.
  2. 2 Treponemaalset testi:
    • Treponema pallidum'i immobiliseerimise R-mine - RIBT / RIT;
    • Immunofluorestsentsi R-sioon - RIF, FTA (seerumite RIF-10, RIF-200, RIF-abs lahjendamine);
    • Passiivse hemaglutinatsiooni R-sioon (RPHA, TRPGA, TPHA);
    • ELISA (ELISA, EIA);
    • Immunoblotanalüüs.

Joonis 1 – süüfilise serodiagnostika algoritm

Histomorfoloogilised meetodid

Need meetodid on taandatud süüfilise ilmingute histomorfoloogia tunnuste tuvastamisele. Tähelepanu pööratakse kõva šankri struktuuri peensustele. Kuid, diferentsiaaldiagnostika infektsioon histoloogia abil on väga raske. Histomorfoloogiat kasutatakse koos teiste laboratoorsete ja kliiniliste testidega.

Treponema pallidum'i tumevälja mikroskoopia

See meetod põhineb kahvatu treponema otsesel tuvastamisel uuritavas materjalis mikroskoobi ja spetsiaalsete seadmete abil (enamasti erosioonide ja haavandite, harvemini tserebrospinaalvedeliku ja muude substraatide tühjendamine).

Skarifikatsiooni, kraapimise, erosioonidest ja haavandilistest defektidest pigistamise abil saadakse eksudaat, seejärel uuritakse valmistatud preparaati mikroskoobi all.

Tavaliselt tuvastatakse kahvatud treponeemid šankrist saadud preparaadis, sekundaarse värske, sekundaarse korduva süüfilise fookustest, samuti lümfisõlmede punktidest, platsentast.

Tuginedes väikeste osakeste hõõgumisele pimedas väljas valguskiire tabamisel (Tyndalli nähtus), võimaldab see meetod suurepäraselt eristada süüfilise põhjustajat teistest treponeemidest morfoloogiliste ja viiside erinevuste põhjal. bakter liigub.

Mikroskoopia jaoks kasutatakse spetsiaalset sobiva optilise eraldusvõimega tumevälja kondensaatorit. Ravim saadakse purustatud tilga meetodil (tilk materjali kantakse puhtale rasvavabale slaidile ja kaetakse väga õhukese katteklaasiga).

Sukeldusõli tilgutatakse katteklaasile. Toru ja suurendusläätse keerates reguleeritakse soovitud valgustust.

Mikroskoobi pimedas väljas tuvastatakse vererakud, epiteelirakud ja süüfilise põhjustaja. Kahvatu treponema näeb välja nagu spiraal, väga õhuke, kiirgab hõbedast värvi, sujuvate liigutustega.

Joonis 2 – Tumevälja mikroskoopia kui viis kahvatu treponema visualiseerimiseks uuritavas materjalis. Pildi allikas - CDC

Treponema pallidum tuleb eristada teistest treponeemidest, sealhulgas Tr. refringens, mida võib leida orofarünksist ja suguelundite limaskestast. See bakter teeb kaootilisi liigutusi, tal on laiad ja asümmeetrilised, üsna jämedad lokid. Lisaks eristatakse Treponema pallidum Tr. Microdentium, Tr. Buccalis ja Tr. vincenti.

Bakterite visualiseerimist pimedas väljas täiendab mõnikord fluorestsentsreaktsioon. Selleks lisatakse natiivsele materjalile fluorestseeruva värviga märgistatud antitreponemaalsed antikehad. See moodustab kompleksi nimega antigeen-antikeha (lühendatult AG-AT), mida uuritakse fluorestsentsmikroskoobi abil.

Polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR) meetod

PCR, mis töötati välja 1991. aastal Treponema pallidum'i desoksüribonukleiinhappe (DNA) molekuli tuvastamiseks, on väga tundlik ja spetsiifiline, võimaldades tuvastada patogeeni DNA fragmente.

See analüüs põhineb spirochete pallidum DNA lühikeste lõikude kopeerimisel, mis vastavad kindlaksmääratud parameetritele ja sisalduvad proovis. Kõik see toimub kunstlikes tingimustes (in vitro). Reaktsioon viiakse läbi seadmes - võimendis, mis tagab temperatuuritsüklite periodiseerimise. Toimub jahutamine, millele järgneb katseklaaside kuumutamine veaga 0,1˚С.

DNA matriitsi kuumutatakse 2 minutit temperatuuril 92–98˚С ( Maksimaalne temperatuur kasutatakse juhul, kui polümeraas on termostabiilne). Kuumutamisel lahknevad DNA ahelad nendevaheliste vesiniksidemete lagunemise tõttu. Anniilimisetapis alandatakse reaktsiooni temperatuuri, et siduda praimer üheahelalise matriitsiga.

Lõõmutamine võtab aega umbes 30 sekundit, mille jooksul sünteesitakse sadu nukleotiide. Polümeraas kopeerib äsja sünteesitud molekule, mille tulemusena suurenevad desoksüribonukleiinhappe spetsiifilised fragmendid mitu korda. Järgnev fragmentide tuvastamine viiakse läbi agargeelelektroforeesi abil.

Süüfilise PCR-diagnostika on oma olemuselt veel eksperimentaalne, kuid õigustatud kaasasündinud infektsiooni tuvastamisel, rasketel diagnostilistel juhtudel või minimaalse kahvatu treponeemi sisaldusega uuritavas materjalis.

DNA hübridisatsioon

DNA hübridisatsioon viiakse läbi in vitro ja see põhineb kahe üheahelalise DNA molekuli täielikul või osalisel ühendamisel üheks molekuliks. Komplementaarsete fragmentide täieliku kokkulangevuse korral on liit lihtne. Kui komplementaarne sobivus on osaline, toimub DNA ahelate seos aeglaselt. Ahela sulandumise aja põhjal saab hinnata komplementaarsuse astet.

Kui DNA-d kuumutatakse puhverlahuses, lõhuvad vesiniksidemed komplementaarsete lämmastikualustega, mille tulemusena DNA ahelad lahknevad. Järgmisena saadakse preparaat kahest denatureeritud desoksüribonukleiinhappest. Jahtumisel üheahelalised piirkonnad renatureerivad. Tekib nn DNA hübriid.

Meetod võimaldab hinnata ja analüüsida anniilimiskiirust, võttes arvesse DNA tunnuseid (sarnasusi ja erinevusi) liikide vahel või liigisiseselt.

DNA-sondi kasutamine seisneb märgistatud DNA fragmendi hübridiseerimises spetsiifilise DNA piirkonnaga, et tuvastada komplementaarsed nukleotiidjärjestused. Sondi märgistamiseks kasutatakse küllastumata aatomite (kromofooride) või radioaktiivsete isotoopide rühma.

DNA sondi kasutatakse nukleiinhapete heterogeenseks ja homogeenseks tuvastamiseks. Sondi ülesanne on määrata kindlaks piirkonnad, kus siht-sondi ühinemine on toimunud. Homogeenses süsteemis tuvastamise eeliseks on see, et on võimalik jälgida DNA molekulide hübridiseerumist reaalajas.

Meetodi olemus taandub DNA denaturatsioonile ja renaturatsioonile (DNA ahelate taasühendamine). Nukleiinhappe ja DNA sondi renaturatsiooniprotsess lõpeb "hübriidi" moodustumisega.

Spetsiifilised nukleiinhappejärjestused hübridiseeruvad DNA sondiga ja tuvastatakse seega ning võimaldavad hinnata DNA kogust testitavas materjalis.

Laboriloomade nakatumine

Küülikute kõrge tundlikkus Treponema pallidumi suhtes (umbes 99,9%) võimaldab neid kasutada süüfilise infektsiooni diagnoosimisel.

Küülikute nakatamine toimub uurimiskeskustes ja see on "kuldstandard" muude meetodite tundlikkuse hindamisel.

Pöördume tagasi treponemaalsete ja mittetreponemaalsete testide juurde, kuna neid kasutatakse kõige sagedamini. Mõelge nende eelistele ja puudustele, samuti tulemuste tõlgendamise vigadele.

Mitte-treponemaalsed testid

Need on testid määramiseks IgG antikehad ja IgM standardiseeritud kardiolipiini antigeeniks. Nemad märkimisväärne puudus on suhteliselt madala spetsiifilisusega.

Madalad kulud ja lihtsus võimaldavad neid teste liigitada sõeldiagnostikatestideks, mis on vajalikud eeldiagnoosi püstitamiseks ja elanikkonna sõeluuringuks.

Just mittetreponemaalsed testid antakse arstiraamatu registreerimisel, tööle kandideerimisel, sünnituseelses kliinikus registreerimisel.

  1. 1 Minimaalne tundlikkus esmase süüfilise staadiumis - 70%;
  2. 2 Minimaalne tundlikkus hilise süüfilise staadiumis - 30%;
  3. 3 Valenegatiivsete ja valepositiivsete tulemuste võimalus;
  4. 4 RSC rakendamise keerukus.
  1. 1 Suhteliselt madalad katsetootmise kulud;
  2. 2 Hankige kiire vastus;
  3. 3 Võimalus neid sõeluuringuks rakendada.

Valepositiivsete või nõrgalt positiivsete proovide saamine on võimalik järgmistel juhtudel:

  1. 1 Täitmistehnoloogia rikkumine AG-AT kompleksi blokeerimisel.
  2. 2 Patsiendil on autoimmuunhaigused (reumatoidartriit, reuma, sklerodermia, süsteemne erütematoosluupus, sarkoidoos jne).
  3. 3 Pahaloomulised kasvajad.
  4. 4 Viiruslikud ja bakteriaalsed infektsioonid.
  5. 5 Endokriinsüsteemi haigused ( autoimmuunne türeoidiit, diabeet).
  6. 6 Rasedus.
  7. 7 Alkoholi joomine.
  8. 8 Rasvaste toitude söömine.
  9. 9 vanadus.

Nagu loendist näete, on vale tulemuse jaoks piisavalt põhjuseid. Seetõttu tuleks sellesse suhtuda väga ettevaatlikult. Vaatleme koos RSC-ga veel kahte näidist. See on mikrosadestamise reaktsioon ja VDLR (selle modifikatsioon).

Komplemendi fikseerimise reaktsioon (RSK, Wasserman, RW)

See on test, mis põhineb komplemendi võimel seonduda AG-AT kompleksidega. Saadud kompleks tuvastatakse hemolüütilise süsteemi abil. Kardiolipiini antigeen suurendab oluliselt proovi tundlikkust.

Tundlik on Colmeri reaktsioon, mis seisneb erinevatel temperatuuritingimustel toimimises. Seega kulgeb Colmeri reaktsiooni esimene faas temperatuuril 20˚С pool tundi, teine ​​faas temperatuuril 4-8˚С 20 tundi. Selle aja jooksul toimub komplemendi sidumine.

RSK teostamisel on võimalik saada teravalt positiivseid tulemusi. Põhjuseks on ilmselt suur antikehade tiiter lahjendamata seerumis. Sel juhul asetatakse proovid vähenevate annustega.

Süüfilise staadiumite eristamiseks ja antisüüfilise ravi efektiivsuse hindamiseks määratakse antikehade hulk seerumis.

Proovi positiivsust hinnatakse ristide abil, samuti on Wassermani, Colmeri ja Canni reaktsioonides näidatud seerumi lahjendus.

Mikrosadestamise reaktsioon

Kuna ülaltoodud testide teostamise keerukus on suur, on erinevate elanikkonnarühmade arstliku läbivaatuse ulatuseks välja töötatud süüfilise serodiagnostika kiirendatud meetod, nn ekspressmeetod, mikrosadestamise reaktsioon (lühendatult MR, RMP). .

See viiakse läbi kardiolipiini antigeeni ja abiainetega. Selle eeliseks on perifeerse vere kogumine uurimistööks. See kiirendab oluliselt nii tehnikat ennast kui ka laborantide tööd.

Joonis 2 – mikrosadestamise reaktsioon (skeem)

MR jaoks on vaja patsiendi plasmat või inaktiveeritud seerumit (need sisaldavad antikehi). Järgmisena asetatakse plasma märgitud süvenditesse. Seejärel lisatakse uuritavale materjalile tilk kardiolipiini antigeeni, segatakse ja loksutatakse. Selle tulemusena ilmuvad nakatunud inimese seerumis iseloomulikud helbed, mille intensiivsus on erinev.

See on kvaliteeditest. Kvantifitseerimisel kasutatakse 10 seerumi lahjendust, mis asetatakse 10 sobivalt märgistatud süvendisse. Kvalitatiivse MR puhul näidatakse vastust ristide (plusside) või miinusena, kvantitatiivse MR puhul näidatakse antikeha tiiter (1:2, 1:4 jne).

Helveste olemasolu loetakse positiivseks või nõrgalt positiivseks vastuseks. Flokulaadi ilmumine on võimalik ka haiguse puudumisel, seetõttu hinnatakse saadud tulemust lõplikult pärast kontrolluuringut või muid reaktsioone (RIBT, RIF, ELISA, RPHA).

Maailma Terviseorganisatsiooni soovitatud meetodit lipoidse antigeeniga (AH) reaktsiooni tekitamiseks peetakse teiste standardsete mittetreponemaalsete testide seas õigustatult parimaks. Välja töötatud USA-s, Gruusias suguhaiguste laboris (Veneral Diseases Research Laboratories).

Valimi nimeks oli asutuse lühend - VDRL. VDRL on MP modifikatsioon. Süüfilisega patsiendi seerum inaktiveeritakse ja asetatakse slaidile. Kasutatav antigeen koosneb erinevas protsendis kardiolipiinist, kolesteroolist ja letsitiinist. Vastus registreeritakse peaaegu kohe.

Antikehade olemasolul seerumis ilmneb selge flokulatsioon. Seerum muutub reaktiivseks 4 nädalat pärast nakatumist. Antikehade hulga hindamiseks lahjendatakse seerumit eksponentsiaalselt.

  1. 1 suhteliselt kõrge tundlikkus;
  2. 2 suhteliselt kõrge spetsiifilisus;
  3. 3 rakendamise lihtsus;
  4. 4 reaktiivide madal hind;
  5. 5 saate kiire vastuse.

VDRL-i puuduseks on suhteliselt kõrge valepositiivsete tulemuste määr.

Nende põhjused on kõik samad eespool loetletud haigused.

Treponema testid tehakse spetsiifiliste Treponema pallidum antigeenidega. Need on lõpliku diagnoosi seadmiseks vajalikud ja kohustuslikud. See on immunofluorestsentsreaktsioon (RIF), kaudne hemaglutinatsioonireaktsioon (IPHA), ensüümi immunoanalüüs (ELISA) jne.

Pärast positiivne tulemus mittetreponemaalne test (RPR, MP, VDRL), alati tuleks teha treponemaalsed testid (sagedamini kombinatsioon - RPHA, ELISA, RIF).

Treponemaalseid teste on raskem teha kui kiirteste ja need maksavad rohkem raha.

Seda reaktsiooni (lühendatult RIF) kasutatakse süüfilise, sealhulgas varjatud vormide diagnoosimiseks ning positiivsete ja valepositiivsete proovide uuesti kontrollimiseks.

RIF põhineb märgistatud antikehade säral, kui need on kombineeritud antigeeni-antikeha kompleksiga kvartslambi all. Meetodit hakati kasutama 60ndatel ja seda eristas selle rakendamise lihtsus ja kõrge spetsiifilisus (mis on veidi madalam kui RIBT).

Sellel on mitu modifikatsiooni: RIF-10, RIF-200 ja RIF-abs.

Lahjenduses on kõige tundlikum RIF 10 korda ja ülejäänud on spetsiifilisemad. RIF viiakse läbi kahes etapis. AG-le lisatakse patsiendi vereseerum. Moodustub AG-AT kompleks, mida uuritakse järgmises faasis. Fluorokroomiga märgistatud kompleks tuvastatakse seejärel mikroskoopia abil. Kui sära ei täheldata, näitab see spetsiifiliste antikehade puudumist vereseerumis.

RIF-200 on kõigist lahjendustest kõige väärtuslikum. Meetod on ette nähtud diagnostikaks erinevaid vorme süüfilis, eriti latentne süüfilis, ja positiivsete proovide ristkontroll.

Treponema pallidum immobilisatsioonireaktsioon (lühendatult RIBT, RIT) on üks keerukatest seroloogilistest testidest, mis nõuab märkimisväärseid jõupingutusi ja rahalisi kulutusi. RIBT-i kasutatakse üha vähem, kuid selle tähtsus latentse süüfilise diagnoosimisel säilib.

Sellel on suur tähtsus valepositiivsete tulemuste äratundmisel rasedatel ja see põhineb bakterite immobiliseerimisel immobilisiinide – hiliste antikehade – juuresolekul.

Tulemust hinnatakse immobiliseeritud treponema protsendi (%) järgi spetsiaalse tabeli abil:

  1. 1 0 kuni 20 – test negatiivne.
  2. 2 21 kuni 50 – nõrgalt positiivne test.
  3. 3 50-st prepositiivsest reaktsioonist.

RIBT puhul on võimalikud ka valepositiivsed tulemused. Seega on vale vastus võimalik troopilise trepanematoosiga nakatumise, samuti tuberkuloosi, maksatsirroosi, sarkoidoosi ja seniilsete patsientide puhul.

Seda süüfilise vereanalüüsi nimetatakse passiivseks hemaglutinatsiooni testiks (lühendatult vereks TPHA, TPHA).

TPHA antigeen valmistatakse jäära erütrotsüütidest, mis on kaetud kahvatute treponeemide fragmentidega (saadud nakatunud küülikutelt (vt joonis 4)). Analüüsiks kasutatakse patsiendi venoosset verd (plasma või inaktiveeritud seerum).

Antigeeni lisamisel süüfilisega patsiendi seerumis moodustub AG-AT kompleks, mis viib punaste vereliblede aglutinatsioonini. aglutinatsiooni määrab laborant subjektiivselt.

Joonis 3 – RPHA skeem (passiivne hemaglutinatsioonireaktsioon)

Proov hinnatakse positiivseks, kui ilmnevad ühtlase roosa värvusega aglutinaadid. Sademe punane värvus näitab erütrotsüütide ladestumist. RPHA on väga tundlik ja väga spetsiifiline.

Mikrohemaglutinatsiooni reaktsioon

See on RPGA lihtsustatud versioon. Erineb ülalkirjeldatud proovist selle poolest, et reaktsiooni läbiviimiseks on vähem antigeeni, lahjendit ja vereseerumit. Proovi saab hinnata 4 tundi pärast seerumi inkubeerimist. Seda kasutatakse süüfilise sõeluuringutes ja massiuuringutes.

Seotud immunosorbentanalüüs

Ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs (lühendatult ELISA) põhineb spetsiifilisel antigeeni-antikeha reaktsioonil. Süvenditesse viiakse bioloogiline materjal (patsiendi vereseerum, tserebrospinaalvedelik), mille tahkele pinnale on fikseeritud kahvatu treponema antigeenid. Uuritavat materjali inkubeeritakse, seejärel pestakse ära antigeenidega seondunud antikehad (vt joonis 5).

Saadud kompleksi identifitseerimine viiakse läbi fermentatsioonifaasis, kasutades ensüümiga märgistatud immuunseerumit. Keemilise reaktsiooni käigus värvib ensüüm tekkivad kompleksid. Värvimise intensiivsus sõltub spetsiifiliste antikehade hulgast patsiendi veres ja registreeritakse spektrofotomeetriga.

Joonis 4 – ELISA (ensümaatiline immunoanalüüs) skeem

ELISA tundlikkus on üle 95%. Meetodit kasutatakse automatiseeritud režiimis määratud elanikkonnarühmade (doonorite, rasedate ja teiste) uurimiseks, diagnoosi täpsustamiseks positiivsete ja valepositiivsete mittetreponemaalsete testide korral.

Immunoblotanalüüs

Immunoblotanalüüs on väga tundlik meetod, lihtsa ELISA modifikatsioon. Reaktsioon põhineb elektroforeesil kahvatu treponema antigeenide eraldamisega.

Eraldatud immunodeterminandid kantakse nitrotselluloospaberile ja näidatakse ELISA-s. Seejärel seerumit inkubeeritakse ja seondumata antikehad pestakse maha. Saadud materjali töödeldakse ensüümiga märgistatud immunoglobuliinidega (IgM või IgG).

Süüfilise laboratoorse diagnoosimise tulemuste kliiniline hindamine

Allolevas tabelis 1 oleme esitanud analüüside võimalikud tulemused ja nende tõlgenduse. Nagu tabelist näha, on dešifreerimisel peamine väärtus testide igakülgne hindamine.

Tabel 1 – seroloogiliste reaktsioonide tulemuste dešifreerimine (süüfilise vereanalüüsid). Vaatamiseks klõpsake tabelil

Testide reaktsioonivõimet hinnatakse ka "ristidega":

  1. 1 Maksimaalne vastus (tugevalt positiivne test) on tähistatud 4 ristiga.
  2. 2 Positiivset proovi tähistatakse 3 ristiga.
  3. 3 Nõrgalt positiivset reaktsiooni tähistab kaks risti.
  4. 4 Üks rist näitab kahtlast ja negatiivset tulemust.
  5. 5 Eitav vastus on märgitud miinusmärgiga.

Süüfilise laboratoorse diagnoosi optimeerimise probleem ei ole tänaseni oma tähtsust kaotanud. Kaasaegsed meetodid diagnostika nõuab hoolimata teadlaste soovist viia diagnostika võimalikult kõrge tundlikkuse ja spetsiifilisuseni kontrollkontrolli ja individuaalset lähenemist.

Süüfilise infektsiooni tunnuseks on seroresistentsuse nähtus, mis pole saanud teaduslikku selgitust. Diagnoos tehakse pärast patsiendi täielikku uurimist epidemioloogiliste, kliiniliste, laboratoorsete meetoditega.

Meditsiini majandusliku ja tehnilise arengu taustal on edusamme ka süüfilise diagnoosimise uute kriteeriumide väljatöötamisel. Kõik see võimaldab teil patsiente kiiresti, edukalt ja täpselt ravida.

  1. 1 Föderaalsed KLIINILISED SOOVITUSED SÜFILISSEGA PATSIENTIDE HALDAMISEKS. VENEMAA DERMATOVENEROLOOGIDE JA KOSMETOLOOGIDE SELTS. Moskva 2013;
  2. 2 VENEMAA FÖDERATSIOONI TERVISEMISTEERIUMI MÄÄRUS, 26. märts 2001 N 87 “SÜFILISSE SEROLOOGILISE DIAGNOOSI PARANDAMISE KOHTA”;
  3. 3 süüfilis. Pranatharthi Haran Chandrasekar, MBBS, MD professor, Wayne'i osariigi ülikooli meditsiinikooli sisehaiguste osakonna nakkushaiguste juht. Medsacape.com;
  4. Sugulisel teel levivate haiguste ravijuhised (CDC).

(link selle faili 3. artiklile), mis võimaldab hinnata keha vastupanuvõimet nakkushaigused ja haiguse faasi näitamisel on oluline koht ensüümi immuunanalüüsil (ELISA). Selle uuringu läbiviimine võimaldab teil põhjalikult hinnata vere kaitsefunktsiooni aktiivsust ja tuvastada immuunpuudulikkuse seisundit nakkuslike patoloogiate, samuti verehaiguste, autoimmuunprotsesside ja hormonaalsete probleemide korral.

Kuidas on võimalik ühe analüüsiga nii palju eesmärke hõlmata ja millised on selle rakendamise näitajad? Proovime selle välja mõelda.

Mis on ELISA vereanalüüs?

See on laborianalüüs, mis võimaldab teil määrata teatud antigeenide (patogeensete ainete) spetsiifiliste antikehade (valgulise iseloomuga vere kaitsvad tegurid) olemasolu. Ülitähtsate antikehade hulgas on immunoglobuliinid, mis võivad esineda immunokomplekside kujul.

Immunoglobuliinid tekivad inimese keeruliste neurohumoraalsete reaktsioonide tulemusena, mis tekivad vastusena võõrantigeenide sissetoomisele. Iga patogeeni tüüp toodab oma spetsiifilisi antikehi. Nad toimivad antigeeni või patoloogilise mikroorganismi “sidumisel”, moodustades “antigeen-antikeha” kompleksühendi, millele järgneb neutraliseerimine, ensümaatiline lüüs, fagotsütoosireaktsioonid ja organismist väljutamine.

Märge:just teatud komplekside olemasolu põhjal määrab ELISA meetod patsiendis leiduva patogeeni või kahjuliku aine tüübi.

Inimese immuunsuse toimimise põhiprintsiipe saate õppida, vaadates seda videoülevaadet:

Mis on immunoglobuliinid

Avastatud ja uuritud on 5 immunoglobuliinide põhiklassi – IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. ülejäänute roll pole veel täielikult välja selgitatud ja nad on teadusliku uurimise staadiumis.

Märge:kõige olulisem praktiline meditsiin olulised on klasside immunoglobuliinid - A, M ja G. Definitsiooni infosisu aluseks on nende ilmumise, maksimumi ja kadumise erinevad ajaintervallid.

Vaatleme seda küsimust üksikasjalikumalt.

Peamine ülesanne immunoglobuliin A (IgA) on limaskestade kaitsefunktsioon hingamisteed, seedetrakt ja kuseteede süsteem. Haiguse ägeda algusega on neid võimatu tuvastada. Need kaitsekompleksid ilmnevad alles alates haiguse alguse 2. nädalast, mõnikord hiljem. Suurem osa immunoglobuliin A on koondunud limaskestade kudedesse. Ligikaudu umbes 80%. Ülejäänud antikehad ringlevad veres. Peamine ülesanne on mikroorganismide neutraliseerimine ja hävitamine. Pärast vajumist ägedad ilmingud haiguse korral hakkab nende immunoglobuliinide arv vähenema ja kaob täielikult kuni 8 nädala jooksul pärast haiguse algust. Kui IgA on leitud rohkem kui hilised kuupäevad, siis näitab see protsessi kroniseerimist.

Ägeda faasi peamised ja esimesed markerid arenev patoloogia on klassi M immunoglobuliinid (IgM). Need leitakse 5. päevaks pärast halb enesetunne. Saate määrata nende olemasolu veres umbes 6 nädala jooksul. Siis hakkavad nad kiiresti kaduma.

Immuunvastus jääk iseloomustab esinemist veres G-klassi immunoglobuliinid (IgG). Nende tegurite ilmnemine veres tuvastatakse ligikaudu üks kuu pärast haiguse algust. Tulevikus saab neid määrata mitmeks kuuks, aastaks ja isegi kogu eluks, täites kaitsefunktsiooni haiguse taastumise (relapsi) vastu ja mõnel juhul muutes võimatuks patoloogia sekundaarse arengu. Kui immunoglobuliini G kogus hakkas uuesti tõusma, siis võib kahtlustada uuesti nakatumist. Sarnase järelduse saab teha kahe või kolme prooviga, mis võetakse 2-nädalase intervalliga.

Immunoglobuliin D (IgD) asub B-lümfotsüütidel, on tervetel inimestel väikeses kontsentratsioonis. 10 aasta pärast saavutab elu maksimumväärtused. Immunoglobuliini D hulk suureneb raseduse ajal, süsteemsete sidekoehaigustega patsientidel, immuunpuudulikkuse seisundist tingitud haigustega.

Näidustused ensüümi immuunanalüüsi määramiseks

Antikehade määramine patogeensete mikroobide esinemise suhtes kehas, mis põhjustavad:

  • trihhomonoos;
  • ureaplasmoos ja.

On suurenenud immunoglobuliinide arv ja koos.

Diagnostika viiakse läbi, et tuvastada:

  • herpeedilised haigused;
  • viirusliku hepatiidi rühmad;
  • Epstein-Barri viirus;
  • tsütomegaloviirus.

ELISA abil on võimalik määrata 600 tüüpi allergeenide vastaste antikehade olemasolu, tuvastada immuunpuudulikkuse seisund, viia enne siirdamisoperatsioone läbi igakülgne uuring ja teha põhjalik analüüs ravi efektiivsuse kohta.

ELISA on täiendav meetod vähirakkude tuvastamine.

Kuidas vere ELISA-d tehakse?

Ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsiks kasutatakse enamikul juhtudel patsientide verd, mõnikord võetakse klaaskeha, seljaaju kanali vedelikku ja lootevett.

Kubitaalveenist tõmmatakse veri läbi süstenõela süstlasse. Uuring viiakse läbi tühja kõhuga. Tuleb meeles pidada, et teatud ravimite võtmine võib analüüsi tulemust mõjutada. Enne vere annetamist peate hoiduma suitsetamisest ja alkoholi joomisest. Narkootiliste ainete kasutamine võib tulemusi moonutada.

Immunoglobuliinide IgM, IgG, IgA negatiivsete väärtuste korral võime rääkida haiguse puudumisest või selle algfaasist ning miinustega tulemus on võimalik ka täieliku taastumisega pärast märkimisväärset aega.

Kui IgA-d ja IgM-i ei tuvastata ja IgG on positiivne, räägime suure tõenäosusega moodustunud immuunsusest pärast nakkushaigus või pärast vaktsineerimist.

Kõrge IgM tiitri ja IgG, IgA negatiivsete väärtustega võib järeldada, et tegemist on ägeda nakkushaigusega.

Immunoglobuliinide - IgA, IgM, IgG - tulemuste samaaegsed positiivsed väärtused on iseloomulikud olemasoleva kroonilise haiguse kordumise ägedale faasile.

Sest krooniline infektsioon ELISA, mis on protsessi remissioonifaasis, näitab immunoglobuliini M (IgM) negatiivseid väärtusi, samas kui immunoglobuliinide G (IgG) ja A (IgA) tulemus on positiivne.

Ensüümi immuunanalüüsi meetodi eelised

ELISA meetodi peamised eelised on:

  • madal analüüsi hind;
  • diagnostiline spetsiifilisus, täpsus;
  • dünaamiline kontroll (korduv analüüs ravi efektiivsuse ja haiguse staadiumite määramiseks);
  • võimalus teha nakkuskolletes massiuuringuid;
  • tulemuse saamise kiirus;
  • analüüsi suhteline lihtsus;
  • infotehnoloogia kasutamise võimalus töötlemisel;
  • ohutust ja valutust patsiendile.

Kas vere ELISA-l on puudusi?

Uuringu peamine negatiivne punkt on võimalus saada valenegatiivseid ja valepositiivseid andmeid. Arusaamatuste põhjuseks võivad olla tehnilised vead, ravimite võtmine, mis võivad pilti moonutada.

ELISA abil tuvastatakse:

  • (ascaris, pinworms);
  • terav ja krooniline vorm opisthorchiaas;
  • trihhinoos;
  • lamblia olemasolu (lisaanalüüsina);
  • leishmaniaasi vormid;
  • amööbias;
  • toksoplasma sisaldus;

Kokkuvõtteks tuleb märkida, et kaasaegne immunoloogia on pidevalt arengujärgus, otsides uusi meetodeid haiguste diagnoosimiseks ja raviks.

Stepanenko Vladimir, kirurg

Hind: nõudmisel

Toote saate ostukorvi lisada, määrates koguse

Tootja: Diagnostikasüsteemid

Riik: Venemaa

Üksus mõõdud: komplekt

Pakendi tüüp: pappkast

Tarnija kood: L-1823

Kirjeldus

Ensüüm-immunoanalüüsi testsüsteem Treponema pallidum'i (T. pallidum) klasside G, M ja A antikehade tuvastamiseks inimese seerumis (plasmas) ja tserebrospinaalvedelikus süüfilise diagnoosimiseks, sobiv reaktiivide komplekt 96x2 määramiseks käsitsi meetodite ja automaatsete analüsaatorite lavastamise jaoks. Meetod põhineb "lõksu" põhimõttel, mis seisneb selles, et kõigi proovis esinevate klasside spetsiifilised treponemaalsed antikehad seonduvad samaaegselt rekombinantsete antigeenidega – T.pallidum immunodominantsete valkude analoogidega, mis on fikseeritud tableti süvendites ja samade antigeenidega, mis on märgistatud mädarõika peroksidaasiga, vere või inimese tserebrospinaalvedeliku ja konjugaadi seerumi (plasma) proovide ühisel inkubeerimisel. TMB-d sisaldava substraadi-kromogeense segu värvuse muutus, kui see lisatakse tableti süvenditesse, näitab kahvatu treponema spetsiifiliste antikehade olemasolu uuritud proovides.


Funktsionaalne eesmärk

Treponema pallidum'i antikehade tuvastamine mängib süüfilise diagnoosimisel olulist rolli, kuna T. pallidum'i ei saa rakukultuurist eraldada ning haiguse varjatud ja kaugelearenenud staadiumis pole sageli võimalikud testid patogeeni otseseks tuvastamiseks. Süüfilise serodiagnostikas kasutatakse mittetreponemaalseid (RMP, RPR, VDRL) ja treponemaalseid (RPHA, RIF, ELISA) teste. ELISA teste üldantikehade määramiseks kasutatakse annetatud vere massisõeluuringul ja süüfilise diagnoosimisel seroloogiliste testide kompleksi osana. Pärast edukat ravi püsib enamikul juhtudel treponemaalsete testide reaktiivsus.

Tehnilised andmed

Määra kompositsioon:
1. Polüstüreenplaat 96 auguga kokkupandav - 2 tk.,
2. Konjugaat – läbipaistev kollane vedelik,
3. Positiivne kontroll – läbipaistev punane vedelik,
4. Negatiivne kontroll – läbipaistev roheline vedelik,
5. Pesulahus, kontsentraat, pH 6,9–7,6,
6. TMB – läbipaistev värvitu vedelik,
7. Substraadi lahus - läbipaistev värvitu vedelik, pH ~4,2.
8. Peatusreaktiiv (0,2 M),
9. Kasutusjuhend ja kvaliteedisertifikaat.
Säilitustingimused: temperatuuril +2...8°C on külmutamine lubamatu.
Kõlblikkusaeg - 15 kuud alates komplekti etiketil märgitud valmistamise kuupäevast.
Vastavus TLÜ 9398-182-05941003-2010 nõuetele.
Registreeritud Roszdravnadzoris.