Helmintler en iyisi. Rus üretimi Kundelsky R.V., Ph.D.'nin ELISA'sı için aletler ve reaktif kitleri.

İLAÇLAR

YENİ BİR ELISA TEST SİSTEMİ DEĞERLENDİRİLMESİ

"Rotavirüs-antijen-ELISA-EN İYİ"

12Zhirakovskaya E.V., 3Ignatiev G.M., 3Indikova I.N., 12Tikunova N.V.

1 Federal Devlet Bilim Kurumu SSC VB Rospotrebnadzor'un "Vektörü", Koltsovo yerleşimi, Novosibirsk Bölgesi;

2 Kimyasal Biyoloji ve Temel Tıp Enstitüsü, Novosibirsk;

3 Tıbbi Biyolojik Preparatların Standardizasyonu ve Kontrolü için Devlet Enstitüsü Los Angeles Tarasevichag Moskova

JSC "Vector-Best" (Novosibirsk)'de geliştirilen yeni bir reaktif seti "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST"in duyarlılığını, özgüllüğünü ve tekrarlanabilirliğini test etme sonuçları sunulmaktadır. Elde edilen veriler, klinik materyalde grup A rotavirüs antijenini saptamak için bu test sistemini kullanırken sonuçların tanısal güvenilirliğini tahmin etmeyi mümkün kılar.

Anahtar Kelimeler: ELISA test sistemi, verimlilik, rotavirüs A

A Grubu rotavirüsler (Reoviridae familyası, Rotavirus cinsi), dünya çapında küçük çocuklarda şiddetli gastroenteritin en yaygın nedenidir. Bağışıklığı baskılanmış yetişkinler de sıklıkla hastalanır. Rotavirüs enfeksiyonu (RVI) oldukça bulaşıcı bir hastalıktır. birden çok yol dağıtım. Enfeksiyon kaynağı, hastalığın açık veya asemptomatik bir formunun yanı sıra bir virüs taşıyıcısı olan bir kişidir. Çocuklar ve yetişkinler arasında RVI, sporadik vakalar, yerel grup hastalıkları, salgınlar şeklinde kendini gösterebilir ve yaygındır. Bu enfeksiyonun fekal-oral bulaşma mekanizması gıda (süt ve süt ürünleri, çocuk yemeği), su ve temas-ev yolları.

Rotavirüs gastroenteritinin klinik tabloya göre, özellikle sporadik morbidite ile teşhisi, bu enfeksiyonun karakteristik semptomları, çeşitli etiyolojilerin diğer akut bağırsak enfeksiyonlarının (AII) semptomlarından çok az farklı olduğundan, belirli bir zorluk sunar. Ayırıcı tanı rotavirüs gastroenteritli hastalarda hem gıda toksik enfeksiyonları ile hem de diğer viral (norovirüsler, astrovirüsler, adenovirüsler, koronavirüsler, Coxsackie enterovirüsleri ve ECHO) ve bakteriyel (salmonelloz, dizanteri, kolera, yersiniosis, fırsatçı mikroorganizmalar) etiyolojisi ile gerçekleştirilir. Ne yazık ki, hepsi uzman değil tıbbi kurumlar RF, rotavirüs enfeksiyonunu teşhis eder.

Teşhis yöntemleri RVI'da, dışkıda bütün viryonları, viral antijeni veya virüse özgü RNA'yı tespit etmeyi amaçlar. Hem klinik materyalde hem de nesnelerde virüslerin doğrudan tespitine yönelik umut verici bir yaklaşım çevre, bir ters transkripsiyon yöntemidir - polimeraz ile zincirleme tepki(RT-PCR) . AT son yıllar test sistemleri modern temellere dayalı olarak oluşturulur bilimsel gelişmeler kombinasyon ile çeşitli metodlar rotavirüslerin tespiti: “son noktaya kadar” amplifikasyon ürünlerinin hibridizasyon-floresan tespiti ile multipleks PCR; gerçek zamanlı algılama ile son nokta immüno-PCR (IPCR); gerçek zamanlı algılama ile nicel RT-PCR. Araştırma laboratuvarlarında, rotavirüsleri hızlı bir şekilde tespit etmek için elektron mikroskobu kullanılır. Bununla birlikte, yukarıdaki yöntemlerin tümü oldukça zahmetlidir ve pahalı aletler ve yüksek nitelikli personel gerektirir. Bu nedenle, yürütülürken laboratuvar teşhisi hastanelerde ve ayakta tedavi ortamlarında, rotavirüslere karşı mono ve poliponik antikorlarla enzim bağlantılı immünosorbent testi (ELISA) kullanılarak dışkıda viral antijenin saptanmasına dayalı yöntemler tercih edilir. Bu yöntem pratik laboratuvarlar için mevcuttur, kurulumu kolaydır ve sonucu hızlı bir şekilde almanızı sağlar.

Bu çalışmanın amacı, JSC "Vector-Best", Novosibirsk'te geliştirilen yeni bir reaktif seti "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST"in tanısal etkinliğini incelemektir.

^Eylül-Aralık

Malzemeler ve yöntemler

Çalışmanın materyali çocukların dışkı örnekleriydi. Erken yaş AII tanısı olan ve olmayan klinik bulgular bağırsak enfeksiyonu bağırsak enfeksiyonları bölümlerinde hastaneye yatırılan ve solunum yolu enfeksiyonları MUZ "Çocuk şehri klinik hastane 3 "Novosibirsk. Hastalar hastaneye kabul edildikten sonra tek kullanımlık steril plastik kaplarda 2-3 ml'lik dışkı örnekleri toplandı ve -20 °C'de 15 gün saklandı. Malzemenin daha uzun süre saklanması -70 °C'de gerçekleştirilmiştir.

Çalışmada daha önce AII patojenlerinin varlığı için test edilmiş 104 dışkı örneğinden oluşan bir panel kullanılmıştır. Bunlardan:

ELISA ve RT-PCR ile sadece A grubu rotavirüslerin tespit edildiği 30 örnek; RT-PCR ile genotipleme, dışkı örneklerinin PG1 (18 numune), PG2 (4 numune), PG3 (3 numune), PG4 (2 numune), PG4 (1 numune), PG9 (1 numune) genotipinin rotavirüslerini içerdiğini göstermiştir. PG3 (1 numune);

RT-PCR ile sadece ikinci genotipin norovirüslerinin tespit edildiği 14 numune, 5085-5485 h bölgesinde norovirüslerin genomu üzerinde bulunan kapsid geninin 5" bölgesinin nükleotit sekansının belirlenmesiyle doğrulanmıştır;

4526-4955 bp bölgesinde astrovirüs genomu üzerinde yer alan kapsid geninin 5" bölgesinin nükleotid sekansı belirlenerek doğrulanan RT-PCR ile sadece astrovirüslerin tespit edildiği 15 örnek; PCR yöntemi sadece adenovirüsler tespit edildi;

Hastanenin solunum bölümünde yatan, bağırsak enfeksiyonunun klinik belirtileri olmayan çocuklardan 30 dışkı örneği (kontrol); ön analiz, bu örneklerde yukarıdaki viral patojenleri ortaya çıkarmadı.

Örnekler rota-, noro-, astro- ve adenovirüslerin varlığı veya yokluğu için Rusya Federasyonu "AmpliSense No virus 1, 2 genotypes - 306/322", "AmpliSense Astrovirus -165'te kayıtlı ticari kitler kullanılarak RT-PCR ile test edilmiştir. ", "AmpliSense Adenovirus - 462", "AmpliSense Rotavirus - 290" (Merkezi Epidemiyoloji Araştırma Enstitüsü, RF tarafından üretilmiştir). Numunelerin incelenmesi, son kullanma tarihi boyunca ilgili reaktif kitlerinin kullanım talimatlarına uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Rotavirüs için pozitif olan örnekler RT-PCR ile genotiplendirildi. Rotavirüs antijeninin varlığının veya yokluğunun belirlenmesi, kit talimatlarına uygun olarak ticari bir test sistemi IDEIA™ Rotavirus (DakoCytomation, UK) kullanılarak ELISA ile de gerçekleştirilmiştir.

"Rota-virüs-antijen-ELISA-BEST" reaktifleri kiti test edilirken, yukarıdaki tüm numuneler (104) şifrelendi ve test kiti ile üç kez test edildi. Testlerin tamamlanmasından sonra numunelerin kodu çözülmüş ve sonuçlar analiz edilmiştir.

sonuçlar ve tartışma

"Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" reaktif kitinin duyarlılığı, eşleşme sayısı ile değerlendirildi. pozitif sonuçlar(% olarak) test edilen test sistemi ve karşılaştırıcılar kullanılarak numunelerin testi. Aynı zamanda, "Rotavirüs-antijen-ELISA-BEST" reaktifleri kiti kullanıldığında, rotavirüs A varlığı teyit edilen 30 örneğin hepsinin pozitif olduğu bulundu (Tablo 1). Bu nedenle, rotavirüs A'nın saptanması için reaktiflerin test setinin duyarlılığı %100 olmuştur. Panelin yedi farklı rotavirüs genotipine sahip numuneleri içerdiği ve bunların hepsinin Rota virüsü - antijen - AND FAB EST reaktif kiti tarafından başarıyla tespit edildiği belirtilmelidir.

Test sisteminin özgüllüğü, ön çalışmalardan elde edilen verilerle test edilen test sistemi kullanılarak test numunelerinin negatif sonuçlarının (% olarak) tesadüflerinin sayısıyla değerlendirildi. Spesifikliği değerlendirmek için kullanılan panel, hiçbir viral patojenin tespit edilmediği 30 numunenin yanı sıra RT-PCR yöntemi kullanılarak yalnızca ikinci genotipin norovirüslerinin tespit edildiği 14 numuneyi, RT-PCR yönteminin kullanıldığı 15 numuneyi içermiştir. sadece astrovirüsleri tespit etti; PCR ile sadece adenovirüslerin tespit edildiği 15 örnek. 74 negatif numuneden 69'unda Rotavirus-antijen-ELISA-BEST reaktif kiti ile rotavirüs A varlığı tespit edildiğinde optik yoğunluk değerlerinin arka plan değerlerini, yani değerleri aşmadığı belirlendi. Kontrol negatif numunelerde optik yoğunluğun ölçülmesi sonucu elde edilir. Astrovirüsler içeren iki numune, bir numune - ikinci genotipin norovirüsü, bir numune - adenovirüs ve yukarıdaki viral patojenlerin hiçbirinin tespit edilmediği iki numune, pozitif optik yoğunluk değerleri gösterdi. Viral patojenlerin hiçbirinin daha önce tespit edilmediği numunelerde, tekrarlanan çalışmalardan sadece birinde pozitif sinyallerin kaydedildiğine dikkat edilmelidir (Tablo 2). Bu nedenle, "Ro-tavirüs-antijen-ELISA-BEST" reaktifleri kitinin özgüllüğü %93,2 olmuştur.

Testler sırasında, "Rotavirüs-antijen-ELISA-BEST" reaktiflerinin test seti kullanılarak klinik materyal üzerinde elde edilen sonuçların tekrarlanabilirliği değerlendirildi - sonuçlardaki varyasyonu belirlemek için tüm numuneler farklı deneylerde üç kez incelendi. Hemen hemen tüm durumlarda benzer sonuçlar elde edildi: test sistemi tüm negatif ve pozitif örnekleri aynı şekilde tespit etti. İstisna, viral patojenlerin hiçbirinin daha önce tespit edilmediği iki örnekti: her iki örnek için tekrarlardan birinde, optik yoğunluk değerleri ODcrit'i aştı. Fazlalığın önemsiz olduğuna dikkat edilmelidir (Tablo 2). Böylece, sonuçların tekrarlanabilirliği %98.8 olmuştur.

Yapılan testlerin sonuçları, test edilen "Rotavirüs-antijen-ELISA-BEST" reaktif setinin, teşhis etkinliği - özgüllük, duyarlılık ve tekrarlanabilirlik - Rusya Federasyonu'nda mevcut olan teşhislerle karşılaştırılabilir olduğunu gösterdi.

klinik materyalde grup A rotavirüs antijeninin tespiti için "Ro-tavirus-antigen-ELISA-BEST" test kitinin kullanılması.

Edebiyat

1. Bogomolov B.P. // "Bulaşıcı hastalıklar: acil teşhis, tedavi, korunma". - M., Yeni çap. - 2007.

2. Vasiliev B.Ya., Vasil'eva R.I., Lobzin Yu.V.// "Akut bağırsak hastalıkları. Rotavirüsler ve rotavirüs enfeksiyonu. - S.-Pb., Lan. - 2000.

3. Zhirakovskaya E.V., Tikunov A.Yu., Bodnev O.A., ve diğerleri// "BIOpreparations". - 2008 - No. 2. - s. 15 - 18.

4. Zhirakovskaya E.V., Maleev V.V., Bodnev A.S. ve diğerleri // JMEI - 2008 - No. 4. - İle birlikte. 12 - 16.

5. Ignatyuk T.E., Golutvin I.A., Nasikan N.S., ve diğerleri // Viroloji Sorunları. - 2003. - v. 48. - No. 6. - s. 1721.

6. Novikova N.A., Fedorova O.F., Epifanova N.V., Chup-rova A.B. // "Viroloji Sorunları". - 2007. - v.52. -№ 3 - ile. 19-23.

7. A.T. Podkolzin, A.A. Mukhina, G.A. Shipulin, et al.//

"Bulaşıcı hastalıklar". - 2004. - v. 2. - No. 4. - s. 85-91.

8. Podkolzin A.T., Fenske E.B., Abramycheva N.Yu., et al.// Terapötik arşiv. - 2007. - v. 79. - No. 11. -s. 10-16.

9. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., ve diğerleri // “Epidemiyoloji ve bulaşıcı hastalıklar". -2004.-No. 6.-s. 17-20.

10. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., ve diğerleri // Hijyen ve sanitasyon. - 2007. - Hayır. 1. - s. 56-58.

11. Arcangeletti M.C., De Conto E, Pinardi F., et al. // Acta Biomed. Ateneo. Parmens. - 2005.-V. 76(3). - S. 165-170.

12. Gladstone B.P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., et al. // Epidemiol. Bulaş. - 2008. V. 136(3). - S. 399-405.

13. Min B.S., NohYJ., Shin J.H., atal. //J. Virol. yöntemler. -2006. - V. 137(2). - S. 280 - 286.

14. Santos N., Honma S., Timenetsky Mdo C., et al. //J. Klinik. mikrobiyol. - 2008. V. 46 (2). - S. 462 - 469.

15 Schets F.M., van Wijnen J.H., Schijven J.F., et al. //Uygula. Çevre. mikrobiyol. - 2008. - V. 74 (7). - S. 2069 - 2078.

16. Stockman L.J., Staat M.A., Holloway M., et al. // J. Klinik. mikrobiyol. - 2008. - V. 46 (5). - S. 1842 - 1843.

"Rotavirüs-antijen-ELISA-BEST" reaktif kitinin duyarlılığının ve özgüllüğünün değerlendirilmesi

tablo 1

No. No. Örnek sayısı Karşılaştırma ilaçları ile saptama sonuçları IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR Rotavirüs-antijen-ELISA-BEST kiti ile saptama sonuçları

1. 30 30 0 0 0 30

2. 15 0 15 0 0 2

3. 14 0 0 14 0 1

4. 15 0 0 0 15 1

"Rotavirus-antigen-ELISA-BEST>" reaktif kitinin özgüllüğünün değerlendirilmesi -

Tablo 2

PCR AmpliSense

rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs

0,443 1,306 0,676 0,418

Rotavirüs-antijen-IFA-EN İYİ CJSC "Vektör-En İyisi"

OPCrit OPCrit OPCrit

0,250 0,263 0,251

> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939

> 4,000 > 4,000 > 4,000

£Eylül

Aralık 2009

AmpliSense

rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs rotavirüs astrovirüs astrovirüs astrovirüs astrovirüs astrovirüs astrovirüs astrovirüs

IDEA Rotavirüs DakoCytomation RPC = 0.150

0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040

Rotavirüs-

OPkrit 0.250

> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972

> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800

> 4,000 3,981

> 4,000 3,713

> 4,000 4.000

> 4,000 3,989

> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062

antijen-ELISA-EN İYİ "Vektör-En İyisi"

OPcrit OPcrit 0.263 0.251

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,821 3,899

> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871

> 4,000 3,929

> 4,000 3,881 3,884 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,995

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,837 3,839

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,986

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,998

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052

astrovirüs astrovirüs astrovirüs astrovirüs astrovirüs astrovirüs astrovirüs astrovirüs norovirüs norovirüs norovirüs norovirüs norovirüs norovirüs norovirüs norovirüs norovirüs norovirüs norovirüs norovirüs norovirüs norovirüs norovirüs adenovirüs adenovirüs adenovirüs adenovirüs adenovirüs adenovirüs adenovirüs adenovirüs adenovirüs adenovirüs

IDEA Rotavirüs DakoCytomation OIIKpHT = 0.150

0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039

PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO "BeKTop-EecT"

OnKpHT OnKpHT OIIKpHT

0,250 0,263 0,251

0,115 0,075 0,082

0,053 0,046 0,058

0,233 0,198 0,189

0,144 0,105 0,128

0,243 0,062 0,073

0,043 0,040 0,046

0,069 0,043 0,041

0,143 0,044 0,058

0,220 0,206 0,230

3,475 2,577 2,405

0,223 0,247 0,240

0,232 0,236 0,231

0,048 0,042 0,041

0,121 0,085 0,093

0,132 0,111 0,174

0,122 0,052 0,063

0,061 0,044 0,054

0,073 0,035 0,048

0,089 0,046 0,046

0,047 0,043 0,044

0,041 0,039 0,044

0,083 0,046 0,038

0,168 0,074 0,097

0,247 0,118 0,099

0,248 0,251 0,242

0,243 0,259 0,250

0,054 0,048 0,055

0,048 0,040 0,037

0,058 0,045 0,046

0,053 0,045 0,049

0,069 0,058 0,065

0,912 0,344 0,379

0,089 0,037 0,042

Aralık 2009

PCR AmpliSense

adenovirüs adenovirüs adenovirüs adenovirüs negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif negatif olumsuz

IDEA Rotavirüs DakoCytomation RPC = 0.150

0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036

Rotavirüs - antijen - ELISA-BEST CJSC "Vektör-En İyisi"

OPCrit O P Krit OPCrit

0,250 0,263 0,251

0,105 0,042 0,043

0,046 0,143 0,133

0,227 0,045 0,042

0,065 0,068 0,054

0,125 0,039 0,042

0,196 0,191 0,182

0,209 0,170 0,154

0,316 0,071 0,073

0,058 0,043 0,049

0,171 0,056 0,061

0,049 0,060 0,064

0,047 0,062 0,065

0,058 0,047 0,066

0,073 0,072 0,066

0,188 0,120 0,109

0,180 0,074 0,072

0,057 0,063 0,058

0,047 0,060 0,047

0,162 0,146 0,143

0,248 0,248 0,260

0,063 0,066 0,104

0,247 0,223 0,251

0,054 0,053 0,070

0,242 0,240 0,248

0,073 0,061 0,103

0,066 0,065 0,064

0,108 0,123 0,192

0,072 0,067 0,071

0,079 0,079 0,087

0,104 0,079 0,164

0,169 0,150 0,162

0,140 0,166 0,146

0,114 0,133 0,131

Helmintiyazların çocuklarda tedavisi son derece önemlidir, çünkü bunun sonuçları fiziksel ve zihinsel, patolojik süreçlerin gelişiminde bir gecikme olabilir. iç organlar ve sistemler, hatta ölüm. Ek olarak, helmint istilası oldukça bulaşıcıdır, bu nedenle okul öncesi ve okul kurumlarında çok kolay yayılırlar. Buradan ne kadar önemli olduğu anlaşılıyor zamanında tedaviçocuklarda helmintiyazis.

Çocuklarda helmintlerin ilk belirtileri

Solucanlar fırsatçı patojenlerdir insan vücudu, insanların kesin konakçı olduğu solucanlar. Ayrıca, içinde bu konu Sahibinin yaşı önemli değil. farklı şekiller helmintiyazlar hem çocuklarda hem de yetişkin hastalarda görülebilir.

Bir çocuk için helmintiyazis ne kadar tehlikelidir?

Daha önce de belirtildiği gibi, çocuklarda helmintler neden olabilir ciddi hastalık ve zihinsel ve fiziksel gelişimin yavaşladığı patolojiler. Olası Komplikasyonlar her bir helmintiyaz türü tamamen farklı olabilir, örneğin:

Bu nedenle, çocukların helmintiyazları daha fazla dikkat, zamanında tıbbi müdahale, bir uzmanda uzun süreli gözlem ve önleme gerektirir.

Çocuklarda ana semptomlar

Bir çocukta helmintiyazis belirtileri, solucanların türüne bağlı olarak farklı olabilir:

1. Ascaris, çocukta hemen alerjik reaksiyon, ateş ve mide bulantısı olarak kendini gösterir. İlk görünümler genellikle parlaktır, ancak hızla azalır. Daha sonra aşağıdaki belirtiler ortaya çıkabilir:

kolik ve disbakteriyoz ve yeni doğanlar;
1 yaşından küçük bebeklerde, göbek deliğinde ağrı, dışkı sorunları, alerji ve zayıflık;
daha büyük çocukların uyku sorunları, huzursuz davranışları, kabuslar;
3-7 yaş arası çocuklarda bulantı, ateş, öksürük ve karın ağrısı, döküntü karakteristiktir.

2. Etken maddesi kıl kurdu olan enterobiyoz, silinmiş bir hastalık olarak kendini gösterir. klinik tablo. Ve sadece 1 ay sonra aşağıdaki belirtileri fark edebilirsiniz:

yenidoğanlarda anüsün iltihaplanması, şişmesi ve kızarması, yemek yemeyi reddetme, geceleri ağlama, iştahsızlık;
bir yaşın altındaki çocuklar aynı semptomlara sahiptir, ayrıca geceleri anüsün şiddetli kaşınması (23:00 - 1:00 arası), kızlar genital organların iltihaplanmasından muzdariptir;
daha büyük çocuklarda, göbek yakınında karın ağrısı, uyku bozukluğu, kalçalarda kaşıntı.

3. Toksokariazisin semptomlarını tanımak zordur. küçük sıcaklık vücut ve alerjik reaksiyonlar(döküntü, kurdeşen, kaşıntı ve şişme). Enfeksiyondan sonra, özellikle en küçük hastalarda daha sonra pnömoni veya bronşite neden olan bir öksürük oluşabilir.

Trichinosis, yenidoğanlarda hafif belirtiler gösterir, aksi takdirde aşağıdaki belirtiler görülür:

ateşli durum;
yüzün şişmesi;
kas ağrısı;
alerjik reaksiyonlar;
5 yaş ve üzeri çocuklarda bademcikler, dalak, kızarıklık ve boğaz ağrısı büyüyebilir.

Çocuk davranışını ve durumunu açıklayamadığı için 2 yaş ve altındaki çocuklarda helmintiyazis semptomlarını teşhis etmek en zordur. Bu nedenle, çocuğun herhangi bir atipik belirtisi ve davranışı için doktora göstermek daha iyidir.

İlk önce ne yapılması gerekiyor?

Bulunan solucanlar dışkı bir çocuk hastalığın en önemli belirtisidir, bundan sonra hemen bir doktordan yardım almalısınız. Doğru teşhis olmadan hiçbir helmint tedavisi başarılı olamaz. Bu durumda araştırma yöntemleri, aşağıdaki prosedürler de dahil olmak üzere kapsamlı olmalıdır:

anüsten kazıma almak;
çocuğun dışkısının incelenmesi;
Kan tahlili;
trikinozis şüphesi olan nadir vakalarda kas biyopsisi;
serolojik kan testi;
röntgen, ultrason, tomografi;
Kandaki antikorları tespit etmek için ELISA.

Tedavi Yöntemleri

Çocuklarda helmintiyazis tedavisi kapsamlı, iyi düşünülmüş, planlanmış olmalıdır. kesin dozajlar ve ilaç uygulama sıklığı. Bunun nedeni, antelmintik etki için toksik bileşenlere sahip ilaçların kullanılmasıdır, bu da mantıksız kullanımın yol açabileceği anlamına gelir. yan etkiler. Ayrıca evde uygun halk tedavisişifalı Bitkiler.

Halk ilaçları

Çocuklar için bu tür hastalıklar için halk ilaçları ile modern tedavi, 4 etkili yolu içerir:

Herhangi bir evde tedavi yöntemi önceden doktorunuzla tartışılmalıdır. Unutulmamalıdır ki otlar ve Halk ilaçları kontrendikasyonlar bireysel hoşgörüsüzlük şeklinde sağlanır.

Tıbbi tedavi

Enterobiasis ve ascariasis ile genellikle Pirantel ve Mebendazol gibi ilaçlar kullanılır. Pirantel alımı, pinwormlardan kilogram başına 10 mg madde ve yuvarlak solucanlardan 5 mg / kg dozunda uygundur. Mebendazol, 2-3 yaş arası çocuklar için 50 mg'da günde iki kez arka arkaya üç gün, 3 yaşından büyük çocuklar için art arda üç gün 100 mg'da iki kez alınır, 3 hafta sonra tedavi tekrarlanır.
Toksokariazis ile Mebendazol farklı bir dozda reçete edilir - 2 yaş ve üstü çocuklar için, 14-10 gün boyunca günde iki kez 100 mg.
Trichinosis tedavisi, kilogram ağırlık başına 5 mg Mebendazol'ü kabul eder, bundan sonra doz günde üç doza bölünür. Tedavinin seyri, bir doktorun sıkı gözetimi altında 1 haftadır.

Helmintiyazların önlenmesi

hayvanlarla temastan sonra, sokak ve kum havuzlarından sonra, tuvalete gitmeden ve yemek yemeden hemen önce ellerin yıkanması;
sadece temiz yiyecekler yemek;
et ve balık ürünlerinin uygun şekilde uygulanan ısıl işlemi;
kaynamış su içmek;
kişisel hijyen ve sanitasyona uyulması;
evcil hayvanların düzenli olarak solunması;
2 yaş ve üstü çocuklarda önleyici nem alma.

Toksokara için kan testi

Toksokariazis ile insan enfeksiyonunun özellikleri

Enfeksiyon taşıyıcıları köpeklerdir, nadiren kedilerdir. Toksokara yumurtaları dışkıyla dökülür başıboş köpekler. Bir kez yerde, suda veya bir hayvanın kürkünde oyalandıktan sonra, sağlıklı bir organizmaya çeşitli şekillerde girerler.

Davetsiz misafire tepki

İtibaren tıbbi istatistikler Meslekleri risk altında olmadığı sürece yetişkinlerin toksokariazis ile enfekte olma olasılığının daha düşük olduğu bilinmektedir. Çocukların enfeksiyon kapma olasılığı çok daha yüksektir.

Toksokariazisin en yaygın belirtileri şunlardır:

Herhangi bir hastalık belirtisi olmayan ateş.
Sıcaklık artışı.
Baş veya karın bölgesinde büyüyen ve azalan ağrı.
Ortadan kaldırılamayan bir deri döküntüsü görünümü.
Yüzün şişmesi.
Genel analizde ortaya çıkan kandaki eozinofil seviyesinde bir artış.

Doğru bir tanı koymak için toksokara için immünolojik bir analiz reçete edilir. Kanda helmintin (antijenler) genetik bilgisini taşıyan protein bileşiklerinin varlığı, igg sınıfının antikorlarını üretmek için bağışıklığı kışkırtır. Bu, toksokariazis ile enfeksiyonun ilk belirtisidir.

Ön teşhis

Hastanın öyküsünün ilk aşaması kolektiftir. Bir hastayı toksokariazis için kan testi yaptırmadan önce, hastalığın tarihini incelemek ve bir ön muayene yapmak gerekir.

Birincil tanı:

Enfeksiyonu tetikleyebilecek ağırlaştırıcı durumların araştırılması - hayvanlarla spesifik çalışma veya Evcil Hayvan, potansiyel olarak tehlikeli alanlarda toprak işleri, köpek gezdirme alanlarında oynayan çocuklar.
Hastanın fizik muayenesi. Anket deri toksokarlar, göz kapakları ve deri altı invazyonu için gözbebekleri, palpasyon.
Ayrıntılı bir kan testi randevusu. Toksokariyaz ile enfeksiyon sırasında, bazı göstergelerde önemli bir artış karakteristiktir - eozinofiller (% 70-80), lenfositler, ESR. Hemoglobin seviyesi belirgin şekilde düşerken.
Karaciğer örneklerinin alınması. Şiddetli istilada, bilirubinde güçlü bir sıçrama ile kendini gösteren karaciğer üzerindeki yük etkilenir.

Geleneksel testler (kan, yardımcı program, yayma) kullanılarak toksokara istilasının doğrudan doğrulanması mümkün değildir. Larvaların göç eden doğası için zor olduğu için duodenal muayene de bilgi vermez.

Ön incelemenin sonuçlarını aldıktan sonra, olası enfeksiyon toksokarlar ve iddia edilen tanının benzer semptomlara sahip hastalıklardan ayrılması durumunda, hastaya toksokariyaz için bir ELISA'ya tabi tutulur.

Bağlantılı immünosorbent tahlili

Bu çalışmanın temel amacı, insan vücudunda toksokarların varlığını doğrulamaktır. Bu helmintlere karşı antikorlar kan plazmasında bulunur, bu nedenle damardan alınır.

Toksokara analizi biraz hazırlık gerektirir:

İşlemden bir gün önce yağlı ve ağır yiyecekler yemeyin.
Laboratuarı ziyaret etmeden önce gün içerisinde şekerli, gazlı ve alkollü içecekler içmeyin.
Oruç testleri yapın.
Kullanmayın ilaçlarönceki gün ve analizin planlandığı gün.

Bu çok bilgilendirici istila tespit yönteminin bazı durumlardan etkilenebileceği belirtilmelidir. Hastada aşağıdaki durumlarda yanlış pozitif sonuç ortaya çıkabilir:

Onkolojik hastalıklar.
Akciğerlerin tüberkülozu.
Şiddetli karaciğer patolojileri.
otoimmün sendrom.
Antifosfolipid sendromu.
Gebelik.

Bu durumda, listelenen koşullar altında koruyucu sistem ayrıca immünoglobulinler (antikorlar) ürettiğinden, %100 doğrulayıcı bir analiz elde etmek mümkün olmayacaktır. Ek teşhisler yapmak ve toksokariazisi listelenen faktörlerden ayırt etmek gerekir.

IgG sınıfının immünoglobulinlerinin (titre) konsantrasyonu, istila başlangıcından 2-3 ay sonra mümkün olan maksimum değere ulaşır. Enfeksiyon ne kadar şiddetli olursa, bu oran o kadar yüksek olur.

ELISA sonuçları

Tanı koymak için enzim immunoassay dikkatle incelenir, elde edilen sonuçlar referans değerlerle karşılaştırılır. Norm, pozitiflik indeksi 0,9'dan az olan 1:100 antikor titresidir.

Başlıkların sayısal değerleri

Elde edilen sonuçlar olumsuz, olumlu, zayıf olumlu veya şüpheli olabilir. Antikor titrelerinin sayısı, istilanın ciddiyetine ve oluşum süresine bağlıdır.

Analiz transkripti:

1:100'e kadar titrede - sonuç negatiftir. Hastanın vücudunda toxocara larvalarına rastlanmadı.
1:400'e kadar titrede - sonuç zayıf bir şekilde pozitiftir. Hasta zayıf bir invazyona sahiptir veya oküler bir toksokariazis formu geliştirir. Bazı durumlarda, gösterge yeni bir enfeksiyonu gösterir.
1:600'e kadar titrede - sonuç pozitiftir. Adam acı çekiyor klinik form tespiti acil tedavi gerektiren helmintiyazis.
1:800'e kadar titrede - sonuç pozitiftir. İlerici bir doğanın şiddetli bir istilasından ve iç organların patolojik bir sürecinin gelişme olasılığının yüksek derecede olduğundan bahseder.

Nadir istisnalar dışında, ELISA çalışması, başka bir kökene sahip helmintiyazların bir karışımı ile ihmal edilmiş bir istila biçimini ortaya koymaktadır. Bu durumda, toplam antikorlar 1:800'den yüksek olabilir.

pozitiflik katsayısı

saat enzim immunoassay istilayı ayırt etmek için 1:400 - 1:600 titresi olan toksokariazis için yan faktörler, elde edilen göstergeler referans değeri ile karşılaştırılır. Bu rakamlar arasındaki farka genellikle indeks veya pozitiflik katsayısı denir.

Genellikle yürütülen ELISA formunda bir gösterge diğerinin karşısındadır. Birincisi norm, ikincisi şu anlama gelebilir:

0,9'a kadar - sonuç negatiftir. Toxocara larvaları bulunamadı.
0.9-1.1 - sonuç şüpheli. Bu durumda, yeniden teşhis atanır.
1.1-2.2 - sonuç biraz olumlu. Bir kişi, zayıf bir istilaya sahip bir taşıyıcıdır.
2.2-4.2 - sonuç olumlu. Toksokariazis ılıman uzun süredir gelişmektedir.
4.4'ün üzerinde - sonuç, helmintik istilanın zirvesini veya yeni bir helmintiyaziyi gösterir.

4.4 sonucu CP ve eozinofilide %10 oranında tespit edilen bir artış gelişmeyi gösterebilir. göz şekli toksokariazis ve çapraz invazyona karşı antikorların varlığı, toplamda toksokariazis.

Bağışıklık tepkisi ve antikorların optik yoğunluğu (pozitiflik katsayısı), Toxocara ile enfeksiyonun derecesine ve bunların lokalizasyon yerine bağlıdır. En düşük titre ve CP göstergesi, yalnızca helmintlerin olmadığını varsaymaya izin verir, ancak bunu iddia etmez.

Sunulan bilgiler, kendi kendine teşhis veya kendi kendine tedavi için bir kaynak olarak hizmet edemez. ELISA'nın sonuçları, bir ön inceleme ile birlikte, bir uzmana sadece bir sorunun varlığını söyleyebilir. Invitro laboratuvarında kan teşhisi yüksek doğrulukla yapılır, analiz sonucuna uzmanların pozitiflik katsayısı hakkındaki yorumları eşlik eder. Bu, doktorun daha doğru bir teşhis koymasına büyük ölçüde yardımcı olur.

Önde gelen Rus üreticiler Enfeksiyon teşhisi için reaktif kitleri segmentinde: - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - LLC NPO Teşhis Sistemleri, N.Novgorod; - CJSC "Ecolab", Elektrogorsk MO. Teşhis kitleri alanında olumsuzluk bulaşıcı hastalıklar ve fizyolojik koşullar: - Alkor-Bio LLC, St. Petersburg; - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - Hema-Medica LLC, Moskova. Alerjilerin laboratuvar teşhisi için reaktifler bölümünde: - Alkor-Bio LLC, St. Petersburg; - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - NPO Immunoteks LLC, Stavropol. Laboratuvar ekipmanı üretimi: - OOO Pikon, Moskova

Testlerin isimlendirmesine göre olası ithal ikame derecesinin değerlendirilmesi Analitlerin isimlendirilmesi, birimler Rusya Federasyonu'nda kullanım için onaylanmıştır Rusya Federasyonu'nda üretilmiştir Olası ithal ikame derecesi Bulaşıcı hastalık belirteçleri % Bulaşıcı olmayan hastalık belirteçleri ve fizyolojik durum göstergeleri % Alerji belirteçleri % Toplam: %

Tablet ürünleri için pazar hacmine göre ithal ikame derecesinin tahmini ELISA Pazar segmentleri Rusya Federasyonu'ndaki pazar hacmi, milyon. Yerli üreticilerin satış hacmi, milyon ruble İthal ikame payı Bulaşıcı hastalık belirteçleri % Bulaşıcı olmayan hastalık belirteçleri ve fizyolojik durum göstergeleri % Alerji belirteçleri % Ekipman50051% Toplam: %

Bir bütün olarak immünokimyasal yöntemler için ürünler için pazar hacmi açısından ithal ikame derecesinin değerlendirilmesi Pazar bölümleri Rusya Federasyonu'ndaki pazar hacmi, milyon. Yerli üreticilerin satış hacmi, milyon ruble İthal ikame payı Bulaşıcı hastalık belirteçleri % Bulaşıcı olmayan hastalık belirteçleri ve fizyolojik durum göstergeleri % Alerji belirteçleri % Ekipman % Toplam: %

Yerli üreticilerin sektördeki sorunları: ELISA yönteminin modası geçiyor. Yerli IF reaktiflerinin ithal kemilüminesans olanlarla kademeli olarak değiştirilmesi vardır; Mevcut kamu ihale sistemi, ya en ucuz malların satın alınmasını ya da benzersiz özelliklere sahip ithal ürünlerin satın alınmasını teşvik eder; Yerli otomatik ekipman üreticilerinin yetersiz gelişiminin ve ithal ürünlerin üretiminin yerelleştirilmesinin ana nedenlerinden biri gümrük idari engelidir; Son zamanların temel sorunu sistemin çöküşü devlet kaydı RZN'de yeni ürünler. Yeni ürünlerin pazara girişi fiilen durmuştur ve daha önce uzun listelerle kayıt yaptıran yabancı üreticiler yerli üreticilere göre avantajlı olmaya devam etmektedir; Teknolojik geriliğin temel nedeni, modern ekipmanlara uygun ürünler üretme hakkının elde edilememesi; Yerli üreticilerin düşük konsolidasyon derecesi ve kendi aralarındaki sürekli fiyat savaşları, gelişmiş ürünler geliştirmeyi ve dış pazarlar da dahil olmak üzere önde gelen oyuncularla eşit düzeyde rekabet etmeyi imkansız kılıyor.

Öneriler: FCC çerçevesinde, tıbbi cihazların kamu alımları için rekabetçi olmayan bir prosedür ve daha sonra ayrıntılı bir yayın getirin. Ortalama piyasa fiyatına dayalı finansman limitlerinin belirlenmesi, yerli üreticilere belirli avantajlar sağlayacak, pahalı ithal reaktiflerin tüketiminin sınırlandırılmasına izin verecek ve bütçe fonlarının gelişimini daha etkin bir şekilde kontrol edecektir; Kaynakları modern ürünlerin geliştirilmesine yoğunlaştırmak için yerli üreticilerin genişlemesini ve konsolidasyonunu teşvik etmek ve Uluslararası market. Rekabetçi olmayan bir kamu ihale prosedürü, piyasada yalnızca gerçekten rekabetçi işletmeleri hızla bırakacaktır; Ülkenin biyolojik güvenliğini sağlamak için yeterli bir dizi testin geliştirilmesini kamu-özel ortaklığı ilkeleri temelinde teşvik etmek için devlet fonlarını tahsis etmek; Gümrük muafiyetleri bitmiş ürünler için değil, bileşenler için olmalıdır; Kayıt sistemini Avrupa sistemiyle uyumlu hale getirin, burada Tıbbi cihazlarİle birlikte düşük seviye potansiyel riskler bir uygunluk beyanı temelinde kayıt altına alınır.

Tanım sayısı 96 (tekrar halinde 48)
Çalışma tabletinin formatı: 12x8 soyulmuş, 1 kuyu kırılmış.
Hassasiyet: 1.5 U/ml.
Ölçüm aralığı: 0-400 U/ml.
Test numunesinin hacmi 25 µl'den fazla değildir.
37ºº'de termostatik kontrollü bir çalkalayıcıda bir kromojen ile enzimatik reaksiyon gerçekleştirme koşullarının standardizasyonu.
Kompozisyonu ayarla:
1. Çizgili plaka 12 x 8 delik, kullanıma hazır - 1 adet.
2. Kullanıma hazır kalibrasyon numuneleri (0-400 U/ml) ile boyanmıştır. değişen dereceler konsantrasyona bağlı olarak yoğunluk - 6 şişe.
3. Kontrol numunesi - 1 şişe.
4. Tek bileşenli konjugat, kullanıma hazır, seyreltme gerektirmeyen - 1 flakon.
5. Serum seyreltme solüsyonu - 1 şişe.
6. Substrat kromojenik, tek bileşenli - kullanıma hazır tetrametilbezidin plus (TMB+) çözeltisi, seyreltme gerektirmeyen - 1 şişe.
7. İkiz - 2 şişeli fosfat-salin tampon solüsyonu.
8. Reaktifi durdurun, kullanıma hazır - 1 şişe.
9. Tableti yapıştırmak için film - 1 adet.
10. Kalibrasyon grafiği oluşturmak için şablon - 1 adet.
11. Reaktif tepsisi - 2 adet.
12. 5-200 µl - 16 adet için pipet uçları.
Tabletin ambalajı bir tik "zip-lock" paketidir.
FST-T çalışma solüsyonunun stabilitesi +2...8°C sıcaklıkta en az 5 gündür.
Seti +2...8°C'de saklayın. Son kullanma tarihi - üretim tarihinden itibaren 1 yıl.
Roszdravnadzor'da kayıtlı.