Sinovyal sıvının sitolojik muayenesi. Sinovyal sıvı çalışması: analizin nasıl yapıldığı ve ne gösterdiği

"Sinovyal sıvının incelenmesi" olarak adlandırılan prosedür, eklemlerin çeşitli dejeneratif ve enflamatuar hastalıklarının teşhisi için gereklidir.

Sinovyal sıvı salgılayan bir eksüdadır. eklem kılıfı bağ dokusundan oluşan ve kemik ve kıkırdak yüzeylerini kaplayan. Eklemde aşağıdaki işlevleri yerine getirir:

• lokomotor;
• metabolik;
• bariyer;
• trofik.

Eklem sıvısı, eklem, sinovyal membran ve kıkırdak dokusunda meydana gelen tüm inflamatuar süreçlere hızla yanıt verir. Bu madde, artikülasyonun morfonksiyonel durumunu belirleyen en önemli eklem bileşenlerinden biridir.

Normal, sağlıklı bir eklemde sıvı hacmi orta düzeydedir. Ancak bazı eklem rahatsızlıklarının gelişmesiyle birlikte, araştırmaya tabi olan sözde eklem efüzyonu oluşur. Diğerlerinden daha sık olarak, büyük eklemlerin (dirsek, diz) sinovyal sıvısının bir örneğinin analizi yapılır.

Sinovyal sıvı delinerek elde edilebilir. Delme için en önemli koşul eklemin steril olmasıdır.

Sinovyal sıvı örneğinin standart analizi şunları içerir:

1. Delinmiş sıvının makroskopik analizi (renk, hacim, bulanıklık, viskozite, müsin pıhtısı).
2. Hücre sayısını sayma.
3. Yerli preparasyonun mikroskopisi.
4. Boyalı preparasyonun sitolojik analizi.

saat sağlıklı kişi eklem sıvısı açık sarı (saman) renklidir. Ancak hem artritte hem de ankilozan spondilitte (), test sıvısının rengi sarı kalır. saat inflamatuar süreçler eklem sıvısının rengi, sinovyal membrandaki karakteristik değişikliklere bağlı olarak farklı olabilir.

Sedef hastalığınız varsa veya romatizmal eklem iltihabı incelenen eksüdanın rengi sarıdan yeşile değişebilir. Travmatik veya bakteriyel hastalıklarda eklem sıvısının rengi bordodan kahverengiye kadar değişir.

eklem sıvısı sağlıklı eklemşeffaf, ancak psoriatik, romatoid veya septik artrit varlığında bulanıklığı gözlenir.

Viskozitenin doğası şunlara bağlıdır:

1. pH seviyesi;
2. tuz konsantrasyonu;
3. önceden uygulanan ilaçların varlığı;
4. hyaluronik asidin polimerizasyon derecesi.

Aşağıdaki durumlarda artan bir viskozite seviyesi not edilir:

• sistemik lupus eritematoz;
• çeşitli travmatik değişiklikler.

Aşağıdaki durumlarda viskozitede bir azalma gözlenir:

1. romatizma;
2. artroz;
3. ankilozan spondilit;
4. çeşitli artrit (psoriatik, gut, romatoid).

Biri ana Özellikler sinovyal sıvı, asetik asit ile karıştırılmasının bir sonucu olarak bir müsin pıhtısı üretme yeteneğidir.

Bu durumda, gevşek bir pıhtının varlığı, eklemlerde meydana gelen inflamatuar süreçleri gösterir.

Artikülasyonun patolojisini belirleyen ana analiz

Belirli bir patolojiyi teşhis eden ana çalışma, bir eklem sıvısı örneğinin mikroskobik analizidir.

Her şeyden önce, doktorlar hazırlıktaki hücre sayısını saymaya dikkat eder. Norm 200 hücre/µl'ye kadardır. Hücre sayısındaki önemli artışa sitozis denir. Sitoz, distrofik ve inflamatuar hastalıkların teşhisine izin vererek, inflamatuar süreçlerin gelişimini açıkça değerlendirir.

Herhangi bir artrit tipinin seyrinin akut aşamasında, hastanın belirgin bir sitozu vardır (hücre sayısı 30.000 ila 50.000 arasındadır).

1. Mikrokristal artritli hastada hafif bir sitoz vardır.
2. Reiter sendromu, psödogout veya psoriatik artritte sitoz orta düzeydedir (20.000 ila 30.000 hücre).
3. Hücre sayısı 50.000'i geçerse hastaya bakteriyel artrit teşhisi konur.

Dikkatli bir analiz, bir hastada çok sayıda çeşitli kristallerin varlığını ortaya çıkarabilir, ancak teşhis için sadece iki tipi önemlidir. Psödogutta, hastanın kalsiyum dihidropirofosfat kristalleri vardır ve sodyum ürat kristallerinin varlığı gutu gösterir. Bu birikintiler polarize mikroskop kullanılarak tespit edilebilir.

Sağlıklı bir sinovyal sıvı, kan elemanlarını (lenfositler, monositler, nötrofiller) ve çeşitli doku hücrelerini (histiyositler, sinoviyositler) içerir.

Eklem eksüdasındaki inflamatuar süreçlerde tespit etmek mümkündür. özel form nötrofiller - ragositler. Bu tür hücreler, immün komplekslerin sitoplazmaya dahil edilmesi nedeniyle oluşan hücresel bir yapıya sahiptir. Ragositlerin varlığı esas olarak romatoid artritin göstergesidir.

Sinovyal sıvıdaki mononükleer hücrelerin tespiti, neoplazmların arka planına karşı gelişen tüberküloz süreçlerin, alerjik sinovitin ve artritin karakteristiğidir.

Enflamatuar eklem hastalıklarının, akut faz parametrelerinde ve laktat dehidrojenaz seviyesinde bir artış ile karakterize edildiğine dikkat edilmelidir.

Yaymanın mikroskobik incelemesi gram pozitif kokları, klamidyayı veya gonokokları tespit edebilir. Çoğu zaman, hastalarda mantar bakterileri tespit edilir. Enfeksiyöz sürecin doğasını doğru bir şekilde belirlemek ve antibiyotiklere duyarlılık oluşturmak için doktorlar, patojenik mikroflora için sinovyal sıvıyı aşılar.

Eklem eksüdasını sadece bir romatolog tarafından reçete edildiği şekilde delmek mümkündür. Sonuç olarak, bu makaledeki video, sinovyal sıvı protezleriyle ilgili çok ilginç bir soruyu gündeme getirecektir.

Sinovyal sıvının (SF) sitolojik incelemesi, efüzyonlu herhangi bir eklem hastalığının patolojinin inflamatuar veya inflamatuar olmayan doğası hakkında bilgi edinmesine izin veren basit bir analizdir. Enflamasyon durumunda, analiz, eklem içi mikro kristaller (MK) enflamasyona neden olduğunda, esas olarak gut ve kondrokalsinoz ile temsil edilen bir grup metabolik artropatinin teşhisine izin verir. Bu rahatsızlıklar ile SF testi, hızlı, doğru ve güvenilir bir teşhis yapılmasını mümkün kılar.

Sinovyal sıvının sitolojik çalışmaları pahalı, minimal invaziv, hızlı ve teknik olarak mevcut değildir. Bu durumda, iki tanı özelliği özellikle ilgi çekicidir:

• Çok sayıda hücrenin varlığı, inflamatuar eklem hastalığının gerçek bir yansımasıdır;
• MC'nin varlığı veya yokluğu, birkaç dakika içinde mikrokristal artropatiyi onaylamanıza veya hariç tutmanıza ve doğasını belirlemenize izin verir. Sinovyal sıvı genellikle her eklem boşluğunda çok küçük miktarlarda bulunur. Rolü iki yönlüdür: bir kayganlaştırıcı görevi görür, hareket sırasında eklem yüzeyleri arasındaki sürtünmeyi azaltır ve kan akışı olmayan kıkırdak dokusunu besler.

Sinovyal sıvının sitolojik incelemesi, eklem efüzyonundan sorumlu patoloji hakkında faydalı bilgiler sağlar.

• SF'deki mikro kristallerin özellikleri - metabolik artropatide değerli bilgiler
• 500 ama<1500, то считают процентное содержание отдельных типов лейкоцитов, обращая особое внимание на их необычные формы.">Hücre popülasyonunun hücreselliği ve formülü, beş tip SF'yi ayırt etmeyi mümkün kılar (Tablo 1). Bu özellik sadece göreceli bir öneme sahiptir, ancak klinisyen için değerlidir.

Tablo 1 - farklı şekiller Sitolojiye göre SF

• Normal sıvı berrak, renksiz veya sarımsıdır. Artan hücresellik ile daha opak hale gelir.
• Sıvının viskozitesi, hyaluronik asit içeriği ile ilgilidir. Normal veya inflamatuar olmayan SF'de yüksektir. Viskozite, bir eldiven veya parmak uçları ile korunan iki parmak arasına bir damla SF gerdirilerek ve bu şekilde elde edilen filamentin uzunluğu ölçülerek kolayca değerlendirilir. Tüm iltihaplarda sıvının viskozitesi azalır.
• Pıhtı oluşumu anormal sinovyal sıvının özelliğidir. Gerçekten de normal SF fibrinojen içermez ve pıhtılaşmaz. Bununla birlikte, herhangi bir patolojik SF, özellikle inflamatuar ise, fibrin içerir ve hücresel elemanları bir ağ içinde çevreleyen gevşek bir trombüs oluşturur. Bu nedenle antikoagülan kullanarak SF pıhtılaşmasını önlemek çok önemlidir.

Sinovyal Sıvı Sitolojisi Tekniği

1. SF almak

Test yalnızca ihmal edilebilir miktarda numune gerektirdiğinden, herhangi bir hacim analiz için yeterlidir. Taze durumda, analiz için bir damla yeterlidir. SF, steril bir plastik tüp içinde toplanır. Sinovyal sıvının sitolojik incelemesi, bir antikoagülan kullanımını gerektirir. En iyi seçim- sodyum heparinat; polimorfonükleer hücreler tarafından fagosite edilebilen UA'lar içerdiklerinden kalsiyum oksalat ve lityum heparinat hariç tutulmalıdır. Aynı nedenle eldivenlerdeki talk veya nişasta gibi parçacıklardan kaçınılmalıdır.

2. Taze eklem sıvısının sitolojik incelemesi

SF'nin sitolojik incelemesinin bu adımı, bir lamel altında numunenin bir damlası (0,05 mi) gecikmeden görüntülendikten sonra mümkün olan en kısa sürede gerçekleştirilmelidir. Düşük hücre SF nadiren patolojik olduğu için santrifüj gerekli değildir. MC'lerin tanımlanması zordur ve muhtemelen bir kompansatör ve bir döner tabla içeren bir polarize mikroskop gerektirir, bu da özellikle birkaç tane varsa MC'leri görmeyi kolaylaştırır. Polarize edici bir mikroskobun yokluğunda, hücresel bileşenlerinkinden farklı bir kırılma indisine sahip elementler tespit edildiğinde, analiz oldukça kapalı bir mikroskop açıklığı ile gerçekleştirilebilir. Eklem hasarının doğasını belirlemek için önemli olan Goryaev odasındaki hücre sayısı belirlenerek bu çalışma desteklenebilir (Tablo 2).

Ana patolojik durumlar ve sıvı türleri

Sinovyal sıvı örneğinin hemen sitolojik incelemesi mümkün değilse, SF'nin 4 °C'de veya daha da iyisi dondurucuda -20 °C'de tutulması şartıyla 24 saate kadar ertelenebilir. Bir swab hazırlamak ve havayla kurutmak da mümkündür. K, doğrudan, polarize ışıkta veya May-Grunwald-Jiams'a (MGJ) göre boyamadan sonra görüntülenebilir.

3. MGZH'ye göre boyama

Taze SF'deki hücre sayısının sayılmasının sonuçları, sitosantrifügasyon, yayma hazırlama ve MGF için boyamadan sonra tek tek hücre tiplerinin sayımlarıyla tamamlanır, bu da SF'de bulunan hücrelerin doğasını netleştirmeyi mümkün kılar.

Sonuçlar

Sinovyal sıvının sitolojik muayenesi, muayenenin bir hastanın muzdarip olabileceği birçok patolojiden belirli bir patolojiye odaklanmasına izin verdiği için klinisyenler için faydalı bir testtir. Eklemlerin metabolik veya mikrokristal lezyonları için böyle bir analiz incelemenin anahtarıdır (Tablo N 3).

Tablo 3 - Mikrokristal artritte SF'nin sitolojik parametreleri

bulaşıcı artrit

Sinovyal sıvının sitolojik incelemesi çok çok sayıda polinükleer hücrelerin baskın olduğu, genellikle mutasyona uğramış hücreler. Enfeksiyon antibiyotiklerle baskılanırsa, PMN'lerin sayısı daha azdır ve enfeksiyon kanıtı, SF'nin bakteriyolojik analizine veya histolojik inceleme sinovyal biyopsi. SJ zengin ise eozinofiller, aranmalı mikrofilarya.

İltihaplı romatizmal hastalıklar

Burada yine hücresellik önem ve polimorfonükleer lökositler (PMN'ler) en çoktur. Bu eklem patolojileri grubu, belirli bir romatizmayı yansıtan belirli bir sitolojik profile sahip değildir. Ancak SF, romatoid ve reaktif artritte (Fissinger-Leroy-Reiter spondiloartrit) SLE poliartriti, romatizmal pelviospondilit veya psoriatik artritten istatistiksel olarak daha fazla inflamatuardır.

Metabolik veya mikrokristal artrit

Sinovyal sıvının sitolojik incelemesinin makul ve ilginç olduğu bu hastalık grubu içindir. MK tespitinin enfeksiyonu ortadan kaldırmadığı ve her durumda bakteriyolojik incelemenin istendiği unutulmamalıdır.

Gut

Gut her zaman eklem boşluğunda sayısız UA varlığı ile ilişkilidir. monosodyum ürat, çok karakteristik form ve fiziksel özellikler. Bunlar, hücre zarlarını delen konik bir uca sahip, iğne şeklinde, 5-20 mikron uzunluğunda uzun MK'dir. Sıvı tipik olarak yüksek derecede inflamatuardır ve nötrofiller açısından zengindir (Şekil 1).

Gut alevlenmeleri arasındaki asemptomatik efüzyonlarda çok küçük kristaller (1-2 µm) görülebilir. Şimdi genellikle hücre dışıdırlar. Sodyum ürat MC'ler suda çözünür, korunmazlar ve BMF için boyanmış yaymalarda saptanmazlar.

Eklemlerin kondrokalsinozu

Bu patoloji, akut dönemde psödogout veya inflamatuar romatoid veya osteoartrit semptomlarına neden olan kalsiyum pirofosfat dihidrat MK birikintilerinin kıkırdak ve / veya sinovyal zarındaki varlığından kaynaklanmaktadır. Teşhisin anahtarı – SF'de karakteristik MC'nin tanımlanması. MK 5-10 mikron uzunluğunda, lökositlerin içinde, düz veya eğik paralelyüz şeklindedir. Çift kırılmaları, ürik asidin K'sinden daha azdır. Bu FA'lar suda az çözünür ve MGJ için boyamadan sonra da devam eder. Bazen taze durumda veya MGJ boyamasından sonra SF analizi hem ürat hem de pirofosfat UA'yı gösterir. Bu karışık eklem lezyonları özel değildir.

Eklem Hastalıkları ve Kalsiyum Fosfatlar

Bazı hastalarda, sıklıkla rotator manşet kireçlenmesinden muzdariptir. omuz eklemi, yıkıcı artropati ve SF inflamasyon belirtileri gelişebilir. SF inflamasyon belirtileri UA varlığı ile ilişkilidir, sahip olunan çeşitli formlar kalsiyum fosfat. En yaygın olanı hidroksiapatittir, ancak oktakalsiyum fosfat ve trikalsiyum fosfat da bulunabilir. Bu kristallerin uzunluğu 0, l - 0.2 µm'dir, optik mikroskopta görünmezler.

Diğer mikro kristaller

Taze SF incelenirken, bazen aşağıdakileri içeren diğer MK türleri tespit edilir:

• Hemodiyaliz hastalarında görülebilen kalsiyum oksalat. oluştururlar

MK bazen piramidal, bazen düzensiz şekil veya kalsiyum pirofosfat ile karıştırılabilecek çubuklar;

• MK kolesterol - büyük, dikdörtgen, düz, genellikle eğimli köşeli. Romatoid artritte veya yaşa bağlı bursitte görülürler;
• Tedavi amacıyla eklem içine enjekte edilen kortizon türevleri burada kristalleşir ve UA birkaç hafta veya aylarca devam edebilir. gerçek diyebilirler

mikrokristal artrit. Şekilleri değişkendir ve hepsi çift kırılımlıdır;

• Charcot-Leiden MC nadirdir ve eozinofilden zengin sıvıda görülebilir. Şekilleri, bir pusula iğnesine benzer, zayıf bir şekilde çift kırılımlıdır.

Çözüm

Eklem sıvısının sitolojik incelemesi, az invaziv, hızlı, uygun maliyetli, değerli bir tanı testidir ve bu testte:

Hücrelerin bolluğu, eklem hastalığının inflamatuar doğasının gerçek bir yansımasıdır.

MC'nin varlığı veya yokluğu, dakikalar içinde mikrokristal artropatinin doğrulanmasına veya dışlanmasına izin verir ve sıklıkla metabolik artropatinin doğasını belirler.

Sinovyal sıvının klinik laboratuvar analizi için standartlaştırılmış analitik teknoloji.

1. Bu çalışmanın amacı

Teknoloji "Klinik laboratuvar analizi eklem hastalıklarını teşhis etmek ve ayrıca hastalığın seyrini ve tedavinin etkinliğini izlemek için sinovyal sıvı" yapılır.

Sinovyal sıvı çalışması, büyük önemşu adreste:

Tüm çalışanlar, teknolojide kullanılan elektrikli cihazların (fotometreler, mikroskoplar, santrifüjler) teknik bilgi föylerinde belirtilen talimatlara ve güvenlik düzenlemelerine uymak zorundadır; reaktiflerle çalışan personel, reaktiflerin kullanımı konusunda eğitilmelidir, kişisel koruma kişisel hijyen kurallarına uyun.

Yangınları önlemek için mevcut yönetmeliklere uygun olarak yangın güvenliği kurallarına uyulması gerekmektedir.

Bu nedenle, güvenlik, yangın güvenliği ve biyolojik güvenlik için talimatların tüm noktalarına kesinlikle uymak gerekir.

2.3 Sinovyal sıvı ve fonksiyonel amacın klinik laboratuvar analizi teknolojisinin uygulanması için koşullar

Sinovyal sıvının klinik laboratuvar analizi, uzmanlaşmış ayakta ve yatan hasta sağlık tesislerinin (romatoloji ve artroloji merkezleri) klinik tanı laboratuvarlarında gerçekleştirilir.

Hizmetin işlevsel amacı: Eklem hastalıklarını teşhis etmek, hastalığın seyrini ve ilerlemesini ve tedavinin etkinliğini izlemek amacıyla gerçekleştirilir.

2.4 Teknolojinin uygulanması için gerekli maddi kaynaklar: aletler, ölçü aletleri, laboratuvar ekipmanı

2.4.1. Daldırma ve dahili aydınlatıcılı binoküler mikroskop.

2.4.2 Polarize mikroskop.

2.4.3. Laboratuvar santrifüjü (soğutma ile: 5-8 °C).

Sinovyal sıvı peletleri 1000 rpm'de çalışan santrifüjlerle hazırlanmalıdır. Bir santrifüj kullanırken, üreticinin talimatlarına kesinlikle uyulmalıdır.

2.4.4. Saymak için sayaç hesap makinesi lökosit formülü kan (sinoviyositleri saymak için).

2.4.5. Test tüpleri için stand.

2.4.6. Lekeleri boyamak ve sabitlemek için kaplar ve küvetler.

2.4.7. Lekeleri kurutmak için cihaz.

2.4.8. Cam (plastik) ürünler.

2.4.8.1. Santrifüj tüpleri (10 mi).

SF'nin makroskopik çalışması için şeffaf cam tüpler kullanmak daha iyidir. SF'nin santrifüjü için, tortuyu konsantre etmek için konik bir şekle, eklemin delinmesi sırasında elde edilen sinovyal sıvı miktarını belirlemek için bir derecelendirmeye sahip olması ve riskini azaltmak için kapaklarla kapatılması gereken plastik santrifüj tüpleri kullanılır. sıçrayan. Tüpler, uygun hasta tanımlaması için kimyasal olarak temiz ve etiketlenmiş olmalıdır. Uygulama mümkün vakum tüpler.

2.4.8.2. Goryaev'in kamerası.

2.4.8.3. Yerel preparatın mikroskopisi için slaytlar ve lameller.

Lekeli preparasyonun mikroskopisi için nesne camı (tercihen işaretleme için buzlu bir alana sahip, boyut 26 x 76 x 1,1 mm.).

Smear hazırlamak için taşlanmış kenarlı cam slayt (26 x 76 x1.1 mm.) veya plastik spatula.

2.4.8.4. Sinovyal sıvıyı aktarmak için pipetler. Şu anda, ince çekilmiş uçlu ve sprey kutulu plastik Pasteur pipetleri kullanılmaktadır. standardizasyon tortu damlacık hacmi ve sinovyal sıvının yeniden süspansiyonu veya transferi ile ilişkili biyolojik tehlike riskini azaltır. Kuru ve kimyasal olarak temiz olmalıdırlar.

2.4.8.5 Cam çubuklar.

2.5 Reaktifler

2.5.1 Boyalı yaymaların hazırlanması için boya fiksatiflerinin ve diğer gerekli reaktiflerin çözeltileri (bkz. GOST R Kemik iliği punktatının sitolojik incelemesi);

2.5.2 çözümü asetik asit 5%;

2.5.3 EDTA (dikalsiyum veya disodyum tuzu).

2.5.4. alizarin kırmızı solüsyonu %2.

2.6 Diğer Sarf Malzemeleri

2.6.1. Lastik eldivenler.

2.6.2. Dezenfektanlar.

3. Sinovyal sıvı çalışması için teknolojiyi gerçekleştirme tekniğinin özellikleri

3.1 Sinovyal sıvı örneklerinin alınması

Preanalitik aşamanın doğru yürütülmesi için GOST R 53079.4-2008 standardının gerekliliklerine uymak gerekir. .

Eklemin delinmesi bir klinisyen tarafından gerçekleştirilir.

Sinovyal sıvı örneklerinin depolanması ve taşınması için kurallar,

Ek A.

Eklem delinirken SF, steril santrifüj tüplerinde (elde edilen SF miktarına bağlı olarak 2-3 veya daha fazla) toplanır ve hemen klinik tanı laboratuvarına aktarılır. Tüplerden biri (veya alınan tüp sayısına bağlı olarak daha fazlası) mikrobiyolojik çalışmalar için mikrobiyoloji laboratuvarına (bölümüne) gönderilir ve geri kalanı SF'nin klinik laboratuvar çalışmasını (fizikokimyasal özelliklerin belirlenmesi ve mikroskobik inceleme) yürütmek için kullanılır. sinoviyositogram hesaplanması, hücresel elementlerin 1 µl (sitoz) sayılması ve ayrıca biyokimyasal ve immünolojik çalışmaların yapılması ile masmavi-eozin preparatları ile doğal ve lekeli. SF'nin santrifüjlenmesinden sonra süpernatanda biyokimyasal ve immünolojik çalışmalar gerçekleştirilir. ve çökelti, bir polarize mikroskop kullanılarak doğal preparasyondaki kristalleri aramak ve ayrıca lekeli bir yaymada sinoviyositogramı saymak için kullanılır. Hücreleri saymak için, bir antikoagülan (disodyum veya dipotasyum EDTA) içeren bir tüpte SF toplayabilirsiniz. , SF almak için kullanılabilen K2EDTA'lı özel vakum tüpleri mevcuttur.

Uygun endikasyonlar varsa (neoplazm hücrelerinin varlığından şüpheleniliyorsa), lekeli yayma sitoloji laboratuvarına gönderilir.

3.2 Numune tanımlama

Araştırma sevkinde şu bilgiler yer almalıdır: hastanın soyadı ve adının baş harfleri, yaşı veya doğum tarihi, cinsiyeti, bölümü tıbbi kurum ve koğuş (bir hastanede), oda sağlık kartı(tanımlama numarası), teşhis, eklem sıvısı numunesinin toplanma tarihi ve saati, numunenin laboratuvara teslim zamanı. Tanımlanması gereken tüm göstergeler listelenmelidir. Gerekirse, delinmiş eklem içine enjekte edilen ilaçları belirtin.

Etiketlenmemiş veya yanlış etiketlenmiş numuneler test için uygun değildir ve testi sipariş eden klinisyene bildirilmelidir.

3.3 Numune kabulü

Sinovyal sıvı testi sonuçlarının doğruluğu büyük ölçüde teslim edilen örneğin kalitesine bağlı olduğundan, sinovyal sıvının depolanması ve taşınmasına ilişkin kurallara kesinlikle uyulması gerekir (Ek A).

Sinovyal sıvı numunesi laboratuvara teslim edildikten sonra, malzemeyi alan laboratuvar çalışanı, analiz için sevkin doğruluğunu, tabakların etiketlenmesini kontrol etmelidir (hastanın kodu veya soyadı ve diğer veriler, sevk formunda belirtilen verilerle aynı olmalıdır). ) ve alınan materyali kaydedin.

K2 EDTA'lı bir tüpte toplanan eklem sıvısı da 30 dakika içinde ve buzdolabında (sıcaklık 3-50C) saklandığında - en geç 24 saat içinde (sadece lekeli yaymaların incelenmesi için) incelenmelidir.

Not ─ Biyokimyasal ve immünolojik çalışmalar için SF süpernatantının uzun süreli depolanmasına -70°C'de izin verilir.

Analizin ertelenmesi ve numune soğutmanın kullanılması cevap kağıdında belirtilmiştir.

Numuneler test edilmeden önce oda sıcaklığına getirilmelidir.

3.4 Sinovyal sıvının fizikokimyasal özelliklerinin makroskopik olarak değerlendirilmesi ve incelenmesi

3.4.1 Sinovyal sıvının miktarı normalde 0,2 ila 2,0 ml arasında değişir (eklemin boyutuna bağlı olarak). Eklemlerin çeşitli hastalıklarında SF miktarı 100 ml veya daha fazla olabilir.

3.4.2. Sinovyal sıvı rengi.

Sinovyal sıvının rengi normal - açık sarı

NOT Açık sarı veya sarı sinovyal sıvı dejeneratif eklem hastalığında görülür; kanlı - travmatik artrit; inflamatuar eklem hastalıkları (romatoid artrit (RA), reaktif artrit (ReA), ankilozan spondilit, psoriatik artrit) sarı ve kahverenginin farklı tonlarıyla karakterize edilir (açık sarı, sarı, limon, açık kahverengi, kahverengi, kehribar veya turuncu); gut ile SF'nin açık sarı, yeşilimsi sarı, süt beyazı, süt sarısı, pembemsi beyaz rengi gözlenir; pirofosfat artrit ve kondrokalsinoz ile - sarı veya süt sarısı, septik artrit ile - grimsi-sarı, yeşilimsi-sarı veya kanlı.

3.4.3. sinovyal sıvının şeffaflığı.

Normal sinovyal sıvı tamamen şeffaftır. Bulanıklık genellikle hücresel elementlerin sayısındaki artıştan, kristallerin veya mikroorganizmaların varlığından kaynaklanır.

Şeffaflık puanı.

4 derece şeffaflık vardır: şeffaf, yarı saydam, orta derecede bulutlu ve yoğun bulutlu.

Not - dejeneratif eklem hastalıklarında (osteoartroz), SF şeffaf ve yarı saydamdır; inflamatuar hastalıklarda (RA, seronegatif artrit, gut, pirofosfat artriti) - yarı saydam, orta derecede bulutlu veya yoğun bulutlu; septik artrit ile - yoğun bulutlu, kalın.

3.4.4. Sediment varlığı.

Normalde, SF'de tortu yoktur. Sadece patolojide ortaya çıkar ve kural olarak hücre zarlarının parçaları, fibrin filamentleri, bunlardan kaynaklanan doku parçalarıdır. yıkım kıkırdak ve sinovyumun yanı sıra kristaller.

Not ─ Eklemlerin dejeneratif hastalıklarında, amiloidozda SF'de amorf bir çökelti bulunur. Eklemlerin enflamatuar hastalıklarında tortu neredeyse her zaman bulunur. RA'lı hastaların SF'sinde, özellikle genç RA'lı çocuklarda, fibrinle doymuş nekrotik sinovyal zarın mikroskobik parçalarından oluşan pirinç tanelerine veya "pirinç gövdelerine" benzeyen granüler bir tortu gözlemlenebilir. Böyle bir çökelti, sürecin yüksek enflamatuar aktivitesinin bir göstergesi olabilir.

3.4.5. viskozite

SF'yi diğer biyolojik sıvılardan ayıran en önemli özelliği, yüksek moleküler ağırlıklı bir polimer olan hyaluronik asidin varlığıdır. Esas olarak SF'nin ana işlevlerinin yerine getirilmesini sağlayan, yüksek viskoziteye sahip hyaluronik asittir. Hyaluronik asidin içeriği, moleküler ağırlığı ve sıvının viskozitesi arasında doğrudan bir ilişki vardır.

Viskozite belirleme yöntemleri.

Akışkanın viskozitesinin nicel özellikleri bir viskozimetre kullanılarak belirlenir.

Rutin çalışmalarda genellikle cam çubuk yöntemi kullanılır:

cam çubuk SF'ye indirilir ve ardından çıkarılır. Viskozite, müsin ipliklerinin uzunluğu ile tahmin edilir, üç derece viskozite vardır:

5 cm'nin üzerinde bir iplik uzunluğu ile - yüksek viskozite, 5 cm'ye kadar - orta, 1 cm'den az - düşük.

Viskoziteyi nokta birimlerinde ifade etmek mümkündür: 1 - yüksek, 2 - orta, 3 - düşük. Normalde sıvının viskozitesi yüksektir.

Viskozitenin yoğunluğu, kristallerin konsantrasyonuna, hyaluronik asidin polimerizasyon derecesine ve sıcaklığa bağlıdır.

N o t e ─ Kullanım enstrümantal yöntemlerçeşitli viskozimetrelerin kullanılması (cihazın mevcudiyeti dışında) bir dizi ek işlem ve dolayısıyla önemli bir zaman yatırımı gerektirir, ancak mevcut laboratuvar testi ile karşılaştırıldığında temelde yeni herhangi bir bilgi sağlamaz.

4.4.6. Sinovyal sıvıdaki müsin pıhtısının yoğunluğunun belirlenmesi.

SF'deki hyaluronik asit, müsin olarak bilinen proteinlerle bir kompleks içinde bulunur. Bir müsin pıhtısının tanımı, enflamatuar hastalıklarda büyük tanısal değere sahiptir. Sinovyal sıvıdaki müsin testi, viskozite ile iyi ilişkilidir.

Bir müsin pıhtısının yoğunluğunu incelemek için yöntemler.

Yöntemin prensibi: asetik asit SF'ye maruz kaldığında bir müsin pıhtısı oluşur.

Tanım ilerlemesi:

3 ml %5 asetik asit (CH3COOH) çözeltisi içeren bir test tüpüne bir damla SF eklenir. Tüpün içeriğini 1 dakika kuvvetlice çalkalayın, bir çökelti oluşur. 4 derece tortu yoğunluğu vardır: yoğun (tortu yoğun bir yumru gibi görünür), orta derecede yoğun (bir tür dallanmış, ancak parçalanmamış yapı), orta derecede gevşek ve gevşek - az ya da çok küçük parçacıklara ayrılır. Yoğun bir müsin pıhtısı oluşumu, önemli bir müsin içeriğine işaret eder.

Normalde tortu yoğundur.

Not 1 - İnflamatuvar olmayan artropatilerde müsin pıhtısı genellikle yoğun veya orta yoğunluktadır.Eklemlerin iltihaplı hastalıklarında orta derecede gevşek ve gevşektir.

Not 2 - Müsin pıhtısının viskozitesinin ve yoğunluğunun belirlenmesi, eklemdeki "enflamatuar olmayan" ve enflamatuvar süreçleri ayırt etmek için esastır. Bu yöntemler karşılıklı olarak kontrol edilebilir: bir yöntemin göstergeleri kesinlikle diğerinin göstergelerine karşılık gelir. Yüksek viskozite, yoğun, orta - orta yoğun, düşük - orta derecede gevşek ve gevşek müsin pıhtısına karşılık gelir.

3.5 Sinovyal sıvının mikroskobik incelemesi

3.5.1 Mikroskobik inceleme için bir eklem sıvısı örneği için gereksinimler.

Mikroskobik inceleme yapmadan önce, doktor eklem sıvısının alınma zamanı ve fizikokimyasal özelliklerin değerlendirilmesinin sonuçları hakkında bilgi sahibi olmalıdır.

Şu anda, biyolojik sıvıları almak için bir antikoagülan (K2EDTA) içeren vakumlu tüpler üretilmektedir, bu da hücresel elementler için koruyucudur ve onları etkilemez. morfoloji.

Not 1─ K2EDTA ile stabilize edilmiş sinovyal sıvı, ragositleri saptamak için kullanılamaz.

Üç tür mikroskobik inceleme vardır:

Goryaev odasındaki (sitoz) doğal sinovyal sıvıdaki hücrelerin sayılması, doğal preparatın incelenmesi ve sinoviyositogramın hesaplanmasıyla azure-eozin ile boyanmış preparat.

3.5.2 Goryaev odasındaki 1 µl sinovyal sıvıdaki hücresel elementlerin sayısının sayılması (sitozun belirlenmesi).

Araştırma ilerlemesi.:

Çalışma, doğal veya stabilize K2EDTA eklem sıvısında gerçekleştirilir.

0,4 ml izotonik veya hipotonik NaCl çözeltisini bir test tüpüne dökün.

Süspansiyonu süzün ve koyu renkli bir cam şişede buzdolabında saklayın. Çalışmadan hemen önce, gerekli miktarda boyayı bir milipor filtreden süzün.

Santrifüjden sonra elde edilen eşit hacimde SF veya tortu ile 20 µl boyayı karıştırın. Doğal bir preparat hazırlamak ve mikroskobik olarak polarize bir mikroskopta hazırlamak daha iyidir: oval şekilli kristaller, 2-3 mikron çapında, pembe bir halo ile doymuş kırmızı renk.

NOT 4 Bu kristaller hidroksiapatit artropatisinde bulunur.

Kalsiyum oksalat, kolesterol, lipidler, Charcot-Leiden vb. kristalleri de eklem sıvısında bulunabilir.

Not 5 - Kalsiyum oksalat (C2CaO4 · H2O) kristalleri genellikle kübik şekildedir, ancak posta zarflarına benzeyen oktahedronlar veya dikdörtgenler şeklinde çeşitli boyutlarda renksiz, parlak, yüksek derecede kırılma kristalleri oluşturabilir. Bazen yuvarlak ve kesilmiş kalsiyum oksalat kristalleri vardır. kum saati, jimnastik ağırlıkları veya yaylar (C2CaO4 2H2O). Bu kristaller, polimorfonükleer lökositler (nötrofiller) tarafından fagosite edilebilir.

NOT 6 Lipidlerin sıvı kristalleri, her lipid damlasını dört beyaz parlak segmente bölen siyah Malta haçları olarak karanlık alanda gösterilmektedir. Damla nötr yağışığın iki ışınlı kırılma etkisine sahip değildir.

Kolesterol, sodyum oksalat ve sıvı lipid kristalleri herhangi bir eklem hastalığına özgü değildir ve metabolik bir bozukluğu yansıtan çeşitli artropatilerde ortaya çıkabilir.

NOT 7 Amiloid kümeleri SF'de bulunabilir. Bunlar, karakteristik bir parlaklığa sahip, bir ağacın testere kesimine benzeyen, yuvarlak bir şekle, katmanlı bir yapıya sahip renksiz oluşumlardır. Doğal preparasyonlarda x400 büyütmede ve daldırmayla x1000 büyütmede tanımlanırlar. Amiloid, Kongo kırmızısı ile boyanmış doğal SF'de tespit edilebilir. Elde edilen preparasyon hem ışıkta hem de polarize mikroskopta görüntülenebilir.

Amiloid topaklar, amiloid artropati ile ilişkili hastalıklarda bulunur.

Hematoidin kristalleri.

Hematoidin kristalleri, oksijensiz hematomlarda hemoglobinin parçalanmasıyla oluşur. Bunlar hafif uzun elmaslar ve/veya altın sarısı iğnelerdir. Hematoidin kristalleri hem doğal hem de gök mavisi eozin lekeli preparasyonlarda iyi ayırt edilebilir. Bu kristaller genellikle SF'de oldukça küçük olduğundan, doğal preparatların daldırma yoluyla mikroskobik olarak incelenmesi önerilir. Enflamasyonun odağında, bu kristaller makrofajlar tarafından fagosite edilebilir veya hücresel elementlerin yüzeyinde yer alabilir.

NOT 8 Travma ve eklem içi kanama durumunda eklem boşluğunda hematoidin kristallerinin oluşabileceği koşullar oluşturulur.

Charcot-Leiden kristalleri.

Charcot-Leyden kristalleri, bir pusula iğnesi veya uzunluğu keskin bir şekilde uzatılmış bir elmas şeklindedir. Genellikle Charcot-Leyden kristalleri, detritusun arka planında veya çok sayıda eozinofil ile kombinasyon halinde bulunur ve eozinofillerin eozinofilik granülerlikten parçalanması sırasında oluşur, bu kristaller alerjik sinovitten muzdarip hastaların SF'sinde bulunabilir.

Tıbbi Kristaller

Steroidler. Eklem içi enjeksiyonlar steroid ilaçlar, 10 haftaya kadar devam edebilecekleri eklemlerin içinde kristalleşmelerine yol açar. Doğal preparatların mikroskobik incelemesi sırasında bu kristallerin saptanması ve ardından yanlış farklılaşma hatalı sonuçlara yol açabilir.

SF'de hücresel olmayan ve kristal olmayan elementler.

SF'de kıkırdak parçaları ve hasarlı bağlar bulunabilir. Doğal preparattaki kıkırdak parçaları, karakteristik ipeksi parlaklıklarıyla tanınabilir. Kıkırdak parçaları ayrıca, dalgalı olarak temsil edilen kondrosit kümeleri ve menisküs parçalarını içeren bulunur. kolajen lifler ve ayrıca kondrositler; bağ parçaları, uzun ince fibriller ve paralel kollajen iplikçikleriyle temsil edilir.

NOT 9 En sık olarak diz yaralanmasını takiben SF'de ortaya çıkar.

Not 10 - Polarizasyon mikroskopisi yönteminin yüksek hassasiyetine rağmen, kullanımı sırasında, genellikle belirli bir mikroskobun yetersiz çözünürlüğünden, yabancı kristal benzeri safsızlıkların varlığından ve lam veya lamel camındaki hasardan kaynaklanan ciddi hatalar mümkündür. . Mikroskobun girişim olasılığının farkında olması ve kristal tanıma ilkelerine aşina olması gerekir.

3.5.5. Azure-eozin ile boyanmış sinovyal sıvı preparatlarının mikroskobik incelemesi (sayım sinoviositogramı ile).

SF yaymalarının hazırlanması ve boyama yöntemleri (bölüm 5.5.2).

Sinovyal sıvının hücresel bileşimi (sinoviyositogram).

SF'nin hücresel bileşiminin belirlenmesi, çalışmasında tanıyı netleştirmeye, sürecin enflamatuar aktivitesinin derecesini ve prognozu belirlemeye izin veren en önemli aşamadır. Hücrelerin kantitatif dağılımının belirlenmesi (sinoviyositogram) için en önemli göstergedir. ayırıcı tanı eklem hastalıkları. Hücre yüzdesinin hesaplanması, lökosit kan formülünün hesaplanmasıyla aynı şekilde gerçekleştirilir. (Bir yaymadaki 100 hücre sayılır ve her hücre tipinin yüzdesi hesaplanır).

Normalde, doku kaynaklı hücreler (sinoviyositler ve histiyositler) SF'de baskındır - %65'e kadar. Lenfositler yaklaşık %30, monositler ve nötrofiller ise %1-2'dir.

SF'deki kan hücreleri.

Nötrofiller (polimorfonükleer lökositler).

Nötrofiller, çap olarak (14-16 mikron) bir eritrositten 1.5-2 kat daha büyüktür. Çekirdek ve sitoplazma oranı çekirdeğe doğru kaydırılır. Sitoplazma, hücre çekirdeğinin rengine sahip ince, tozlu taneciklerle dolu leylak rengindedir. Çekirdekler, oksikromatin ve bazikromatine net bir bölünme ile 3-4 bölümden oluşur. Distrofi ile nötrofillerdeki segment sayısı keskin bir şekilde 5-7'ye (hipersegmentasyon) yükselir. Nötrofildeki apoptoz sırasında, çekirdeğin parçaları bir veya iki hiperkromik homojen, doğru yuvarlak şekle sahip yapısız kütleler halinde birleşir.

Normal SF'de formüldeki nötrofil sayısı %1-2'yi geçmez.

NOT 1 Romatoid artritte nötrofil sayısı %90'a ulaşır ve lenfosit sayısı %10'a düşer. Ankilozan spondilitte de benzer bir tablo görülmektedir. İnflamatuar hastalıklarda ve eklem içi kanamalarda SF formülünde nötrofiller %60-80, septik artropatide ise %95'ten fazlasını oluşturur.

Lenfositler.

Bu hücrelerin çapı 12 mikrona kadardır. Sitoplazma ve çekirdek oranı çekirdeğe doğru kaydırılır (9:1). Çekirdek kabaca yığılmış bir yapıya sahiptir, bazofilik sitoplazma, çekirdeği dar bir çerçeveyle çevreler, bazen çekirdeğin etrafında bir aydınlanma alanı görülür.

Normal SF'de lenfosit sayısı %8-30 arasında değişir.

NOT 2 Enflamatuar hastalıklarda nötrofiller, dejeneratif hastalıklarda ise lenfositler baskındır. SF'deki eklemlerin dejeneratif hastalıkları ve travmatik artrit ile lenfositlerin içeriği% 85'e ulaşır. Formülde ayrıca toksik alerjik sinovit ve tüberkülozun sinovyal formunda lenfositler baskındır. artrit için viral etiyoloji, örneğin, HTLV-1 virüsünün neden olduğu - sayısı% 20'ye ulaşan atipik lenfositler ortaya çıkar.

monositler.

NOT 3 Monositler, viral artrit ve monositik artrit dahil olmak üzere çeşitli artiküler artropatilerde ve ayrıca implant protezlerine verilen hasarda bulunur.

SF'deki (patolojide) bu hücrelere ek olarak, diğer kan hücreleri de az miktarda tespit edilebilir: eozinofiller, bazofiller, plazma hücreleri.

Not 4 - Eozinofiller, SF'de son derece nadirdir ve periferik kan eozinofilleriyle aynıdır.

Not 5 - Bazofiller, inflamatuar artritte, seronegatif artropatide, travma ile ilişkili inflamatuar olmayan artropatilerde az sayıda bulunur.

NOT 6 Plazma hücreleri, inflamatuar artropatilerde SF'de bulunur. Plazma hücrelerinin tespiti, özellikle romatoid artrit için, yani uzun, yavaş bir inflamatuar süreç için tipiktir.

SF'deki doku hücreleri.

sinoviyositler.

Bu hücreler, eklemlerin sinovyal zarlarını kaplayan tek katmanlı yassı epitele aittir. Morfolojilerinde mezotelyal hücrelerle aynıdırlar. sinovyasit - epitel hücreleri 18-25 mikron çapında, farklı nükleer/sitoplazmik orana sahip. Merkezi veya eksantrik olarak yerleştirilmiş, yuvarlak veya oval şekilli, küçük topaklı veya ilmekli bir yapıya sahip, geniş bir bazofilik sitoplazma kenarı ile çevrili, bazen çevre boyunca bir "fırfır" olan çekirdekler içerirler. Bazı sinoviyositlerin perinükleer bölgesindeki sitoplazma ince taneler içerir. Sinoviyositler eklemin sinovyal zarının yüzeyinden kopar ve artropatilerde SF'de bulunur. Sinovyal hücreler 2 veya daha fazla çekirdek (çok çekirdekli) içerebilir.

Üç tip sinoviyosit vardır:

A tipi - fagositoz yapabilen makrofaj sinoviyositleri;

B tipi - hyaluronik asidi sentezleyebilen ve salgılayabilen sinovyal fibroblastlar;

AB tipi - bu iki özelliği birleştiren hücrelerin geçiş formları.

Histiyositler.

Doku makrofajları, ince taneli veya granüler olmayan sitoplazma ile çevrili yuvarlak veya monositoid kompakt çekirdeğe sahip mikron boyutlu hücrelerdir.

NOT 7 Histiyositler, enflamatuar süreçler sırasında SF'de her zaman mevcuttur.

NOT 8 Sinoviyositler veya plazma hücreleri olan ve bu hücrelerin mononükleer varyantları ile aynı öneme sahip olan çok çekirdekli hücreler SF'de bulunabilir.

NOT 9 SF'de sitoplazmada homojenize nükleer materyal inklüzyonları içeren LE hücrelerinin tespiti, periferik kanın aksine, SLE'nin doğrudan bir göstergesi değildir. Bununla birlikte, SF'de çok sayıda lenfosit ile LE hücrelerinin kombinasyonu, bir hastada SLE varlığından şüphelenmeyi mümkün kılar.

NOT 10 - Mitozdaki hücreler.

Mitotik figürlerin tanı değeri yoktur. Bir bölünme durumundaki sinoviyositler, eklem torbasını kaplayan hücrelerin çoğalma sürecini doğrular.

farklılaşmamış hücreler

Hemen hemen tüm sinoviyogramlarda farklılaşmamış hücreler gözlenir.

İnce, iyi yapılmış SF smearlerinde, fiksatifler veya boya fiksatifleri ile sabitlenmiş ve azure-eozin ile boyanmış, tüm hücresel elementler farklılaşmaya müsaittir. Sadece laboratuvar asistanının deneyimsiz bir eli tarafından viskoz, hiperselüler ve daha önce seyreltilmemiş SF'den hazırlanan kalın smearlerde ayırt edilemeyen hücrelere rastlanır. Herhangi bir hücresel element olabilir - hem doku hem de kan. Bu tür müstahzarlarda kristalleri ve mikroorganizmaları tespit etmek neredeyse imkansızdır.

4. Sinovyal sıvı analizi sonuçlarının kaydı

Her laboratuvar çalışanı, sonuçları bildirmek için aynı formları (test sonuçları formları) kullanmalıdır. Form, laboratuvarın adını ve tıbbi organizasyon; hasta hakkında onu tanımlamak için yeterli bilgi; biyolojik materyalin adı ve incelenen tüm göstergeler; örneğin alındığı tarih ve varsa, alındığı zaman; Araştırma sonuçları; referans aralıkları; çalışmayı yapan çalışanın adı ve imzası. Sonuç verme prosedürü, tıbbi organizasyon başkanı tarafından onaylanan talimat ile belirlenmelidir.

5. Sinovyal sıvı analizi teknolojisi performansının kalite güvencesi

5.1. Kalite güvence programları

Kalite Güvence Programları, hastanın teşhis ve takip yeteneklerinin yeterince yüksek olduğundan emin olmak için prosedürün her yönünün tutarlı bir şekilde izlenmesini içerir. Kalite güvence programları işin tüm aşamalarını içermeli ve sürecin tüm bileşenleri (hasta, laboratuvar, klinisyen) arasında bağlantılar kurmalıdır. Numune alma, depolama, teslimat, manuel işleme, kayıt ve belgelerin düzenlenmesi aşamalarında da kontrol gereklidir. Personelin teknik yeterliliği, eğitimin sürekliliği de kontrol edilmelidir. Tüm kontrol faaliyetlerinin başarılı bir şekilde uygulanması için GOST R ISO 15189 -2006 standardında belirtilen kurallara uyulması gerekmektedir. .

5.2. Kontrol önlemlerinin kayıt tutulması

Kontrolün kaydı tüm seviyelerde yapılmalıdır: analitik öncesi, analitik ve analitik sonrası, her aşama için tüm prosedürlerin yürütülmesi için kurallar geliştirilmeli ve belgelenmelidir.

Klinisyenler için randevu ve numune alma tarihi, hasta kimlik bilgileri, teşhis, ilaç bilgileri veya teşhis prosedürleri eğer çalışmanın sonuçlarını etkileyebilirlerse.

SF numuneleri alma tekniği standardize edilmeli ve doktorlar ve hemşireler için ilgili talimatlarda ayrıntılı olarak açıklanmalıdır. cerrahi eklemlerin delinmesini üreten bölümler.

Numune teslimi talimatları, numunelerin saklama koşullarını ve koşullarını ve güvenli taşıma kurallarını içermelidir.

Laboratuvar personeli için numuneleri kabul etme ve reddetme kriterleri, numune kaydı, işleme, etiketleme ve numune saklama gereklilikleri analizden önce tanımlanmalıdır. Analitik aşama, araştırma yöntemlerine uygun olarak gerçekleştirilir. Analiz sonrası aşamada, ilaç etkileşiminin bir değerlendirmesini, sonuçların bir referans aralığı ile karşılaştırılmasını ve kayıt doğruluğunun doğrulanmasını içermesi gereken analiz sonuçlarının kabul edilebilirliğini değerlendirmek için kurallar geliştirmek gerekir. Sonuçların açıklanacağı form kurum tarafından onaylanmalı ve tedavi departmanları ile kararlaştırılmalıdır.

5.3. Kullanılan yöntemler için talimatlar laboratuvar araştırması

Laboratuvar araştırması yapma sürecinin metodolojisi belgelenmeli ve işyerinde mevcut olmalıdır. Metodoloji şuna dayanmalıdır: yönergeler veya öngörülen şekilde onaylanan diğer belgeler. SF numunelerini kabul etme veya reddetme kriterlerini içermelidir (numune alındıktan sonra numunenin saklandığı sürenin uzunluğu, araştırma için yeterli miktarda SF dikkate alınarak); referans aralıkları; sonuçların kayıt yöntemi; test malzemesinin biyolojik tehlikesine ilişkin önlemler; yanlış pozitif ve yanlış negatif sonuçların nedenleri.

5.4. Mikroskobik incelemelerin kalite kontrolü.

Görsel yöntemin analitik güvenilirliği için gereksinimler geliştirilirken, görüntülerin görsel olarak incelenmesi, çalışılan biyomalzeme bileşenlerinin doğru tespiti ve sınıflandırılması konusunda geniş deneyime sahip bir araştırmacı tarafından üretilen biyomalzeme örneklerinin çalışmasının sonuçları bir kılavuz olarak kullanılmalıdır.

5.5. Sürekli Eğitim uzmanlar

Analizin kalitesini sağlamak için, personelin nitelikleri, yürütülen çalışmanın karmaşıklığına uygun olmalıdır. Tüm laboratuvar personeli, uygun lisansa sahip tıp eğitim kurumları tarafından yürütülen iyileştirme döngüleri konusunda periyodik olarak (beş yılda bir) eğitimden geçmelidir. Her uzman kendi kendine eğitim almalıdır. Laboratuvar erişilebilir olmalıdır çağdaş edebiyat, laboratuvar teşhisleri ve atlaslarla ilgili süreli yayınlar dahil. Laboratuvar uzmanlarının konferans ve seminerlere katılması gerekmektedir.

6. Çalışma ve dinlenme rejimi, diyet ve hastanın hazırlanmasındaki kısıtlamalar için gereklilikler

Numune alımını gerçekleştiren personel için numune alma prosedürüne ek olarak hastayı hazırlama koşullarını içeren bir talimat geliştirilmelidir. İlaçların etkisi özellikle önemlidir, örneğin kristalleşebilen eklem içine steroid hormonlarının girmesi (Ek A.2).

7. Sinovyal sıvının klinik laboratuvar analizi teknolojisinin uygulanması için işçilik maliyetleri

Tablo 1 - "Sinovyal sıvının klinik laboratuvar analizi" teknolojisinin uygulanması için UET'deki işçilik maliyetleri

EK A

(referans)

SF numunelerinin toplanması, saklama ve teslim koşulları (preanalitik aşama)

A.1 Giriş

Eklem ponksiyonu klinisyenler tarafından gerçekleştirilir.

Ön analiz aşaması şu şekilde gerçekleştirilir: tıbbi bölüm ve biyomateryalin laboratuvara tesliminden sonra - laboratuvarın kendisinde. Klinisyenler araştırma için başvurular hazırlar. Başvuruda hastanın tam adı, cinsiyeti, yaşı veya doğum yılı, biyomateryalin elde edilme yöntemi, delinecek eklem, delinme zamanı, SF, doğal ve K2 EDTA ile doldurulmuş tüplerin sayısı belirtilmelidir. Klinik tanı ve etki analizi belirtilmelidir. ilaçlar. Hastanın aldığı teşhis veya kullandığı ilaçların sonuçları etkileyecek şekilde sıralanmaması, sonuçların yanlış yorumlanmasına ve teşhiste hata yapılmasına neden olabilir. Bölümün hemşire personeli, hastanın hazırlanmasından, SF'li test tüplerinin acilen klinik tanı laboratuvarına tesliminden sorumludur.

Laboratuvarda preanalitik aşamanın devamı, gelen biyomateryalin alınması ve kayıt altına alınması, gerekirse çalışmaya kadar saklanması, işlenmesi ve çalışmaya hazırlanmasından ibarettir.

Klinisyenler tarafından test taleplerinin hazırlanması çok önemli noktaçünkü teşhisin doğruluğu büyük ölçüde doğru uygulamaya bağlıdır.

A.2 Hasta hazırlığı

Hastanın eklem ponksiyonu için hazırlanması standardize edilmelidir.

Eklem kapsülüne enjekte edilen steroidler kristalleşebilir ve patolojik sürecin teşhisine müdahale edebilir veya yanlış tanıya neden olabilir, bu nedenle eklem ponksiyonundan en az 5-7 gün önce eklem içi steroid uygulaması iptal edilmelidir. Steroidlerin eklem kapsülüne girmesi önceden iptal edilemezse, klinisyen bu ilaçların girişini çalışma başvurusunda belirtmelidir. Başvuruda hastanın pasaport verilerinin yanı sıra hangi eklemin delindiği, SF ile dolu tüp sayısı, delinme zamanı ve klinik tanının en azından tanısal düzeyde belirtilmelidir. Varsayım.

A.3 Depolama ve teslimat.

İçin genel analiz SF genellikle ponksiyondan hemen sonra laboratuvara iletilir. Stabilize edilmemiş SF'den hazırlanan doğal bir preparasyon çalışması, ragositleri ve kristalleri saptamanın yanı sıra sitozu belirlemek için yürütülmektedir. K2 EDTA ile stabilize edilmiş SF içeren bir test tüpünü buzdolabında +3-+50C sıcaklıkta 24 saat saklayarak lekeli yayma çalışılabilir.

SF'nin -70 ° C sıcaklıkta uzun süreli depolanmasına izin verilir; bu numuneler biyokimyasal ve immünolojik çalışmalar için kullanılır.

No t e ─ Şu anda, 100 ml'lik biyolojik sıvıları toplamak için özel vakumlu tüpler ve tek kullanımlık kaplar, kırılmaz malzemeden, reaktifler olmadan, K2EDTA veya diğer direktiflerle üretilmektedir.

bibliyografya

1.Zakharova eklem sıvısı. İçinde: Romatoloji. Ulusal rehberler. Ed. Rusya Tıp Bilimleri Akademisi Akademisyeni ve Rusya Tıp Bilimleri Akademisi Akademisyeni. M., "GEOTAR-Media", 2008, s. 62-66.

2. Yayılmayı önlemek için alınacak önlemlere ilişkin talimat bulaşıcı hastalıklar tıbbi kurumların klinik teşhis laboratuvarlarında çalışırken, Moskova, 1991.

3. Tıbbi kurumlardan atıkların toplanması, depolanması ve bertarafı için kurallar. SanPiN 2.1.1.728-99., Moskova, 1999

4. GOST R ISO 52095 -2:2003) Güvenlik gereksinimleri.

5. GOST R 53079.4-2008 Tıbbi laboratuvar teknolojileri. Klinik laboratuvar araştırmalarının kalitesini sağlamak. Bölüm 4 Klinik laboratuvar çalışmalarının preanalitik aşamasını yürütmek için kurallar.

6. GOST R ISO 15189 -2006 Tıbbi laboratuvarlar. Kalite ve yeterlilik için özel gereksinimler.

Standartlaştırılmış teknoloji taslağı aşağıdakiler tarafından hazırlanmıştır:

, (MMA adını I.M. Sechenov'dan almıştır), (Rusya Tıp Bilimleri Akademisi Romatoloji Araştırma Enstitüsü), (RMAPE), (Rus Tıp Bilimleri Akademisi'nin adını taşıyan RCSC), (Moskova poliklinik No. 000).

Sinovyal sıvı analizi neden yapılır?

Birinci basamakta, eklem sıvısı (SF) verileri, hastanın sevk edilmesi gereken uzmanın belirlenmesine yardımcı olabilir.

• Enflamatuar olmayan SF ise - ortopediste.
• Enflamatuarsa - romatolog için.

Sinovyal sıvı analizinin tanısal değeri

• Enflamatuar veya enflamatuar olmayan patoloji
• Kristal enflamasyon veya sepsis veya alevlenme
• Hücre sayısına ve türüne göre hastalık gruplarının belirlenmesinde yardım
• Protez yetmezliğinin tipinin belirlenmesi
• tahmini değer
• ortopedik müdahale
• Belirli bir hastalığın evresi
• Terapi izleme. Özellikle monoklonal antikor tedavisinin reddi.

Şek. Şekil 1 ve 2, sinovyal sıvı analiz verilerine dayalı eklem hastalıklarının teşhis edilmesine yönelik algoritmayı yansıtmaktadır.

Hastalıklı eklemi çevreleyen dokulardaki patolojik değişiklikler hacme yansır, hücresel bileşim ve sıvıda katı parçacıkların varlığı. inflamatuar hastalıklar etiyolojide farklılık gösteren eklemler, belirli bir hastalığın veya hastalık grubunun tanısında tanınabilen ve kullanılabilen karakteristik hücre modellerine sahiptir (Şekil 1, 2). Bu farklılıkları tanımlamak için, otolitik değişiklikleri ve karakteristik CL'nin bozulmasını en aza indirmek için SF'yi doğru şekilde seçmek ve uygun şekilde depolamak gerekir. EDTA antikoagülan olarak kullanılır. 4°C'de saklama SF tarafından iyi tolere edilir ve mükemmel teşhis sonuçları verir. Aspirasyondan 48 saate kadar pratik olarak yeterli sonuçlar elde edilebilir, ancak 4°C'de bile daha uzun saklama genellikle sadece kristallerin ve partiküllerin tanımlanmasına izin verir. Cl'nin çoğu lizise uğrar.

Sinovyal sıvının sitolojik analizi

Obezite Cl, eklem hastalığı olan çoğu hastada SF analizinde bulunabilir, ancak en sık seronegatif spondiloartropatili hastalarda inflamatuar artritte ve travma ile ilişkili inflamatuar olmayan eklem lezyonlarında gözlenir.

Bu tip Cl sıklıkla eklem içi kanaması veya artrografisi olan hastaların SF analizinde ve ayrıca alerjik reaksiyon yapay SF gibi enjekte edilebilirlere.